神経病理学

脳の萎縮を検出するには、さまざまな年齢の神経変性マウスモデルから脱パラフィンされた脳切片を載せたスライドから始めます。...

これらのNPを視覚化するには、脱パラフィン化された固定されたヒト脳切片を取ります。...

二重蒸留水を加えて切片を洗います。...

組織を四酸化オスミウムで処理し、リポフスチンを含む細胞構造を安定させます。...

組織をホモジナイズして、タンパク質をバッファーに放出します。プロテアーゼ阻害剤はプロテアーゼ活性を阻害し、タンパク質の分解を防ぎます。...

界面活性剤、還元剤、およびトラッキング色素を含むローディングバッファーを添加します。...

タンパク質分解酵素とインキュベートして正常なプリオンを消化し、耐性のある凝集体はそのまま残します。...

過酸化水素溶液とインキュベートして、内因性ペルオキシダーゼを阻害し、非特異的な染色を防止します。...

これらの切片には、海馬ニューロン内に見られるタウタンパク質の異常な凝集体である神経原線維変化が含まれています。...

ヘパラン硫酸を視覚化するには、まず、アミロイドプラークを含む罹患したヒト海馬組織切片から始めます。...

サンプルを遠心分離して細胞の破片をペレット化し、上清を回収します。...

このプロトコルは、ニューロン癌細胞からのタンパク質の抽出を概説しています。細胞をバッファーで洗浄し、酵素的および機械的破壊によって溶解します。抽出されたタンパク質に富む上清は、遠心分離後に回収されます。...

このビデオは、顕微鏡検査のためにラット皮質ニューロンを蛍光染色する手順を示しています。F-アクチンと樹状タンパク質を標的とし、構造的完全性を解析し、神経細胞の機能と健康を研究するために重要なF-アクチン密度を計算します。...

このビデオでは、密度勾配遠心分離と非アミロイドタンパク質の消化を使用して、マウス脳組織抽出物からアミロイド線維を分離するプロトコルを示しています。...

このビデオでは、マウスの一次小脳顆粒ニューロンにおける活性酸素種(ROS)を使用したニューロン損傷モデルの生成について概説しています。高濃度の過酸化水素を添加することにより酸化ストレスを誘発するプロセスを詳しく説明しています。ROS曝露は、DNA鎖の切断とゲノムの不安定性を引き起こします。さらに、細胞タンパク質の酸化はその機能を損ない、脂質過酸化は膜の完全性を損ないます。このカスケードは、シトクロムcの放出とカスパーゼの活性化につながり、ニューロンのアポトーシスを引き起こします。...

このビデオは、ミクログリアを使用してナノ粒子の神経毒性効果を評価する方法を示しています。ナノ粒子によるミクログリアの活性化、ミクログリア由来の炎症誘発性サイトカインを単離するための条件付け媒体のろ過、および条件化媒体による視床下部ニューロンの毒性試験の手順を概説しています。...

このビデオは、ショウジョウバエの幼虫の分節神経に機械的損傷を介して神経変性を誘発する方法を示しています。麻酔をかけた幼虫の腹側キューティクルを鉗子でつまんで、分節神経に損傷を与えます。負傷した幼虫は食物で維持されるため、損傷によって神経の運動ニューロンが変性し、神経筋接合部(NMJ)が破壊される可能性があります。...

このビデオは、神経毒6-ヒドロキシドーパミン(6-OHDA)を脳に注入することにより、パーキンソン病のラットモデルを作成する手順を示しています。内側前脳束(MFB)への神経毒注入は、運動制御に関与するドーパミン作動性ニューロンを特異的に標的とし、それらの破壊を引き起こし、パーキンソン病の症状を再現します。...

このビデオでは、ヒト胚性幹細胞を神経オルガノイドにするための段階的なプロトコールが示されています。この方法では、ニューロンのロゼット形成を誘導し、その後、疎水性膜上で制御された成熟と最終培養を行い、完全に発達した神経オルガノイドを達成します。...

このビデオは、パーキンソン病を研究するためのモデルを提供するために、ヒト胚性幹細胞(hESC)のドーパミン作動性ニューロンへの分化を示しています。hESCは、マイクロウェルプレート内の神経誘導培地で培養され、3Dニューロスフェアが形成されます。次に、これらを神経誘導培地で培養して、ドーパミン作動性前駆ニューロンへの分化を促進します。ニューロンの最終的な成熟は、気液界面条件下で培養インサートで起こり、成熟したドーパミン作動性ニューロンからなる3Dオルガノイドが得られます。...

