ビブリオ・コレラ菌のバイオタイプを区別するためのVoges-Proskauerアッセイ

要約

出典: Brumfield, K. D. ら、臨床および環境分離株のビ ブリオ・コレラ 菌バイオタイプの維持および鑑別に用いられる実験技術。 J. Vis. Exp. (2017年)。

このビデオでは、 Vibrio cholerae の3つの生物型、古典型、野生型El Tor、El Tor型を区別するためのVoges-Proskauer(VP)検査を実演します。各培養液はグルコース含有培地に接種され、培養後、αナフトールおよび水酸化カリウムで処理され、アセトインの存在を検出します。ピンクがかった赤色は、野生型エル・トールのバイオタイプにのみ見られ、古典型および変異型と区別されます。

プロトコル

フォーゲス・プロスカウアー(VP)アッセイ

1. 液体LBブロスで一晩培養液を準備します。
2. メチルレッドのVoges-Proskauer(MR-VPブロス)4mLを、事前に準備した10μLの夜間培養液を無菌培養管内の4mL MR-VPブロスにピペットで移し、225rpmのシェーカーインキュベーターで曝気しながら37°Cで12〜16時間インキュベーションします。
3. それぞれ1mLのMR-VP一晩培養液に50μLのα-ナフトール150μLと40%(w/v)KOH50μLを加えます。
4. 短時間渦巻きを起こし、室温で最大4時間置いて色の変化が起こるまで放置します。

材料

この記事で使用された材料の一覧

名前	会社	カタログ番号	コメント
MR-VP ブロス	ディフコ	216300	http://catalog.bd.com/nexus-ecat/getProductDetail?productId=216300&parentCategory=&parentCategoryName=&categoryId=&categoryName=&searchUrl=%2FsearchResults%3Fkeyword%3Dmr-vp%2Bmedium%26typeOfSearch%3DproductSearch
島	フィッシャー・サイエンティフィック	P250-500	https://www.fishersci.com/shop/products/potassium-hydroxide-pellets-certified-acs-fisher-chemical-5/p250500?searchHijack=true&searchTerm=P250500&searchType=RAPID
αナプトール	MPバイオメディカル	204189	http://www.mpbio.com/product.php?pid=05204189