放射性標識抗体を用いたマウスモデルにおける腫瘍検出のためのin vivo PETイメージング技術

要約

出典:Zeglis, B. M., et al. ⁸⁹Zr-DFO標識抗体のバイオコンジュゲーションと放射性合成。 J. Vis. Exp.(2015年)。

このビデオは、マウスモデルにおける腫瘍のin vivoイメージングのためのラジオ免疫複合体を含む技術を示しています。放射性免疫複合体を注入すると、複合体の抗体はがん細胞上の特定の膜抗原に結合します。抱合体の放射性トレーサーは、隣接する電子と相互作用してエネルギーを生成する陽電子を放出し、陽電子放出断層撮影(PET)スキャナーによって検出されて腫瘍の画像が作成されます。

プロトコル

動物モデルを含むすべての手順は、地元の施設動物管理委員会とJoVE獣医審査委員会によって審査されています。

1. ⁸⁹Zr-DFO-J591によるIn vivo PETイメージング

>注意:プロトコルのこのステップには、放射能の取り扱いと操作が含まれます。これらの手順を実行する前に、研究者は所属機関の放射線安全部門に相談する必要があります。電離放射線への曝露を最小限に抑えるために、考えられるすべての措置を講じる必要があります。

1. 雄の胸腺ヌードマウスでは、前立腺のリンパ節癌(LNCaP)癌細胞の5 x 10⁶リンパ節癌細胞を皮下に移植し、これらを100〜150 mm³異種移植片に成長させます(接種後3〜4週間)。
2. ⁸⁹Zr-DFO-J591ラジオ免疫複合体を0.9%滅菌生理食塩水中で1.0 mCi/mlの濃度に希釈します。
3. ⁸⁹Zr-DFO-J591 (DFO = デスフェリオキサミン、J591 = 前立腺特異的膜抗原 [PSMA] 標的抗体) 溶液 200 μl (200 μCi; 7.4 MBq) を異種移植片マウスの外側尾静脈に注入します。
4. 所望のイメージング時点(例えば、注射後12、24、48、72、96、または120時間)で、2%イソフルラン:酸素ガス混合物でマウスを麻酔します。
5. マウスを小動物用PETスキャナーのベッドに置き、スキャン中は1%イソフルラン:酸素ガス混合物を使用して麻酔を維持します。スキャナーベッドに動物を置く前に、つま先つまみ法で麻酔を確認し、マウスの目に眼軟膏を塗布して、麻酔中の乾燥を防ぎます。
6. 350-700 keVのエネルギーウィンドウと6 nsecの一致タイミングウィンドウを使用して、最小4,000万の一致イベントを含む静的スキャンを介してマウスのPETデータを取得します。
7. 画像の取得が完了したら、マウスを放置したり、意識を取り戻すまで他のマウスと一緒にケージに入れたりしないでください。

材料

この記事で使用された材料の一覧

名前	会社	カタログ番号	コメント
p-SCN-BN-DFO	マクロサイクリック	B-705	-80°Cで保存
[89Zr]シュウ酸Zr-シュウ酸塩	パーキン・エルマーを含む様々な	-	注意:放射性物質