このビデオは、アミロイドβ(Aβ)凝集体によるニューロン成長円錐の崩壊のin...

このビデオは、アルツハイマー病患者からアミロイドベータ(Aβ)ペプチドの沈着を分析するためのヒト皮質脳スライスを準備する手順を示しています。マトリックス支援レーザー脱離イオン化イメージング質量分析(MALDI-IMS)を使用して。ステップには、スライドの準備、イオン化を促進するための組織の処理、およびアミロイドベータペプチドの空間分布の分析が含まれます。...

このビデオは、α-シヌクレイン(αS)凝集体で処理されたニューロンの免疫染色を示しています。ニューロンは最初にαS凝集体で処理されます。その後、それらを固定し、透過処理し、ブロッキング溶液で処理します。一次抗体を添加し、続いて蛍光標識二次抗体と核染色剤を添加します。次に、サンプルをマウントし、顕微鏡で観察します。...

このビデオは、レーザー損傷を使用して成魚の網膜変性を誘発する手順を示しています。レーザーは網膜の光受容体細胞を標的とし、細胞死と変性プロセスを引き起こします。この損傷により、ミュラーグリア(MG)細胞が活性化され、網膜再生を助ける幹細胞前駆細胞への脱分化が起こります。...

このビデオは、単量体のアミロイドペプチドを成体のゼブラフィッシュの前脳に注入してアミロイド毒性を発生させる手順を示しています。これは、アルツハイマー病で見られるニューロンの損傷を模倣しています...

このビデオでは、環状アデノシン一リン酸(cAMP)バイオセンサーと発光検出を使用して、トランスフェクションされた細胞の匂い受容体活性化を測定するためのプロトコルを示しています。この方法は、嗅覚ニューロンにおける受容体-リガンド相互作用とシグナル伝達経路の研究に適用されます。...

このビデオは、アミロイドベータペプチド、塩化アルミニウム、および海馬領域での有毒なアミロイドプラーク形成をまとめて助ける神経炎症性成長因子を注入する手順を示しています。これは、アルツハイマー病の特徴であるラットの記憶障害を引き起こします。...

このビデオは、アルツハイマー病のマウスモデルを確立するために、歯状回へのアミロイドベータの正確な定位固定装置注入を示しています。アミロイドβタンパク質の正確な座標決定と制御された送達は、ニューロンの分解を引き起こし、記憶処理を混乱させ、アルツハイマー病の発症に寄与します。...

このビデオは、α-シヌクレインフィブリルをマウスに注入して神経炎症を誘発する方法を示しています。このフィブリルは、変異したα-シヌクレインタンパク質を発現するトランスジェニックマウスに腹腔内に注入されます。中枢神経系に到達すると、原線維はニューロンに入り、変異したタンパク質の凝集を誘導します。凝集体は、隣接するニューロン、ミクログリア、およびアストロサイトに広がります。凝集体の認識は、ミクログリアが神経炎症を誘発し、ニューロンを損傷する引き金となります。...

このビデオは、赤色蛍光タンパク質でタグ付けされたプリオン様タンパク質を発現するC.エレガンスのin...

このビデオは、パーキンソン病をモデル化するために、ラットの黒質にウイルスベクターを注入するプロセスを示しています。ラットの調製手順、黒質へのウイルスベクターのマイクロインジェクション、および回復手順を概説しています。...

このビデオでは、凍結死後のヒト脳組織から洗剤不溶性タンパク質凝集体を分離し、濃縮するプロセスを説明しています。これは、均質化、界面活性剤処理、超音波処理、不溶性凝集体を分離および精製するための超遠心分離などの主要なステップを示しています。最後のステップでは、凝集体を尿素緩衝液に可溶化して、さらに分析します。...

このビデオでは、遺伝子組み換えショウジョウバエの脳におけるタンパク質凝集体のイメージングと定量を示しています。脳を固定し、洗浄し、埋込前に退色防止剤で処理します。画像は共焦点顕微鏡を使用して取得され、定量化されて変異タンパク質凝集体の伝達を観察します。...

このビデオは、免疫蛍光法を用いて、正常および食事誘発性肥満(DIO)の成体ゼブラフィッシュ脳組織におけるオレキシン受容体とカンナビノイド受容体の共局在を調査するためのプロトコルを示しています。...

