抗体ベースの技術

動画では、遺伝子発現から分泌まで、哺乳類の宿主細胞で抗体が産生される過程を説明しています。これには、転写、翻訳、シグナル認識、正しいフォールディング、そして最終的には分泌小胞を介した細胞外培地への放出が含まれます。...

このビデオは、重鎖遺伝子と軽鎖遺伝子を持つプラスミドベクターを導入することにより、哺乳類細胞から抗体を生成する方法を示しています。これらのベクターはポリエチレンイミンと相互作用し、ポリプレックスを形成することによって細胞に入ります。その後、それらは個々のタンパク質に翻訳され、完全な抗体に組み立てられ、細胞外培地に分泌されます。...

このビデオでは、従来のハイブリドーマ技術を用いて、膜結合メタロペプチダーゼであるブタアミノペプチダーゼN(APN)に対するモノクローナル抗体を産生するアッセイを実演しています。マウスにAPNを免疫すると、脾臓細胞が採取され、不死性骨髄腫細胞と融合してハイブリドーマが作製されます。次に、ハイブリドーマをHAT(ヒポキサンチン-アミノプテリン-チミジン)培地を使用して選択および増殖させ、さまざまなAPNエピトープに特異的なモノクローナル抗体を産生します。...

このビデオは、メタロペプチダーゼに対する組換え抗体の産生手順を示しています。抗体、緑色蛍光タンパク質、および抗生物質耐性の遺伝子を保有する組換えプラスミドを、リポフェクタミンで上皮細胞にトランスフェクションします。トランスフェクションした細胞を選別し、培養して組換え抗体を作製します。...

抗原特異的なB細胞からモノクローナル抗体を作製する技術を実演しています。単離された抗原特異的B細胞からクローニングされた抗体の重鎖と軽鎖をコードする真核生物の発現ベクターを、ポリプレックスを用いて哺乳動物細胞に導入します。細胞内に入ると、これらのベクターは翻訳を受け、得られた重鎖ペプチドと軽鎖ペプチドが抗体に集合し、その後、細胞から分泌されます。...

このビデオは、チャイニーズハムスター卵巣細胞から採取した細胞培養液からモノクローナル抗体を精製するアッセイを示しています。これは、サンプル中の抗体のFc領域に結合する固定化されたプロテインAを含む多孔質ガラス樹脂を使用しており、それらを汚染物質から効果的に分離します。低pH溶出バッファーを使用すると、相互作用が弱まり、精製された抗体の回収が容易になります。...

動画では、安定的にトランスフェクションした哺乳類細胞を用いて抗体医薬を作製する方法を実演しています。トリプトンの補給は細胞分裂を刺激し、その結果、過剰増殖を引き起こし、より高い抗体収量をサポートします。抗体含有培地は、回収され、ろ過され、さらなる使用のために保存されます。...

このビデオでは、抗体産生細胞培養から得られた培養上清からモノクローナル抗体を精製する技術を示しています。このプロセスでは、アガロースビーズと結合したプロテインAを架橋したマトリックスを使用し、上清中の抗体をビーズに固定化することで、汚染物質から効果的に分離することができます。低pHの溶出バッファーを適用することで、タンパク質A-抗体の相互作用が緩和され、抗体含有画分の収集が容易になります。...

このビデオでは、T細胞エフェクター機能の抗体を介した活性化を測定するアッセイを実演しています。HAを発現するトランスフェクションされた哺乳動物細胞にインフルエンザウイルスのヘマグルチニン(HA)特異的モノクローナル抗体を添加すると、HAとの免疫複合体が形成されます。Fc受容体を発現する遺伝子操作T細胞とルシフェラーゼレポーターを導入すると、T細胞は抗体-HA複合体によって活性化され、この活性化はルシフェラーゼ基質を添加して産生された生物発光を測定することによって検出されます。...

