この記事では、マウスやラットの基本的な剖検を実施するための手順、および基本的な器官の集合体、ならびに、組織学的微生物学的、およびPCR評価のためのより多くの困難なサンプルの種類を説明します。
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この記事について
サマリー
要約
動物のコロニーに感染性病原体の診断や発見を支援するために安楽死させた動物から収集された複数のサンプルの種類があります。さらに組織学的処理のための組織の適切な回収方法は、試験結果の品質に影響を与える可能性があります。この記事では、心臓の同定、肝臓、肺、腎臓、脾臓、ならびにそれらの臓器を収集する方法など、基本的な肉眼的検査の実施を説明します。さらに、より困難な組織/サンプル収集技術の4つが実証されています。組織が適切に適切に修正すると、徹底的な組織学的評価を可能にする組織の内部のための固定剤で膨らまする必要があるとして、肺のコレクションと血流が特に困難な場合があります。この記事では、24時間以内に組織の最適な固定を達成するために、固定液で肺を除去し、それを膨らませるステップ法による手順を示しています。組織が柔らかく、容易に破損しているように脳のコレクションは、同様に挑戦することができます。この記事では、組織への最小限のダメージで頭蓋骨から脳を公開し、削除するステップ法による手順を示しています。腸間膜リンパ節では、腸管系ウイルスは、それらが糞便中に流されているよりもリンパ節に長く持続するように多くの共通の感染性病原体を検出するための良いサンプルタイプです。この記事では、検索して無菌的に腸間膜リンパ節を除去する工程の手順により、ステップを示しています。最後に、気道の感染性病原体の同定は、細菌培養や鼻のPCR検査および/または剖検時に採取気管支流体吸引によって行うことができる。この手順では、取得して、細菌培養とPCR検査のために呼吸吸引サンプルを準備について説明します。
プロトコル
1。剖検のための準備
- 任意の総剖検（肉眼的剖検）の重要な部分は、動物の歴史と調査結果の説明です。
- あなたの組織病理スライドを読んで獣医病理学者は、動物を見ていない可能性がありますし、背景情報の入力に依存しています。
- 正確には、動物を安楽死させる前にあなたが見るものを説明します。たとえば、"雌マウス、ケージの5の一つ、C57BL/6N、ヘッドが右に傾いて"または"茶色の雄ラット、系統不明、尾の近くで、背部に斑点状の脱毛があると、動物がスクラッチされヘッド"。
- わかりやすい、明確な、客観的な言語を使用してください。レベル間のカットオフが明瞭に区分されている場合など、"軽度""中程度"、そして"厳しい"などの修飾子は役に立つかもしれません。食品や家庭のオブジェクトの観点で物事を説明することは一般には推奨されません。
- 動物、調査結果、または臓器を計量し、測定することはしばしば有用です。あなたにとって"大きな脾臓は"別の観察者には通常の脾臓かもしれません。脾臓は3センチメートルXの1.5センチメートルを測定するということは、より客観的な情報を提供します。
- Photodocumentationは非常に貴重なものです。
- 生きた動物、潜在的に感染死体、またはそのようなホルマリンなどの化学薬品を取り扱うために必要なすべての関連職業上の健康と個人用保護具を守ってください。
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ディスカッション
試験終了時のデータ収集は、動物の剖検が必要な場合があります。見られるものも説明し、すべての組織を調べることを忘れないでください。これらの手順は、感染症のサーベイランスのために剖検し、サンプルコレクションを最適化するために主に設計されていますが、ほとんどは簡単に、おそらく手続きのサブセットのみが採用されるような疑いのある病気の事件や流行の焦点を絞った調査をするようになっている。手順の多くはまた、より一般的に、その後の分析のための研究に固有のサンプルの収集と相まって、全体的な形態学的評価の一環として調査研究の終了時に実行される剖検に関連しています。
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開示事項
著者らは、これらのサービスが商業的に提供されているチャールズリバーの研究室で齧歯類の診断ラボ、すべての従業員です。
材料
| 名前 | 会社 | カタログ番号 | コメント |
|---|---|---|---|
| 試薬名 | 会社 | カタログ番号 | コメント |
| まな板 | サーモエレクトロンCorpの猫＃36114 | 猫＃36114 | |
| 小さなはさみ | ROBOZ | RS - 5910、G204 | 23ミリメートルブレード、3.5"長さ、ストレート |
| 培地はさみ | ROBOZ | RS - 6808、G207 | 5" |
| 大きなはさみ | ROBOZ | RS - 6826、G65" | 6.25" |
| 鉗子に湾曲した | ROBOZ | RS - 8254（M1/21004） | 4.5"、鋸歯状、わずかな曲線 |
| 鉗子- Microdissecting | ROBOZ | RS - 5238 | ハドソン-（エーヴァルト） |
| 鉗子 - 組織鉗子 | ROBOZ | RS - 8160 | ラットの歯 |
| 火炎滅菌 | オックスフォード実験器具製品 | Bacti - 火葬炉＃5889-001007 | |
| 外科用メス | 癌の診断、（株） | 指のメス＃60、猫＃FS0060 | |
| ピペット | VWR | パスツールピペットで5 3 / 4"、カタログ番号14672から400 | |
| オートクレーブ袋 | 適切な製造会社 | 滅菌バッグペーパーポーチ猫＃021002（3100923）E09110 | パスツールピペット用 |
| ピペットの電球 | VWR | 猫＃56310-240 | |
| エッペンドルフチューブ | ザルスタット | SafeSealマイクロチューブの液2ml、文献[＃72.695 | |
| エッペンドルフチューブ | アルゴス | 5mLのマイクロチューブのカタログ番号T20765 - C | |
| 注射器 | BD（ベックトンディッケンソン） | 1ミリリットル- 309602 3ミリリットル- 300910 5ミリリットル- 309603 10mLの猫＃309604 20mlの猫＃309661 | |
| 針 | BD | 26G - 309625 18G - 305195 | |
| 中性緩衝ホルマリン | VWR | 20L 10％NBF、カタログ番号16004から128 | |
| 生理食塩水 | ThermoScientific | バッファリングされた血液銀行の生理食塩水、カタログ番号23-309-178 | |
| トリプチケースソイブロス | ベクトンディッキンソン | TSB：乾燥、猫＃211825 | |
| リン酸緩衝生理食塩水 | シグマアルドリッチ | HAバッファ、カタログ番号P3813 - 10PAK | |
| ホルマリンカップ | VWR | 4オンスの猫＃36318から852 8オンス猫＃36318から860 16オンス猫＃36318から858 | |
| 大ホルマリンカップ | オークリッジ製品 | 32オンスのコンテナの猫＃0432〜1100 | |
| 特大ホルマリンカップ | VWR | HDPE多目的160オンスコンテナの猫＃89038から282 | |
| 縫合材料 | ヘンリーシャイン | 編みこみの絹縫合糸、参照番号100から5000、M766750 | マウスの肺膨張のため |
| より糸 | ステープルズ | 猫＃QUA - 46173 | ラットの肺膨張のため |
参考文献
- AVMA. AVMA Guidelines on Euthanasia. , (2007).
- Feldman, D. B., Seely, J. C. Necropsy Guide: Rodents and the rabbit. , CRC Press. (1988).
- King, J. M., Dodd, D. C., Roth, L. The Necropsy Book. , 4th edn, C.L. Davis Foundation. (2006).
- Kittel, B. <....
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再版と許可