このビデオは、α-シヌクレインの既成線維で前処理された胚マウスドーパミンニューロンにおけるα-シヌクレイン蓄積を定量化するプロセスを示しています。免疫蛍光法を用いて、α-シヌクレイン凝集体を含むドーパミンニューロンを固定、染色、定量する手順を概説しています。...

このビデオは、蛍光ペプチドアッセイを使用して、恐怖条件付けおよび制御ラットの脳から外側扁桃体の異なる細胞内コンパートメントにおけるプロテアソーム活性を測定する方法を示しています。プロテアソームは蛍光ペプチド基質を切断して蛍光分子を放出し、プレートリーダーを使用して定量化し、核およびシナプスタンパク質画分のプロテアソーム活性を評価します。核活性の増加は遺伝子発現の変化を示唆し、シナプス活性の低下は長期記憶の維持に必要なタンパク質の安定化を示しています。...

このビデオは、パーキンソン病ラットモデルでレボドパ誘発性ジスキネジアを誘導するプロセスを示しています。これは、レボドパをドーパミン変換阻害剤と一緒に投与するものです。注射を繰り返すと、脳のニューロンが過剰に刺激され、運動機能障害を引き起こします。...

このビデオは、ラットモデルで眼窩下神経を結紮することにより、口腔顔面神経障害性疼痛を誘発する方法を示しています。これにより、神経の損傷や炎症が起こり、異常な疼痛シグナル伝達を引き起こし、慢性疼痛の状態を模倣します。これは、口腔顔面疼痛アッセイの研究に使用できます。...

このビデオでは、老化細胞で上昇するβ-ガラクトシダーゼ活性を染色することにより、皮質オルガノイド切片の老化ニューロンを検出する方法を実演しています。この酵素は基質を切断して青色の生成物を生成し、続いて染色されたニューロンを顕微鏡で観察します。...

このビデオでは、2点リゾフォスファチジルコリン(LPC)注入を用いた局所性脱髄マウスモデルの作成を実演しています。麻酔をかけたマウスの頭蓋骨が露出しています。注入座標が決定され、穴が開けられて、標的部位でのLPC注入が可能になります。LPCは炎症を介してニューロンの局所性脱髄を誘導しますが、2点注射によりその持続可能性が保証されます。...

このビデオでは、ラットの海馬切片でビオシチンを充填した介在ニューロンを可視化するプロセスを示し、特異的抗体と蛍光顕微鏡を使用してその神経化学的同一性を強調しています。...

このビデオでは、直腸吸引生検切片におけるS-100タンパク質の免疫組織化学染色を実演しています。抗原回収切片をブロックし、一次抗体で治療し、続いてヒルシュスプルング病のマーカーであるS-100に対する二次抗体で治療します。発色基質を添加して、標的細胞を染色します。サンプルを脱水してマウントしてから、顕微鏡で視覚化します。...

このビデオでは、リゾレシチン注射を使用してマウス脊髄ニューロンの脱髄を誘導し、その後、オリゴデンドロサイト前駆細胞の遊走と分化を通じて再髄鞘形成を行う方法を示します。このプロセスは、ニューロンの信号伝達を損ない、その後徐々に回復します。...

このビデオでは、黄色蛍光タンパク質(YFP)でタグ付けされた変異型ヒトタウタンパク質をコードするレンチウイルスをヒト神経細胞に形質導入し、タンパク質凝集を研究するプロセスを示しています。ウイルスの侵入から変異型タウの発現までのステップを概説し、ニューロンに目に見える細胞質タウ凝集体が形成されるまでのステップを概説しています。...

このビデオでは、ミトコンドリア呼吸鎖複合体、ミトコンドリアDNA関連タンパク質、ミトコンドリア外膜タンパク質に対する抗体でニューロン細胞を標識し、その後、フローサイトメトリーでそれらのレベルを定量化する方法を示します。...

このビデオでは、テトラサイクリン誘導システムを使用して、遺伝子組み換えヒト細胞のγ-セクレターゼ活性を測定する手順を示しています。このプロセスには、テトラサイクリンによるAPP遺伝子発現の誘導、アミロイドβペプチドの生成、およびルシフェラーゼ産生の活性化が含まれます。次に、ルシフェラーゼ-基質反応から生じる生物発光を測定し、γ-セクレターゼ活性を反映します。...

