免疫系とその構成要素

このビデオでは、免疫磁気陰性分離による全ヒト血液からの単球の単離を実演しています。単離された単球は、さらなるダウンストリーム分析に使用できます。...

このビデオでは、マウスの肝臓からKupffer細胞または肝臓マクロファージを分離する方法を示します。肝臓に消化溶液を灌流し、続いて密度勾配分離を行います。単離された接着性Kupffer細胞は、さらなる分析に使用できます。...

このビデオは、機械的な解離技術を使用してマウスの後根神経節(DRG)からマクロファージを分離する酵素フリーのプロトコルを示しています。採取したばかりのDRG組織を均質化した後、マクロファージ上の細胞表面受容体に対する抗体を使用して細胞を蛍光標識し、続いてフローサイトメトリーを実施してサンプル中のマクロファージの存在を確認します。...

このビデオでは、採取したマウスのパイエルパッチからリンパ球が分離される様子を実演します。単離されたリンパ球は、さらなる分析に使用できます。...

このビデオでは、密度勾配遠心分離により、ヒトバフィーコートから単球とリンパ球を含む末梢血単核細胞(PBMC)を単離する方法を示します。単離されたPBMCは、さらなる分析に使用できます。...

このビデオでは、非B細胞に特異的なビオチン化抗体とストレプトアビジン結合磁気マイクロビーズを使用して、ヒト末梢血からB細胞を単離する様子を実演しています。...

このビデオでは、マウスの長骨から骨髄間質細胞の分離と培養を実演します。分離された付着性BMSCは、さらなる分析に使用できます。...

このビデオは、官能基浮力活性化セルソーティング(BACS)技術を使用して、末梢血単核細胞(PBMC)からのT細胞の単離を示しています。単離技術では、ビオチン化抗CD3抗体で細胞を標識し、ストレプトアビジン結合マイクロバブルを用いて抗体結合細胞を分離することにより、CD3+...

このビデオでは、ヒトの初代T細胞活性化のためのプロトコルについて説明します。ナイーブT細胞を抗CD3抗体および抗CD28抗体でコーティングした磁気ビーズでインキュベートし、続いてインターロイキン-2またはインターロイキン-15処理を行うと、ナイーブT細胞が活性化され、エフェクターT細胞またはメモリーT細胞に分化および増殖します。...

このビデオでは、強制灌流によるマウス肝臓からの辺縁性肝白血球の単離を示しています。...

このビデオは、選択的増殖のためのヒト肝臓組織からのナチュラルキラー細胞またはNK細胞を含むリンパ球の単離を示しています。酵素的および機械的消化とそれに続く密度勾配分離により、NK細胞を含むリンパ球の単離が促進されます。収集されたリンパ球は、NK細胞の選択的増殖にさらに使用できます。...

このビデオでは、フィーダー細胞株を使用して末梢血単核細胞(PBMC)から直接ナチュラルキラー(NK)細胞を増殖させる技術を示しています。PBMCは、膜結合インターロイキン-21(mIL-21)を発現する遺伝子改変リンパ芽球フィーダー細胞と共培養され、培養物にはサイトカインインターロイキン-2(IL-2)およびインターロイキン-15(IL-15)が補充されます。このリガンドのカクテルが一緒になって、高純度のNK細胞の長期増殖につながります。...

このビデオは、精巣の構成要素であるマウス精細管からのセルトリ細胞の分離手順を示しています。酵素による消化と洗浄の繰り返しにより、セルトリ細胞の溶液中への放出が促進され、セルトリ細胞をさらに培養して増殖と増殖させることができます。...

このビデオは、ヒト末梢血単核細胞(PBMC)からのCD4+Vδ1+γδT細胞の低濃度集団の磁気標識ベースの単離のためのプロトコルを示しています。FITC標識抗Vδ1抗体、磁気抗FITCマイクロビーズ、および抗CD4抗体被覆超常磁性ビーズの組み合わせを使用して、CD4+Vδ1+...

このビデオでは、不連続なショ糖勾配遠心分離により、担がんマウスの血液から細胞傷害性の高密度好中球と低密度好中球を分離する方法を示します。...

このビデオは、マウスモデルからの歯肉免疫細胞ネットワークの分離手順を示しています。酵素による消化により、付着した歯や骨から歯肉組織が放出され、さらに機械的に消化されて、歯肉から免疫細胞が放出されます。単離された細胞は、免疫学的実験の準備ができています。...

