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方法論記事

アン in vivoで齧歯類モデル

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DOI:

10.3791/2782

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2011年5月11日

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この記事について

サマリー

アン in vivoで動物モデルが記載されている。方法は、腓骨神経の皮下の位置を利用しています。速度、筋活動のタイミング、および動きの円弧は、すべての商用ソフトウェアを使用して事前に決定し、同期されます。損傷後の変更が監視されます in vivoで MRイメージング/分光法を用いた。

要約

筋肉の菌株は、医師によって治療された最も一般的な苦情の一つです。筋肉の損傷は通常、単独で患者の病歴と身体検査から診断されている、しかし、臨床症状は、筋肉の損傷や筋肉の疾患を有する患者では傷害の程度、患者の痛みの公差等によって大幅に変動しますので、筋肉の損傷の評価は通常、このような動きの優しさ、強さ、範囲、そして最近では、画像検査などの臨床症状、に限定。このような血清クレアチンキナーゼのレベルのような生物学的マーカーが、、一般的に筋肉の傷害で上昇しているが、そのレベルは常に力の生産の損失と相関関係はありません。これは、被害の"直接測定"を提供するが、関数のすべての損失を計上していない動物は、からにも組織学的所見の真です。いくつかの収縮力で筋肉の全体的な健康の最も包括的な措置と主張してきた。筋肉の損傷は生体力学的条件の様々な環境下で発生するランダムイベントなので、勉強することは困難です。ここで、我々 は 、in vivo動物モデルでのトルクを測定することで信頼性の筋肉の損傷を生成するために説明します。我々はまた、 その場で分離された筋肉から力の測定のための我々のモデルについて説明します。さらに、我々は小動物MRIの手順を説明します。

プロトコル

(1) 生体傷害モデルと等尺性トルクの測定インチ

  1. これらの手順は、ラットやマウス7,17,18に使用することができます。開始するには、精度の気化器を(猫#91103、獣医装備、株式会社、プレザントンを使用して(誘導チャンバ内の誘導のためのイソフルラン4〜5%が、その後のメンテナンスのためノーズコーンを介してイソフルランを2%〜に)吸入麻酔下で動物の仰臥位を配置、CA)。乾燥から角膜を保護するために各眼に無菌眼科用クリーム(Paralube獣医軟膏、PharmaDerm、Flohamパーク、ニュージャージー州)を適用します。作業中は、動物がケージの外に置かれた加熱ランプの使用により保温されており、常に動物から6インチ以上を保った。
  2. 毛を除去することにより、軟組織や骨にシード皮膚の細菌を防ぐためにbetadineの交互スクラブと70%アルコールで洗浄して準備が肌。深部腱反射の欠如(足をつまんへの応答がない足の撤退)によって適切な麻酔を確認してください。針は、手動でリグ(マウス用25Gまたは27G)に手足を安定させるために近位脛骨を通して配置されます。針は足の前部コンパートメントを入力しないでください。
  3. 、固定位置に針をロックする動物が仰臥位になるようにし、つま先はまっすぐに直面している。カスタムメイドの装置は、針を固定し、それによって足を安定させるために使用されます。
  4. カスタム加工のフットプレート(図....

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ディスカッション

"筋肉の損傷は、"多くの方法で定義されており、測定されている。構造上の損傷は、組織学的所見6,9で明らかですが、動物実験で使用されているものを含む筋肉の損傷を、評価するために使用される生物学的マーカーの多くを持つ一つの問題は、彼らは通常の力の喪失と相関しないということです。筋肉の損傷は、しばしばそれを調べるために使用されるアッセイのコンテキスト内で定義されており、誰も発見は、損傷後の収縮性の変化を考慮することはできません。完全収縮機能が傷害マーカーの存在にもかかわらず持続することができるので、力の損失は、傷害3の最も有効な指標である、そしておそらく最も関連性の可能性があります。

発生率は、予測が困難なランダムな事象であり、臨床症状が大幅に変化するにつれ、それは、人間の筋肉の損傷を研究することは困難である。したがって、多くの筋肉の損傷に関するデータの多くの変数を制御し、傷害と回復のメカニズムを研究する能力を提供する動物の研究から確認されている。私たちが説明している生体傷害の装置での研.......

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開示事項

利害の衝突は宣言されません。

謝辞

著者は、メリーランド州でのトランスレーショナルイメージング(C - TRIM)と磁気共鳴研究センター(MRRC)のためのコアで博士、実験スペースや設備の彼の寛大な寄付のためのロバートBlochと博士ラオGullapalliと大十に感謝します技術サポートのため。この作品は、国立衛生研究所(K01AR053235と1R01AR059179)からと筋ジストロフィー協会(#4278)からRMLへの補助金によって支え、そしてジャイナ教の財団からJARへの助成金によっていた。

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材料

(全ての機器は、踏み板を除いてマウスとラットでも同じです)

  • BUDバリューラインキャビネット(ニューアーク、06M4718)
  • 多機能L / O USB - 6221M(ナショナルインスツルメンツ、779808〜01)
  • ステッピングモータコントローラ(ニューアーク、16M4189)
  • ステッピングモータ(ニューアーク、16M4198)
  • (ハネウェル、Sensotec、DV - 05)ゲージアンプの歪み
  • トルクセンサ(ハネウェル、QWLC - 8M)
  • フットプレートと安定化装置(カスタムが作った、特許出願中)

参考文献

  1. Aldridge, R. Muscle pain after exercise is linked with an inorganic phosphate increase as shown by 31P. NMR. Biosci. Rep. 6, 663-663 (1986).
  2. Argov, Z., Lofberg, M., Arnold, D. L. Insights into muscle diseases gained by phosphorus magnetic res....

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