このビデオは、トランスフェクションされていない細胞とアクアポリン-4を発現するトランスフェクションされた細胞を含むバイオチップを使用して、抗アクアポリン-4免疫グロブリンGを検出するための細胞ベースのアッセイを示しています。この方法は、視神経脊髄炎スペクトラム障害の診断に応用でき、バイオチップ上の強い緑色蛍光によって確認されます。...

このビデオは、中和型インフルエンザウイルスモノクローナル抗体のエスケープバリアントを生成する手法を示しています。抗体中和ウイルス懸濁液を胚のニワトリ卵に注入し、エスケープバリアントを選択的に増殖させます。これにより、ウイルス集団は主にエスケープ変異体となり、ヘマグルチン化アッセイによって確認されました。...

このビデオは、ヒトナチュラルキラー細胞の治療用抗体によって開始されるFcγRIIIa駆動型イベントを示しています。この人工刺激プラットフォームは、細胞骨格の再構成、脱顆粒、ケモカイン/サイトカイン産生、および結合に関与する抗体のFcγRIIIaおよびFc部分によって媒介されるシグナル伝達経路を含む、下流のエフェクター機能の探索を容易にします。...

このビデオでは、pH感受性蛍光標識タウ凝集体を用いてマウスミクログリアによるタウの取り込みを定量化する細胞ベースのアッセイを紹介しています。これを蛍光活性化セルソーティングで分析し、定量的評価を行っています。...

このビデオは、ラット海馬ニューロン培養を使用してサンプル中の特定の抗原に対する抗体を同定する技術を示しています。N-メチル-D-アスパラギン酸受容体(NMDAR)を標的とする自己抗体を含む患者サンプルに培養ニューロンを曝露することにより、神経細胞表面に結合した自己抗体の存在が免疫染色によって明らかになります。...

このビデオは、呼吸器合胞体ウイルス(RSV)に対する中和抗体を測定するためのアッセイを示しています。RSV中和抗体を含む血清とプレインキュベートすると、ウイルス粒子が中和され、細胞感染とプラーク形成が減少します。次に、ウイルスに感染した細胞を固定、ブロッキング、およびフルオロフォア標識抗体標識してプラークを可視化します。このプロセスにより、RSV の 50% を中和する最も高い血清希釈液 (中和力価を表す)...

このビデオでは、ヒト血清中の膵島自己抗体の電気化学発光検出を紹介しています。血清中の抗体は、ルテニウム結合抗原とビオチン化捕捉抗原を架橋し、電気化学発光測定によって検出される複合体を形成します。...

このビデオは、グルタルアルデヒドと架橋されたアミン官能化セルロースディスクを含む紙ベースのイムノアッセイを示しています。IgG-Fc特異的捕捉抗体の共有結合固定化に続いて免疫グロブリンGおよび西洋ワサビペルオキシダーゼ標識検出抗体を導入すると、免疫グロブリンGの存在を確認する色の変化が生じます。...

このビデオは、真菌バイオフィルムに対する抗体の影響を研究するためのin...

このビデオは、血清サンプル中のインフルエンザノイラミニダーゼ(NA)阻害抗体価を測定するアッセイを示しています。NAに対する抗体を含む血清サンプルをフェチュイン被覆マイクロウェルプレートに加えます。ウイルスを添加すると、抗体はウイルスNAがフェチュインを切断してガラクトース部分を露出するのを防ぎます。次に、ペルオキシダーゼ結合レクチンを添加し、露出したガラクトースに結合します。NA阻害抗体価は、ペルオキシダーゼ基質が固定化されたレクチン結合ペルオキシダーゼによって切断されて発色する比色試験を用いて決定されます。...

このビデオは、臓器レシピエントの抗ドナーHLA同種抗体を検出するアッセイを示しています。ペプチドアレイは、抗体を介した臓器拒絶反応の潜在的なエピトープを表すために合成されます。アレイは、標的エピトープに結合する同種抗体を含むレシピエントの血清とインキュベートされます。抗体結合は、化学発光を使用して検出され、同種抗体の反応性を誘導するドナー特異的なHLAエピトープを同定します。...