このビデオは、成体マウスの腹腔から成熟結合組織型肥満細胞を単離するための腹膜洗浄法を示しています。初代免疫細胞の混合物を腹腔から単離すると、適切な培養条件下で肥満細胞の選択的増殖が行われます。...

このビデオでは、磁気活性化細胞ソーティングを使用してマウスの子犬の脳からミクログリアを含むCD11b細胞を単離するためのプロトコルについて説明します。脳組織をホモジナイズして単一細胞懸濁液を得ると、抗CD11b抗体でコーティングされたマイクロビーズとインキュベートした後、磁気カラムベースの分離によりCD11b+細胞集団を精製します。...

このビデオは、マウスモデルからの鼠径部ドレナージリンパ節の外科的分離手順を示しています。腹部を切開すると、鼠径リンパ節へのアクセスが可能になり、これは外科的に採取されます。採取した半透明の鼠径リンパ節は、免疫学的研究に使用できます。...

このビデオは、マウスの後肢から膝窩ドレナージリンパ節を採取する解剖技術を示しています。リンパ節は、自然免疫と適応免疫の橋渡しに重要な役割を果たしており、組織構造と細胞生存率が維持された無傷のリンパ節を採取することで、局所免疫応答と全身免疫応答の研究に役立ちます。...

このビデオは、初代単球のマクロファージへのプライミングを示しています。初代ヒト単球は、顆粒球マクロファージコロニー刺激因子(GM-CSF)を使用してM1様炎症誘発性表現型に、またはマクロファージコロニー刺激因子(M-CSF)を使用してM2様抗炎症表現型に単離および分化することができます。...

このビデオでは、ヒト人工多能性幹細胞(iPSC)からマクロファージを生成するためのin...

このビデオでは、末梢血由来の単球をM1またはM2マクロファージに分化および分極させる手順を示します。顆粒球-マクロファージコロニー刺激因子、リポ多糖、およびインターフェロン-γとのインキュベーションは炎症誘発性M1マクロファージを産生し、マクロファージコロニー刺激因子およびインターロイキン-4とのインキュベーションは抗炎症性M2マクロファージ産生を誘導します。...

このビデオは、一般的なリンパ系前駆細胞(CLP)から形質細胞様樹状細胞(pDC)を生成するin...

このビデオは、ヒト単球からの未熟、成熟、および寛容性の樹状細胞(DC)の生成を示しています。単球を成長因子やサイトカインとインキュベートすると、未成熟なDCが産生されます。免疫調節分子に応答して、未成熟DCは寛容性DCと成熟DCに分化します。...

このビデオは、骨髄間質細胞(BMSC)の脂肪細胞への分化を示しています。2段階のプロセスでは、特定の成長因子とホルモンの存在下で、未分化のBMSCは最初に前脂肪細胞に分化します。グルコースとインスリンによる治療を含む第2のステップは、複数の脂肪滴を伴う成熟脂肪細胞の形成につながります。...

このビデオでは、巨核球の分化と血小板の形成の技術を示しています。造血幹細胞(ヒト臍帯血から単離)は、トロンボポエチンの存在下で成熟した巨核球に分化します。成熟した巨核球は、プロプレートレットと呼ばれる細胞質の伸長を産生し、個々の血小板を生じさせます。...

このビデオでは、iPS細胞由来の未熟T細胞から、三次元胸腺培養システムを用いて機能的な抗原特異的T細胞を作製するプロトコールを実演しています。iPS細胞由来の未成熟T細胞を内因性リンパ球枯渇マウスの胎児胸腺葉と共培養した結果、T細胞の成熟に成功し、CD8αβ+ MHCクラスI+...

このビデオでは、マウスの全血から血小板を精製し、その後の血小板アゴニストトロンビンによる活性化のプロトコルについて説明します。フローサイトメトリーで解析すると、精製された休止血小板は、その細胞表面マーカーCD41の発現に基づいて特徴付けられるのに対し、精製された活性化血小板は、表面マーカーCD41とCD62Pの両方を共発現します。...

このビデオは、好中球の細胞外トラップ(NET)を生成および単離するin...

このビデオは、顆粒球-マクロファージ-コロニー刺激因子またはGM-CSF産生Tヘルパー細胞(THGM)のin...

