方法論記事

メチシリン耐性黄色ブドウ球菌（MRSA）の皮下感染

DOI：

10.3791/2528

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2011年2月9日

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1Department of Pediatrics, Cedars-Sinai Medical Center

この記事について

サマリー

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マウスの皮膚および軟部組織感染症のモデルは、メチシリン耐性黄色ブドウ球菌（MRSA）およびホストの免疫応答の病原性の機能を評価するために利用されている。ここで、我々は、皮膚および軟部組織感染症のための皮下感染モデルを発表した。

要約

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MRSAは、公衆衛生の世界的な脅威であり、MRSAの皮膚および軟部組織感染症は現在、より多くの米国内のすべての軟部組織感染症の半分以上を占めている。間の軟部組織感染症、筋炎、化膿性筋炎、および壊死性筋膜炎は、ますますMRSAが地域社会から生じると関連して報告されている。 MRSAと、より重篤な感染症につながる宿主免疫間の相互作用を理解するために、動物モデルの可用性は、宿主と細菌の要因の調査を可能にする、非常に重要です。いくつかの感染症のモデルがSの病因を評価するために導入されている表在性皮膚感染症の間に黄色ブドウ球菌 。ここで、我々は、皮膚、皮下、および筋肉の病理を調べる皮下感染モデルを説明します。

プロトコル

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1。感染のためにMRSAを準備する（感染の2日前）

  1. 株式の培養液から血液寒天（トリプチケースソイ寒天培地（TSA））プレートへのMRSAの白金耳を接種する。
  2. 血液寒天プレート上に溶血の表現型を（それぞれのコロニーの周りをクリアゾーン）を確認してください。
  3. 他の実験との整合性溶血性表現型を持つコロニーを選択してください。
  4. 15 mLのスナップキャップチューブに、充当抗生物質、必要に応じて、3 mLのトッドヒューイットブイヨン（THB）にコロニーを接種。
  5. 220rpmで振盪しながら37℃で一晩インキュベートする。

2。感染のためにマウスを準備する（感染前日）

  1. マウスのサイズに応じて、マウスの裏面に3 × 4 cmのエリアから毛皮を剃る。
  2. 剃毛エリアに〜5 mm 3の脱毛剤クリームを（ローカルドラッグストアから購入）を適用します。
  3. 脱毛剤クリームは約1分間皮膚表面にインキュベートすることができます。
  4. のddH 2 Oのウェットペーパータオル
  5. ぬれた紙タオルで脱毛​​剤クリームをふき取ってください。

3。 （感染の日に）感染のためにMRSAの準備

  1. 50m....

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ディスカッション

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  1. マウスの皮膚および軟部組織感染症モデルでは、病原体の生体毒性評価のための強力なツールです。 S.の病原性皮膚および軟部組織感染症の黄色ブドウ球菌は、パラメータの数によって異なります。これらは、接種量、細菌の増殖期、接種の深さ、マウスの年齢、およびマウスの遺伝的背景7、8が含まれています。このモデルを用いて病原性の機能を調べるときに、それは結果に一貫性を持たせることを保証するためにこれらのパラメータをコントロールすることが重要です。我々はSKH1（ヘアレスマウス）、C57BL / 6、BALB / c、およびCD1含め数系統のマウスで皮膚のMRSA感染症を研究している。感染の結果は、マウスの遺伝子構造は、MRSA感染症1の重症度の重要な決定要因であることを他の報告と一致異なる株7に異なります。このマウス系統は、S.の研究に適していることが示されているため、この実験では、CD1マウスを利用する黄色ブドウ球菌の病原因子5は、他の株よりも安価です。
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開示事項

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利害の衝突は宣言されません。

謝辞

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この作品は、バロウズ、ウェルカムキャリア賞でとGY劉への保健助成金AI074832の国立研究所によってサポートされていました。

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材料

この記事で使用された材料の一覧
名前会社カタログ番号コメント
THBVWR international95025-314
DPBSInvitrogen21-031-CV
1 ml シリンジBD Biosciences309602
27G1/2 針BD Biosciences305109
羊血寒天培地 (TSA)VWR international90004-328

参考文献

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  1. Ahn, J. Y., Song, J. Y., Yun, Y. S., Jeong, G., Choi, I. S. Protection of Staphylococcus aureus-infected septic mice by suppression of early acute inflammation and enhanced antimicrobial activity by ginsan. FEMS Immunol Med Microbiol. 46, 187-197 (2006).
  2. Girish, V., Vijayalakshmi, A.

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タグ

MRSA

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