リポ多糖を用いたラットモデルにおける脳微小出血の誘導

Abstract

出典:Li, D., et al. ラットのリポ多糖注射によって誘発される亜急性脳微小出血。J. Vis. Exp. (2018).

このビデオは、リポ多糖(LPS)を使用してラットモデルで血液脳関門(BBB)の破壊と脳微小出血を誘発するプロセスを示しています。これは、BBBの透過性の増加とそれに続く脳組織の損傷につながる免疫応答の配列を強調しています。

Protocol

動物モデルを含むすべての手順は、地元の施設動物管理委員会とJoVE獣医審査委員会によって審査されています。

1. 材料

1. LPS注射剤の調製
   1. 25 mLの蒸留水をサルモネラ菌由来のLPS粉末25 mgに加えて、最終濃度を1 mg / mLにします。.注射液は滅菌チューブに入れて4°C.
      で保存してください。 注意：LPSは有毒です。

2. 動物

1. 10週齢の雄Sprague-Dawley(SD)ラット(平均体重:280 ± 20 g)に腹腔内注射によりLPSを投与します><。 注意：ラットが他の組織から購入された場合、適応期は7日以上でなければなりません。

3. LPSインジェクション

1. LPSを各ラットに1 mg / kgの用量で腹腔内に注射し、ラットを自宅のケージに戻します。
   手記：麻酔は必要ありません。
2. 6時間後、同じ用量のLPS注射をラットに注射します。
3. 16時間後、ラットに同用量のLPSを注射します
   注意：SDラットにLPSを1 mg / kgの用量で注射すると、死亡率が5%になる可能性があります。.死亡率は、若年または高齢のラットまたは妊娠中の雌ラットでさらに増加する可能性があります。
4. LPS注射後、ラットをケージに戻し、食べ物や飲み物に自由にアクセスできるようにします
   手記：ラットは明確な全身性炎症反応を示すため、実験中、ケージは清潔なままでなければなりません。ラットは、最初のLPS注射後の体重、一般的な外観、および態度について頻繁に(2回日)監視する必要があります。.ラットが猫背の姿勢、動きたがらない、大幅な体重減少(>20%)、またはポルフィリン染色を示し始めた場合、7日間の研究エンドポイントの前に人道的に安楽死させる必要があります。

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
組合	シグマ・アルドリッチ	L-2630	炎症誘発用
リン酸緩衝生理食塩水(PBS)	ソーラーバイオ	P1022	実験で一般的に使用される一種の緩衝液