マラリア-HIV同時感染のin vitro細胞培養モデルの生成

要約

出典:Finney, C. et al., HIV重複感染の文脈でマラリアに対する免疫応答を測定するためのIn Vitroモデル。J. Vis. Exp.(2015年)

このビデオは、in vitroでのマラリア-HIV同時感染細胞培養モデルの生成を示しています。熱帯熱マラリア原虫に寄生した赤血球と共培養したHIV感染末梢血単核細胞は、互いの成長をサポートし、HIVとマラリアの同時感染における免疫応答と疾患の進行に関する洞察を提供する可能性があります。

プロトコル

サンプル採取を含むすべての手順は、研究所のIRBガイドラインに従って実行されています。

>注意:人間の血液サンプルと人間のマラリア原虫を扱うには、予防措置が必要です。常に白衣と手袋を着用し、レベル2のバイオセーフティキャビネットで作業してください。誤ってヒトマラリアに経皮的にさらされた場合は、予防的治療のためにHealth and Safetyに報告してください。.また、ヒト免疫不全ウイルスHIV(+)血液を扱うための安全性についても、安全性に関する追加の考慮事項を設ける必要があります。バッククロージングの白衣を着用してください。ダブルグローブ(トップグローブはラテックス製)。すべての取り扱いは、レベル2のバイオセーフティキャビネットで行ってください。ガラスや鋭利なものは使用しないでください。吸引器は使用しないでください。すべての汚染されたアイテムをウイルス溶液または漂白剤に入れてから、廃棄する前に最低1時間保管してください。使用後1時間、すべての表面をウイルスと紫外線(UV)で洗います。各機関には、従う必要のある独自のバイオセーフティ規制があることに注意してください。HIV感染血液へのすべての偶発的な曝露をHealth and Safetyに報告し、曝露後の予防の可能性を評価および検討してください。

>注:熱帯熱マラリア原虫にはさまざまな....

結果

図 1. PBMCの位置を示すスピン後のFicoll勾配の描写。

....

材料

この記事で使用された材料の一覧

名前	会社	カタログ番号	コメント
アラニン	シグマ	A7377 (英語
BDバキュテナーACDソリューションA	BDの	364506
BDバキュテナーヘパリンナトリウム	BDの	17-1440-02
DPBS(カルシウム、マグネシウムなし)	コーニング	21-031-履歴書
ウシ胎児血清	シグマ	F1051	使用前の熱不活性化
フィコール・パケ・プラス	GEヘルスケア	17-1440-02
ゲンタマイシン(10mg/ml)	ギブコ	15710-064
Hema3染色セット	漁夫	〒122-911
ヘープス	漁夫	BP310-500
ヒポキサンチン	シグマ	H9636-J
イオノマイシン	シグマ	I3909
MEM非必須アミノ酸(10mM)	ギブコ	11140
PMAの	シグマ	P8139
RPMI-1640パウダー	ライフテクノロジー	〒31800-022
RPMI-1640 と L-グルタミンと HEPES	サーモサイエンティフィック	01 SH30255月
重曹(粉末、細胞培養)	シグマ	S5761
ピルビン酸ナトリウム(100mM)	ギブコ	11360
トリス(トリズマベース)	シグマ	T6066
トリゾール	アンビオン	15596018
トリパンブルー(0.4%)	ギブコ	15250-061
寄生虫ガス混合物	特別注文で		3%CO2、1%O2、バランスN2

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