酸化還元色素添加半固体培地を使用した細菌運動性の可視化

要約

出典: Chu、W.、およびZhuang、X.色反応に基づく細菌の運動性の視覚化。 J. Vis. 経験。 (2022年)

このビデオでは、運動性株と非運動性株を視覚的に区別することにより、細菌の運動性を評価するための酸化還元色素ベースの半固体寒天アッセイを示します。

プロトコル

細菌株

手記： 大腸菌、緑膿菌、サルモネラ属、ビブリオ属、肺炎桿菌、エアロモナス・ハイドロフィラを含む80株を水生環境から単離し、自動細菌同定装置を使用して同定した( 材料表を参照) (表1)。黄色ブドウ球菌( 材料表を参照)は、陰性の非運動性対照として使用されました。大腸菌、緑膿菌、およびネズミチフス菌(材料表を参照)を陽性対照株として使用しました。

1. 運動性分析に使用する試験細菌株を特定します。
2. 陰性非運動性コントロールと運動性陽性コントロール株を含めます。

TTC増強細菌運動性観察

1. 寒天プレートから試験細菌の単一コロニーを摘み取り、接種針で穿刺してTTC(2,3,5-トリフェニルテトラゾリウムクロリウム)を半固体培地に接種します。
2. チューブをインキュベーターで37°Cで24〜48時間培養して、結果を観察します。
3. 成長状態を観察します:穿刺線のみが赤の場合、細菌を非運動性(-)として特徴付けます。赤色が穿刺線に沿って外側に軽く広がる場合、細菌を運動性(+)として特徴付けます。

表1:細菌の運動性の比較。

濾す		寒天0.4%の半固体培地		0.4%寒天と0.005%TTCの半固体培地
		24時間	48時間	24時間	48時間
緑膿菌ATCC27853		+	+	+	+
大腸菌 ATCC25922		+	+	+	+
チフス菌 ATCC14028		+	+	+	+
黄色ブドウ球菌 ATCC25923		-	-	-	-
大腸菌 (15)		12	14	13	14
サルモネラ属 (8)		7	8	8	8
A.ハイドロフィラ (20)		18	20	20	20
ビブリオ 属 (8)		7	8	8	8
緑膿菌 (24)		18	20	22	23
肺炎菌 (5)		-5	-5	-5	-5
数字は、陽性菌株(+)と陰性染色菌(-)の数を示します。

材料