長時間の光への曝露後のショウジョウバエのシナプス調節

要約

出典:Sugie, A., et al. 長時間の光への曝露後のショウジョウバエメラノガスター光受容体のシナプス調節の解析。J. Vis. Exp.△ 120

このビデオは、神経伝達物質の放出とその結果としてのシナプス活動の調節におけるBruchpilotタンパク質の役割を研究するために、特定の光条件下でのDrosophila melanogasterの飼育を示しています。

プロトコル

>1. 光の露出条件

1. 幼虫の段階から脱皮まで、ハエを25°Cで12時間の明るいサイクル/ 12時間の暗いサイクル(LD)に保ちます(図1A)。
2. 卵閉後0〜6時間でハエを採取し、ハエの餌が入った新しいバイアルに入れます。
3. バイアルを3つのステップ(高さ41 cm、底面21 cm、厚さ4 cm、高さ13 cm)で透明なアクリル樹脂ラックにセットします(図1B)。
4. ラックとLEDパネルの間の距離を調整し、デジタル照度計を使用して平均1,000ルクスの照明を提供します(図1C)。
5. 小さなインキュベーターで、25°Cで一定暗色(DD)、12時間光/12時間暗サイクル(LD)、または一定光(LL)のいずれかの条件下でハエを1〜3日間保持します(図1Aおよび1C)。

結果

図1:定義された光強度への曝露条件の準備。 (A)閉塞後の光曝露プロトコル。DD、連続した暗闇;LD、12時間明るい/12時間暗い;LL、光に常にさらされています。ハエの脳は、括弧内に示された時間に解剖されました(以前の出版物9から適応)。(B)バイアルは、カスタマイズされたアクリル透明ラックに整列されています。(C)アクリルラックと2つのLEDパネルを小さなインキュベーターに入れ、ハエを1,000ルクスの光強度にさらすように調整します。

材料

この記事で使用された材料の一覧

名前	会社	カタログ番号	コメント
薬瓶	Hightech, 日本	MKC-20
プラグ	Thermo Fisher Sciehtific(米国	AS-275
アクリル樹脂製のカスタマイズされた透明ラック	株式会社シンシン		各ステップの高さは41cm、底面は21cm、厚さは4cm、高さは13cm
クールなインキュベーター	三菱電機、日本	CN-40Aの
LEDパネル	MISUMI, 日本	LEDXC170-W
デジタル露出計	CEMの	DT-1301
フライパッド	Tokken, 日本	TK-ハ03-S

) の コーポレーション です