このビデオでは、マウス血清中の循環抗糖鎖抗体を解析するためのプリンテッド糖鎖アレイ技術を実演しています。血清中の抗体はチップ上の特定の糖鎖と相互作用し、免疫染色とそれに続く蛍光スキャンによって確認されます。...

このビデオでは、ペプチドマイクロアレイ技術を適用して、ヒストンペプチド上の翻訳後修飾(PTM)を認識する抗体の特異性をプロファイリングする技術を示しています。既知のPTMの組み合わせを持つ固定化された蛍光色素標識ヒストンペプチドを含むマイクロアレイスライドを、標的PTM特異的抗体で処理します。このプロセスは、標的に対する抗体の特異性と、非標的PTMとの潜在的な交差反応性を特定するのに役立ちます。...

このビデオは、アラビノガラクタンタンパク質(AGP)とペクチンを植物組織に局在させる免疫染色技術を示しています。固定および樹脂に包埋された植物組織切片を、AGP特異的およびペクチン特異的な一次抗体および蛍光二次抗体、およびセルロース結合性蛍光色素で染色し、細胞壁におけるそれらの組織特異的な共局在を明らかにします。...

このビデオでは、ワクチン中の免疫原性糖タンパク質レベルを評価するために設計された間接的な酵素結合免疫吸着アッセイまたはELISAサンドイッチ免疫捕捉アッセイを紹介しています。糖タンパク質特異的抗体を含むアッセイプレートを、参照ワクチンや試験ワクチンなどの段階希釈ワクチンサンプルとインキュベートし、続いてイムノアッセイを行い、試験ワクチン中の糖タンパク質含有量を定量します。...

このビデオは、マイクロ流体カートリッジベースの化学発光システムを使用して血清特異的免疫グロブリンEを検出するためのプロトコルを示しています。血清IgEは、カートリッジの反応ゾーンに固定化された異なるアレルゲンと相互作用し、その後、ペルオキシダーゼ標識抗IgE抗体と化学発光基質で検出されるため、複数のアレルゲン特異的IgEを同時に検出できます。...

このビデオは、免疫組織化学を用いて脳切片の誤って折り畳まれたプリオンタンパク質を検出する技術を示しています。脳切片をギ酸で処理してプリオンを変性させ、感染リスクを最小限にとどめるとともに、熱誘起エピトープ賦活化を用いてプリオン凝集体のマスキングを解除した後、ミスフォールディングされたプリオンタンパク質凝集体を免疫標識し、顕微鏡で観察します。...

このビデオでは、共焦点顕微鏡を用いてウイルス由来のペプチド修飾抗体複合体の細胞内分布を評価するプロセスを示しています。ウイルス由来の核局在化配列は、免疫染色および蛍光測定を通じて確認された細胞質内の抗体複合体を誘導します。...

このビデオは、初代海馬ニューロン培養におけるグルタミン酸受容体の輸送を研究するための抗体栄養アプローチを示しています。このアプローチにより、血漿膜と内膜の両方で受容体集団を観察できます。これらのサブセット間の識別は、膜透過化の前後で、同じ一次抗体と異なる蛍光色素に結合した二次抗体を使用して受容体を標識することによって達成されます。...

このビデオは、母乳食細胞による抗体依存性細胞食作用(ADCP)を測定するアッセイを示しています。抗原-抗体複合体に結合した蛍光標識マイクロスフェアを母乳から単離した細胞懸濁液と組み合わせ、食作用性白血球による抗体依存性細胞食作用を誘導します。一般的な白血球抗原(CD45)に対する抗体で細胞を標識すると、フローサイトメトリーを使用して、マイクロスフェア陽性の生存貪食性白血球の蛍光強度を測定し、ADCP活性のレベルを示します。...

このビデオでは、ヒト腸内細菌に結合するヒトノロウイルス様粒子(VLP)を定量するためのアッセイを実演しています。細菌懸濁液をVLPと混合し、インキュベートしてVLP-細菌複合体の形成を可能にします。次に、複合体を蛍光色素でタグ付けされたVLP特異的抗体で標識し、続いてフローサイトメトリーに基づく可視化と定量を行い、VLP結合細菌の割合を特定します。...

