免疫磁気ネガティブセレクションによる全血からの単球の単離

この記事について

要約

このビデオでは、免疫磁気陰性分離による全ヒト血液からの単球の単離を実演しています。単離された単球は、さらなるダウンストリーム分析に使用できます。

プロトコル

人間の福祉に関する制度的、国内的、国際的なガイドラインに準拠して実施され、地元の施設審査委員会によって審査されています。

1. 免疫磁気ネガティブセレクションによるヒト初代単球の単離

40 mLの新鮮なヒト全血(HIV⁺患者または健常者から採取)を4本の10 mLエチレンジアミン四酢酸(EDTA)真空チューブ(チューブあたり10 mLの血液)に採取します。バイオセーフティキャビネットの下で滅菌技術を使用して、40 mLの血液すべてを1本の50 mLコニカルプロピレンチューブに移します。
選択したヒト単球単離キット(材料表)の製造元のプロトコルに従って、キットに含まれている2 mLの単球単離カクテルを血液チューブに加えます。キットにも付属のボルテックス磁気ビーズを30秒間、血液のチューブに2mLを加えます。
1. 利用可能な血液が40 mL未満の場合は、添加する試薬をスケールダウンします。.溶液を混合するには、プラスチック製の25 mL血清ピペットでピペットを上下に動かし、室温(RT)で5分間インキュベー
血液混合物を4本の50 mLチューブに均等に分離し、1 mM EDTAを含む30 mLの滅菌リン酸緩衝生理食塩水(PBS)を各チューブに加えます。プラスチック製の25 ....

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材料

この記事で使用された材料の一覧
名前	会社	カタログ番号
0.5M EDTAの	インビトゲン	AM9260G
BD Vacutainer プラスチック採血チューブ_K2EDTA 付き	BDバイオサイエンス	366643
イージー50イージーセップマグネット	StemCellテクノロジー	18002
Easy Sep Direct ヒト単球単離キット	StemCellテクノロジー	19669
PBSの	ギブコ	20012027
RPMI 1640 と L-グルタミン	コーニング	10040CVMPの

年

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