ナノエマルジョンアジュバントワクチンの調製

要約

出典:Zhang, Z. et al., Preparation, Characteristics, Toxicity, and Efficacy Evaluation of the Nasal Self-Assembled Nanoemulsion Tumor Vaccine In Vitro and Vivo.J. Vis. Exp. (2022年)

このビデオは、ナノエマルジョン腫瘍ワクチンの製造を示しています。合成ペプチドとアジュバントを運ぶ安定した石油貯留層デポは、低エネルギーナノエマルジョンによって製造され、腫瘍免疫療法に大きな期待が寄せられています。

プロトコル

1. I-OVA NEの準備

1. 1 mgのモノホスホリル脂質A(MPLA)と100 μLのジメチルスルホキシド(DMSO)を5分間ボルテックス混合し、室温(RT)で4時間静置して完全に溶解させます。
2. Tween 80 と IKVAV-OVA_257-264 (I-OVA) を定量的に添加し、混合します><。 手記：Tween 80 と I-OVA を 25:1 の質量比で混合しました。
3. ステップ1.2で調製した混合物にスクワレンを加えます(7:3、Smix:スクアレン)。
4. ステップ1.3で調製した混合物に100 μLのMPLA溶液(10 mg/mL)を加えます。
5. 低エネルギー乳化法を用いてナノエマルジョンワクチンを調製する:全体積の約70%の水滴に混合溶液を加え、穏やかに攪拌して透明で容易に流れる混合物を得る
   手記：BNEコントロール(ブランクエマルジョン)は、水をI-OVAに置き換えて、同じ方法で調製しました。

材料

この記事で使用された材料の一覧

名前	会社	カタログ番号	コメント
MPLAの	Invivogen リット株式会社	TLRL-MPLAの
OVA257–264	上海ボタイ バイオテクノロジー(株)	NAの
IKVAV-PAの合成ペプチド(I-OVA)結合	上海ボタイ バイオテクノロジー(株)	NAの