このビデオは、ヒトの血小板から筋萎縮性側索硬化症(ALS)に関連するタンパク質バイオマーカーを検出するための毛細血管電気泳動イムノアッセイプロトコルを示しています。ALSバイオマーカータンパク質の存在の確認は、血小板タンパク質のサイズベースの分離とそれに続く化学発光検出によって達成されます。...

このビデオは、免疫済みマウスの新規ナノエマルジョンアジュバントワクチンに対する抗体免疫応答を評価する方法を示しています。免疫化は、IgG抗体価を決定することによって確認されたように、抗体応答を増強します。...

このビデオは、細菌細胞内の蛍光抗生物質プローブの蓄積を測定するアッセイを示しています。排出ポンプ阻害剤への曝露は、細菌細胞の膜貫通プロトン勾配を乱し、その上に蛍光色素結合抗生物質が添加されます。プロトン勾配の乱れによる排出ポンプの阻害は、細菌内部に抗生物質の蓄積を引き起こします。細菌細胞を溶解し、蛍光強度を測定して抗生物質の蓄積を確認します。...

このビデオは、マウス腫瘍異種移植モデルにおけるin...

このビデオは、マウスの脳への抗体送達のための対流増強送達(CED)技術を示しています。麻酔をかけたマウスの頭蓋骨を露出させ、抗体送達のための標的領域にバリ穴をあけます。抗体を含むステップカテーテルを標的部位に挿入し、輸液ポンプを介して圧力勾配を作成し、制御された速度で抗体を送達します。...

このビデオは、マウスモデルでの超音波支援抗体送達の手順を示しています。軌道後から注入されたマイクロバブルは、超音波下で振動し、血液脳関門に一時的な混乱を引き起こし、標識された抗体が脳に入ることを可能にします。...

このビデオは、マウスモデルにおける腫瘍のin...

このビデオは、自由浮遊マウス空腸切片の腸房細胞を可視化するための免疫蛍光法を示しています。腸絨毛内では、管腔先端に緑色の蛍光が広がり、赤い細根の塊が広がっていることは、房状細胞の存在を示しています。...

このビデオは、マウスモデルで腫瘍への二重特異性抗体誘導性T細胞輸送を追跡する方法を示しています。ルシフェラーゼ形質導入エフェクターT細胞を、皮下腫瘍細胞異種移植片を有するマウスに注入する。次に、二重特異性抗体が導入され、T細胞と腫瘍細胞に結合します。T細胞の局在は、生物発光イメージングを使用して追跡され、シグナルの大きさは腫瘍へのT細胞浸潤の程度を示します。...

このビデオでは、同じ種で産生された2つの異なる一次抗体を用いた二重標識免疫染色を紹介しています。これは、寄生虫および宿主タンパク質に特異的に結合します。さらに、これらの一次抗体を標的とする標識二次抗体は、宿主タンパク質と寄生虫タンパク質の明確な可視化を可能にし、宿主と病原体の相互作用の研究を容易にします。...

このビデオは、成体海馬の神経新生を調べるために使用される免疫蛍光染色法を示しています。最初に、マウスの脳切片は、ニューロン前駆細胞のニューロン新生に関連するマーカータンパク質に向けられた一次抗体による治療を受けます。次に、蛍光色素でタグ付けされた二次抗体で標識します。次に、脳切片を共焦点顕微鏡で観察し、マーカータンパク質の異なる組み合わせの発現パターンに基づいて、前駆細胞のさまざまなサブタイプを区別します。...

このビデオでは、量子ドットを使用してマウスの心臓組織切片におけるsigma-1受容体の免疫標識の技術を示しています。心臓組織を固定し、浸透させ、染色し、脱水し、樹脂に包埋した後、切片化します。次に、切片を抗体で処理し、量子ドットで標識して、電子顕微鏡を使用してSigma-1受容体の細胞内局在を区別します。...