このビデオでは、肥満細胞の脱顆粒活性を測定するための比色分析を実演しています。肥満細胞によって放出された酵素は、基質を加水分解し、着色された製品を生成します。肥満細胞の脱顆粒活性は、細胞外への酵素の放出率を細胞内の総酵素含有量で正規化して測定しました。...

このビデオでは、ヒト末梢血B細胞からのナイーブB細胞、メモリーB細胞、および形質芽細胞形質細胞亜集団のフローサイトメトリーベースの選別のためのプロトコルについて説明します。B細胞表面に発現するCD19、CD27、およびCD38受容体に結合するフルオロフォアベースの抗体と、それに続く細胞ソーティングに基づいて、異なるB細胞亜集団を区別することができます。...

このビデオでは、ELISpotアッセイを使用して抗体分泌B細胞(ASC)の機能を評価する方法を示しています。ASCから分泌された抗体は、膜結合ポリクローナル抗体フラグメントと相互作用し、酵素標識IgGまたはIgM抗体によって検出されます。各ウェルに生成された色付きのスポットは、B細胞の分泌活性と相関する特定の抗体のアイソタイプの存在を示しています。...

このビデオでは、マウスの膵臓ドレナージリンパ節(PDLN)から単一細胞を単離するためのプロトコルと、フローサイトメトリーを使用して単一細胞集団からの制御性T細胞(Treg)の特性評価について説明します。Tregは、細胞表面マーカーCD4、CD25、Nrp1、および核転写因子Foxp3およびHeliosの陽性発現に基づいて同定されます。...

出典:Bello-Gamboa, A. et al., Imaging the Human Immunological Synapse.J. Vis. Exp.(2019年)
このビデオは、抗原提示細胞とヘルパーTリンパ球との間の免疫学的シナプス形成のin...

このビデオでは、末梢血単核細胞培養から増殖したサイトカイン誘導キラーT細胞(CIK細胞)の割合を決定するフローサイトメトリーベースの手法を実演しています。...

このビデオは、マウスの脾臓におけるin...

このビデオでは、マウス肺組織におけるマクロファージ細胞外トラップ(MET)の免疫染色および共焦点顕微鏡法に基づく可視化のためのプロトコールについて説明します。組織に常在するマクロファージは、マクロファージ特異的なF4/80表面糖タンパク質マーカーの発現によって特徴付けられ、METは、METマーカーであるマトリックスメタロプロテイナーゼ9、シトルリン化ヒストンH3、および細胞外クロマチンを標識することによって可視化されます。...

このビデオは、マウスモデルで実験的自己免疫性脳脊髄炎(EAE)を誘発するための抗原アジュバントエマルジョンを生成する効率的な均質化技術を示しています。このエマルジョンは、水相に自己抗原であるミエリンオリゴデンドロサイト糖タンパク質(MOG)を含み、不活化病原菌を含む連続的な油相に囲まれています。エマルジョンは、抗原の持続的な放出を確保し、免疫応答を持続させます。...

このビデオは、共焦点顕微鏡を用いたトランスジェニックマウスのγδ上皮内リンパ球(IEL)の可視化を示しています。外科的処置では、穿孔線を作成し、腸粘膜と絨毛を露出させるために縦方向に切開します。トランスジェニックマウスは、レポータータンパク質をγδ...

このビデオは、アクチノマイシン-Dによる処理後のTリンパ球由来の微粒子(LMP)の生成とTリンパ球からの単離を示しています。...

このビデオでは、抗原性ペプチドをロードしたMHC-Igsと抗CD28抗体で機能化された磁性ナノ粒子ベースの人工抗原提示細胞(aAPC)を使用して、希少抗原特異的CD8+ T細胞を単離するためのプロトコルについて説明しています。抗原性ペプチド標的T細胞受容体を特異的に発現するCD8+ T細胞とaAPCsとの相互作用、およびその後のin vitroでの増殖により、このCD8+...

このビデオは、スパイラルチャネルを備えたマイクロ流体デバイスを使用して、気管分泌物から好中球を分離する方法を示しています。このデバイスは、さまざまな厚さと台形のチャネルを利用することにより、細胞サイズに基づく効率的な分離を実現します。力の相互作用により、大きな好中球が内壁付近に蓄積し、赤血球とムチン凝集体が外壁付近に留まり、効果的な好中球の分離が確保されます。...

このビデオでは、放射性同位体標識モノクローナル抗体を用いたTヘルパー細胞の細胞内放射性標識を非侵襲的陽電子放出断層撮影イメージングに実演します。...