このプロトコルは、マウス脳切片の青斑核領域を特定するための免疫組織化学の使用について概説しています。ドーパミンβ-ヒドロキシラーゼを緑色蛍光色素標識抗体で標的とすることにより、ノルエピネフリン産生ニューロンは顕微鏡下で緑色蛍光として可視化されます。...

このビデオでは、マイクロダイアリシスプローブを使用してマウスの脳の間質液(ISF)から細胞外タンパク質を収集するプロセスを示しています。高分子量のカットオフ半透膜を備えたマイクロダイアリシスプローブを、埋め込まれたガイドカニューレを介して麻酔をかけたマウスの脳に挿入します。ポンプに接続されたプローブは、生理学的緩衝液が脳組織を灌流し、ISFと混合することを可能にします。ISF中のタンパク質は半透膜を横切って拡散し、分析のために収集されます。...

この動画では、マウスの固定化を繰り返すことで慢性的なストレスを誘発し、コルチコステロンの放出とニューロンのグルタミン酸受容体活性の低下を引き起こし、うつ病のような行動を引き起こす方法を実演しています。...

このビデオでは、神経変性を模倣するために、神経毒性ペプチドを用いてラットの脳半スライスを調製し、治療する手順を実演しています。このプロトコルでは、同じ解剖面内でコントロールスライスと治療スライスを直接比較することにより、神経変性イベントを分析できます。...

このビデオは、トランスフェクションされた後根神経節細胞を使用して、神経ペプチド受容体アゴニストで神経伝達物質の放出を研究する方法を示しています。...

このビデオは、マウス脳切片のMeynert領域の基底核におけるコリン作動性線維の免疫組織化学的染色を示しています。切片をブロックし、一次対コリンアセチルトランスフェラーゼで処理し、続いてビオチン化二次抗体で治療します。アビジン-ビオチン-ペルオキシダーゼ複合体が添加され、これが二次抗体に結合し、続いて発色基質が添加されます。その後、切片を脱水してマウントし、顕微鏡で視覚化します。...

このビデオは、マウスの脳から採取したシナプトソームにおけるドーパミン取り込みの評価を示しています。ドーパミントランスポーターを介したドーパミン取り込みのためのシナプトソームの調製、さまざまな濃度の放射性標識ドーパミンでシナプトソームを治療する手順、シナプトソームを単離する手順、およびドーパミン取り込みを定量化するための放射能の測定手順を概説します。...

このビデオは、ビオシチンで満たされた介在ニューロンを含む固定ラットの脳スライスを染色する手順を示しています。このプロトコールには、アビジン-ビオチン複合体(ABC)によるインキュベーション、HRPおよび発色基質による染色、四酸化オスミウムによる構造の保存、およびイメージングのための樹脂への組織包埋が含まれます。...

このビデオでは、セロトニン症候群に罹患したラットの脳組織において、オリゴヌクレオチドプローブを用いたセロトニン受容体RNA合成の検出を実演しています。このプロトコールには、組織の前処理、プローブハイブリダイゼーション、および顕微鏡下でセロトニン受容体RNA発現を可視化および定量するための酵素検出が含まれます。...

この動画では、マウスの小脳スライスを用いて、運動制御に不可欠な平行線維、登山線維、プルキンエ細胞間のシナプス相互作用を調べました。クライミングファイバーの刺激は、プルキンエ細胞に長期うつ病(LTD)を誘発し、シナプス強度を弱め、平行線維刺激に対する反応を低下させました。...

このビデオでは、グリア細胞のシングルセルイメージングのためのトランスジェニックショウジョウバエ脳の免疫蛍光染色を実演しています。脳は、グリア特異的な組換え酵素システムの制御下で、抗原性エピトープのさまざまな組み合わせと融合した膜標的タンパク質を発現します。単離および固定された脳は、抗原エピトープに特異的な一次抗体で染色され、続いて蛍光色素標識二次抗体で染色されます。この標識により、さまざまな脳領域にわたる異なるグリア細胞亜集団の同時イメージングが可能になります。...

このビデオでは、ラットの聴覚皮質を切除するための定位誘導手術を示しています。その手順には、定位フレームに固定された麻酔ラットの解剖学的ランドマークの特定、聴覚野の上の頭蓋骨に窓を作ること、皮質層を吸引すること、アブレーションが音響処理に与える影響を評価するための術後ケアの提供などが含まれます。...

この動画では、さまざまな硬さのハイドロゲルで培養した神経堤細胞のファロイジン染色を実証するために、蛍光顕微鏡を用いた蛍光染色を行う手順を説明し、細胞骨格の組織化を可視化・解析します。...