このビデオでは、CUBIC(Clear, Unobstructed Brain/Body Imaging Cocktails and Computational...

このビデオは、皮膚生検切片上の神経変性疾患特異的α-シヌクレイン凝集体を検出する免疫蛍光アッセイを示しています。フリーフローティング免疫染色は、真皮ニューロンのカルボキシル末端加水分解酵素とα-シヌクレイン凝集体を蛍光標識するために使用されます。共焦点顕微鏡下では、両方の抗体から蛍光を発する細胞は、真皮ニューロンにα-シヌクレイン凝集体が存在することを示しています。...

このビデオは、蛍光媒介断層撮影法(FMT)を使用して、大腸炎のマウスモデルにおける腸内マクロファージ浸潤を評価する技術を示しています。デキストラン硫酸ナトリウム(DSS)を介してマウスに大腸炎を誘発すると、結腸に浸潤したマクロファージ上のF4/80糖タンパク質マーカーを認識する抗体が動物に注射されます。次に、マウスをFMTデバイスで画像化し、蛍光信号と反射率信号を3次元画像に再構成して、蛍光の空間分布と強度を決定します。...

このビデオは、ゼブラフィッシュの放射状グリア前駆細胞におけるNotch/DeltaDシグナル伝達を画像化するための抗体取り込みアッセイを示しています。これには、アガロース包埋デコレーションゼブラフィッシュ胚のマウント、RGP上のDeltaDリガンドを標的とする色素溶液の注入、および蛍光顕微鏡下でのイメージングによる非対称細胞分裂のNotch/DeltaDシグナル伝達活性化の確認が含まれます。...

このビデオは、蛍光標識捕捉抗体-磁性ナノ粒子コンジュゲートを使用した細胞外小胞の免疫捕捉を示しています。このプロセスには、複雑な形成、蛍光標識検出抗体による染色、磁気分離、抗原特性評価のためのフローサイトメトリー分析が含まれます。...

このビデオでは、サンプル中の複数のサイトカインターゲットを定量するためのマルチプレックスビーズベースのイムノアッセイを実演しています。サイトカイン特異的抗体に結合した異なるマイクロスフェアの混合物を使用して、サンプル中に存在するサイトカインに結合します。ストレプトアビジンタグ付きレポーターは、ビオチン化検出抗体を使用して結合サイトカインに固定化されます。フローサイトメトリーは、マイクロスフェアのユニークなサイズと内部蛍光強度に基づいて結合したサイトカインを同定し、レポーターの蛍光強度はサイトカインの数を示します。...

このビデオは、免疫グロブリンG(IgG)でコーティングされた腫瘍細胞を使用して樹状細胞の活性化を評価するためのプロトコルを示しています。樹状細胞は、IgG被覆腫瘍細胞を内在化し、腫瘍抗原を処理し、共刺激分子CD86の共発現とともにMHC-II分子を介して表面に提示します。次に、これらの樹状細胞は、MHC-IIおよびCD86を標的とした免疫染色およびフローサイトメトリー分析を受けて、それらの活性化状態を特定します。...

この動画では、抗体マイクロアレイチップを用いて環境試料中のシアノバクテリア株を検出する方法を実演しています。さまざまな細菌を運ぶサンプルは、印刷された抗体と相互作用し、蛍光色素標識抗シアノバクテリア株抗体による免疫染色は、異なるスポットでの蛍光を通じて特定のシアノバクテリア株の存在を明らかにします。...

このビデオは、3Dハイドロゲルにカプセル化された細胞を免疫染色する技術を示しています。神経前駆細胞を含むハイドロゲル培養物を固定し、透過処理し、ブロッキング溶液で処理して非特異的免疫染色を防止します。一次抗体カクテルを添加して特定のタンパク質に結合し、続いて蛍光標識二次抗体と核染色剤を添加します。次に、サンプルをスライドにマウントし、共焦点顕微鏡で観察します。...

