出典: Chu、W.、およびZhuang、X.色反応に基づく細菌の運動性の視覚化。 J. Vis. 経験。 (2022年)
このビデオでは、運動性株と非運動性株を視覚的に区別することにより、細菌の運動性を評価するための酸化還元色素ベースの半固体寒天アッセイを示します。
このコンテンツを表示するには、JoVEへの購読が必要です。 または、無料トライアルをお申し込みください。
方法論記事
酸化還元色素添加半固体培地を使用した細菌運動性の可視化
853 回視聴
⸱
2025年9月26日
この記事について
要約
プロトコル
細菌株
手記： 大腸菌、緑膿菌、サルモネラ属、ビブリオ属、肺炎桿菌、エアロモナス・ハイドロフィラを含む80株を水生環境から単離し、自動細菌同定装置を使用して同定した( 材料表を参照) (表1)。黄色ブドウ球菌( 材料表を参照)は、陰性の非運動性対照として使用されました。大腸菌、緑膿菌、およびネズミチフス菌(材料表を参照)を陽性対照株として使用しました。
- 運動性分析に使用する試験細菌株を特定します。
- 陰性非運動性コントロールと運動性陽性コントロール株を含めます。
TTC増強細菌運動性観察
- 寒天プレートから試験細菌の単一コロニーを摘み取り、接種針で穿刺してTTC(2,3,5-トリフェニルテトラゾリウムクロリウム)を半固体培地に接種します。
- チューブをインキュベーターで37°Cで24〜48時間培養して、結果を観察します。
- 成長状態を観察します:穿刺線のみが赤の場合、細菌を非運動性(-)として特徴付けます。赤色が穿刺線に沿って外側に軽く広がる場合、細菌を運動性(+)として特徴付けます。
表1:細菌の運動性の比較。
| 濾す | 寒天0.4%の半固体培地 | 0.4%寒天と0.005%TTCの半固体培地 | |||
| 24時間 | 48時間 | 24時間 | 48時間 | ||
| 緑膿菌ATCC27853 | + | + | + | + | |
| 大腸菌 ATCC25922 | + | + | + | + | |
| チフス菌 ATCC14028 | + | + | + | + | |
| 黄色ブドウ球菌 ATCC25923 | - | - | - | - | |
| 大腸菌 (15) | 12 | 14 | 13 | 14 | |
| サルモネラ属 (8) | 7 | 8 | 8 | 8 | |
| A.ハイドロフィラ (20) | 18 | 20 | 20 | 20 | |
| ビブリオ 属 (8) | 7 | 8 | 8 | 8 | |
| 緑膿菌 (24) | 18 | 20 | 22 | 23 | |
| 肺炎菌 (5) | -5 | -5 | -5 | -5 | |
| 数字は、陽性菌株(+)と陰性染色菌(-)の数を示します。 | |||||
アクセスが制限されています。このコンテンツを表示するにはログインするか、トライアルを開始してください。
材料
| 名前 | 会社 | カタログ番号 | コメント |
|---|---|---|---|
| バクト寒天 | ディフコ | ||
| 大腸菌 | ATCCの | ATCC25922 | ポジティブコントロール |
| 緑膿菌 | ATCCの | ATCC27853 | ポジティブコントロール |
| 黄色 ブドウ 球菌 | ATCCの | ATCC25923 | 負の非運動制御 |
| トリプトース | オキソイド | ||
| TTC(2,3,5-トリフェニル-テトラゾリウム塩化物) | シグマ | 298-96-4 | |
| VITEK 2自動微生物同定システム | バイオ メリュー |