このビデオでは、ビススルホスクシンイミジルサブエレートまたはBS3を使用したニューロン表面タンパク質の架橋を示しています。単離され冷却されたマウスの脳は冠状に切片化されています。切片から所望の領域を抽出し、ミンチし、BS3で処理します。BS3は、GABA受容体などの表面タンパク質を架橋し、内部タンパク質を変化させません。反応はグリシンで急冷してから、サンプルを処理してさらに分析します。...

このビデオでは、蛍光共鳴エネルギー移動(FRET)ベースの細胞内グルコースセンサーを使用して、ショウジョウバエ幼虫の運動ニューロンにおけるグルコース取り込みを測定する技術を示しています。幼虫を解剖して腹側神経索を露出させた後、センサーのドナー蛍光色素分子が発する蛍光を通じて運動ニューロンを視覚化します。グルコースで刺激されると、センサーのドナーとアクセプター蛍光色素の間のFRETはアクセプターからの蛍光の放出をトリガーし、対照幼虫とグルコース代謝がアップレギュレートされた変異幼虫との間のグルコース取り込みの比較を可能にします。...

このビデオでは、一次抗体と二次抗体を使用して、蛍光標識されたアストロサイトによる固定マウス脳組織切片の免疫染色手順と、共焦点顕微鏡で染色されたアストロサイトの画像を取得する手順を示しています。...

このビデオでは、レーザーキャプチャーマイクロダイセクションを使用して、ヒトの死後小脳組織からプルキンエ細胞を単離する方法を示します。...

このビデオでは、ダウンストリーム分析のために凍結マウス脳組織切片を準備するための詳細なステップバイステップのプロトコルを示しています。...

このビデオでは、TNF-αを使用した早期椎間板(IVD)疾患の炎症誘発性および変性臓器培養モデルの開発を示しています。TNF-αを椎間板に注入する手順を概説し、TNF-αがIVDの炎症と分解を誘発するメカニズムを説明しています。...

このビデオでは、酵素消化と機械的トリチュレーションを使用して、凍結ラットの脳組織を単一細胞懸濁液に解離する様子を説明しています。調製した細胞は固定され、フローサイトメトリーや遺伝子発現解析などのダウンストリームアプリケーションのためにエタノールで透過処理されます。...

このビデオは、マウスの脳組織から単離された細胞膜タンパク質のパルミトイル化状態の解析を示しています。このプロセスでは、非パルミトイル化システインを露出させてブロックし、次にパルミトイル化システインに結合するポリマーを使用して、単離されたタンパク質のパルミトイル化状態の評価を支援します。...

このビデオでは、神経毒性のあるアミロイドβ分泌細胞をカプセル化するポリマーマイクロビーズの作製方法を紹介しています。細胞-ポリマー懸濁液はマイクロビーズ製造装置で処理され、カルシウム架橋によってポリマーゲル化が達成され、細胞の周囲に球状のマイクロビーズが形成されます。このポリマーは、細胞増殖を可能にすると同時に、制御された長期のアミロイドベータ放出を可能にし、アルツハイマー病におけるその蓄積をシミュレートします。...

このビデオでは、固定された死後分析されたヒトの脳を対称的に解剖し、さらなる分析のために小さな組織ブロックを準備するための段階的な手順を示しています。...

このビデオは、ミトコンドリアがカルシウムを吸収する際の蛍光のリアルタイムな変化を監視することにより、ミトコンドリアのカルシウム保持能力を評価する手順を示しています。このアッセイは、ミトコンドリアの機能や、アポトーシスや神経変性疾患などのカルシウム関連プロセスの研究に役立ちます。...

このビデオは、マウスの脳への継続的な薬物注入が血糖値に及ぼす影響を示しています。グルコース代謝は、絶食したマウスの尾から血液を採取し、経口グルコース投与の前後のグルコースレベルを測定することによって評価されます。インスリン耐性は、マウスにインスリンを注射することによって評価され、グルコースレベルは特定の間隔で記録されます。...

このビデオでは、麻酔をかけたラットが、磁場下で前房に磁気ビーズを注入して虹彩角膜の角度をブロックする眼科手術を受けています。この閉塞は、海綿網を閉塞し、房水の排出を妨げ、眼圧の上昇を引き起こし、網膜神経節細胞と視神経を損傷します。これにより、緑内障のような状態が発症します。...