このビデオは、アミロイドベータ(Aβ)ペプチド特異的抗体をラットの海馬に連続注入する技術を示しています。この研究では、Aβペプチド特異的抗体の制御された注入と可溶性Aβオリゴマー(Aβo)のラット海馬への注入を組み合わせて、オリゴマーと抗体との間の相互作用を研究するための両側カニューレシステムを埋め込むことを採用しています。...

このビデオでは、静電容量式免疫プローブバイオセンサーを使用してペプチド伝達物質を検出および定量する方法を実演しています。抗体でコーティングされた官能基化された電極は、目的のペプチドと相互作用し、シグナルの変化を引き起こし、ペプチドの正確な測定と検出を可能にします。...

このビデオでは、T細胞におけるT細胞受容体によるカルシウム流入を解析しています。抗CD3抗体はT細胞シグナル伝達経路を活性化し、Indo-1色素と結合する細胞内カルシウムイオンを増加させます。フローサイトメトリーでは、カルシウムフリー状態からカルシウム結合状態へのスペクトルシフトは、T細胞受容体によって誘発されるカルシウム流入と相関しています。...

このビデオは、線虫Caenorhabditis elegansのマイトファジーを研究するためのin...

このビデオは、磁性ナノ粒子ベースの免疫測定法のためのマイクロ流体システムを示しています。検出システムは、チャネル内に磁気トラップを組み込んだマイクロ流体デバイスを利用しています。一次抗体およびペルオキシダーゼ標識二次抗体に結合した抗原被覆磁性ナノ粒子からなる、あらかじめ形成された免疫複合体をチャネルに導入します。免疫複合体は、外部磁場を印加すると多孔質磁気トラップに捕捉されます。ペルオキシダーゼによる触媒作用により蛍光を発する蛍光性基質を用いて、捕捉された免疫複合体を顕微鏡で検出します。...

このビデオは、がん細胞の複製ストレスを定量化するための免疫蛍光ベースのアプローチを示しています。ヒドロキシ尿素処理細胞は、免疫蛍光法によって検出される一本鎖DNAを産生します。緑色の蛍光病巣の数は、がん細胞における複製ストレスのレベルを示しています。...

このビデオでは、交差反応性のないマルチプレックスサンドイッチ免疫測定法のためのスナップチップ技術の実装を紹介しています。それぞれ異なる試薬を含む2つのマイクロアレイスライドをスナップする簡単な操作で、クロスコンタミネーションなしで試薬の移動が保証され、サンドイッチイムノアッセイを使用して複数のタンパク質を検出するのに役立ちます。...

このビデオでは、同じ宿主種由来の一次抗体を用いてマルチプレックス免疫染色を行うアッセイを実演しています。この方法では、副腎組織切片が2段階の免疫染色プロセスを経ます。最初に、切片を皮質のマーカーに特異的な抗体で染色し、続いて結合した抗体を剥がし、髄質のマーカーに特異的な抗体で再染色します。...

このビデオは、腫瘍組織に浸潤するT細胞のさまざまな亜集団を分析するためのin-situ蛍光マルチスペクトルイメージング技術を示しています。腎細胞がん組織凍結切片は、特異的な阻害性受容体を発現し、免疫療法抵抗性の表現型を示すCD8+ T細胞を標識する抗体で処理されます。標識された切片をマルチスペクトル顕微鏡を用いて可視化し、異なるCD8+...

このビデオは、単純ヘルペスウイルス-1感染における感染細胞タンパク質0、ICP0の輸送を監視する方法を示しています。de...

このビデオは、マウスの肺に存在する免疫細胞を同定するin...

このビデオは、ウイルス感染細胞におけるカスパーゼを介したタンパク質切断を評価する方法を示しています。ウイルス感染後、カスパーゼは活性化され、さまざまな宿主細胞タンパク質やウイルス核タンパク質を分解しますが、特定のカスパーゼ阻害剤はこの分解を防ぎます。...