出典:Kummari, E., et.al., Laser Capture Microdissection - A Demonstration of the Isolation of individual Dopamine Neurons and the Entire Ventral Tegmental Area., J. Vis. Exp.

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出典:Baleriola, J., et.al.、高解像度In Situハイブリダイゼーションを使用した脳切片における軸索局在mRNAの検出。 J. Vis. Exp. (2015)このビデオは、蛍光in...

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これらの細菌を検出するには、脱パラフィンし、再水和し、細菌に感染したヒト脳切片を採取し、露出したタンパク質抗原と不活性化された内因性ホスファターゼを採取します。...

このウイルスは大脳皮質の錐体ニューロンに感染し、発現したウイルスタンパク質は封入体として知られる細胞質内顆粒構造内に局在します。...

洗ってパラフィンを取り除き、アルコール濃度を下げて組織を再水和します。...

このビデオは、アストロサイト培養物からの細胞表面および細胞内タンパク質の単離を示しています。アストロサイト培養物を氷上に置いてエンドサイトーシスを阻害し、細胞表面タンパク質をビオチン化試薬で標識します。細胞を溶解して、ビオチン化細胞表面タンパク質と非ビオチン化細胞内タンパク質を放出します。最後に、ストレプトアビジンでコーティングされたビーズを使用して、ビオチン化された細胞表面タンパク質を細胞内タンパク質から分離します。...

このビデオは、新生児マウスの脳内のマウスサイトメガロウイルス(MCMV)の分布を研究するための脳室内注射プロセスを示しています。MCMVは、視認性を高めるために増強緑色蛍光タンパク質(EGFP)を発現するように設計されており、マウスの子犬の脳の側脳室に注入されます。注入されたウイルスは脳脊髄液を循環し、辺縁帯、脈絡叢、脳室下帯などの脳室周囲領域の細胞に感染します。...

このビデオは、発達中の脳におけるジカウイルス感染のin...

このビデオは、ゼブラフィッシュの幼生の脳にリポ多糖類(LPS)を微量注入して神経炎症を誘発する方法を示しています。幼虫をアガロースで裏打ちされた皿の上に置き、針を脳室に挿入し、LPSを注入します。注入されたLPSは、神経炎症を引き起こす免疫反応を引き起こします。...

このビデオは、ミトコンドリア内で蛍光タンパク質を発現する遺伝子組み換えアストロサイトのミトコンドリアの健康評価を示しています。このタンパク質は、ミトコンドリアの蛍光が緑から赤に変化し、ストレスや損傷を示すため、ミトコンドリアの健康の変化を追跡するのに役立ちます。画像は、さまざまなパラメーターを使用してキャプチャおよび分析されます。...

このビデオは、ラットの脳の皮質にキメラHIVウイルスを注入する手順を示しています。そこでは、ウイルスRNAが宿主ゲノムに統合され、複製され、拡散して実験モデルで活動性HIV感染が確立されます。...

このビデオでは、CNS感染したマウスモデルの生成を実演しています。授乳中の子犬に、頭蓋内および腹腔内の両方でウイルスを注射します。ウイルスは広がり、CNSに感染し、ニューロン細胞の死と炎症を引き起こします。子犬は、病気が進行するにつれて感染の症状について評価されます。...

このビデオは、マウスモデルでの神経炎症の生成を示しています。微小創傷を有する麻酔マウスを採取し、その創傷に偽狂犬病ウイルス(PRV)の接種液を塗布する。ウイルスは末梢神経に感染し、後根神経節(DRG)に広がり、さらに脊髄と脳に感染します。神経系のニューロンに感染すると、免疫応答が起こり、ニューロンの損傷が誘発され、神経炎症が引き起こされます。...

このビデオは、成体マウスにジカウイルス懸濁液を脳内に注射して神経変性を誘発する方法を示しています。麻酔をかけたマウスを定位固定装置フレームに固定し、露出した頭蓋骨に穴を開けて注射します。ジカウイルスの懸濁液が脳組織に注入されます。ウイルス感染は炎症を引き起こし、神経変性を引き起こします。...

このビデオは、リステリア菌に感染した灌流マウスの脳からの感染性細菌負荷の定量化を示しています。...

このビデオは、遊離FITCおよびFITCをロードしたフェリチンを使用して、膜インサート上の星状細胞と内皮細胞を使用して、in...

このビデオでは、ヒト胎児の神経幹細胞にジカウイルスを感染させる手順を実演しています。感染した細胞は、さらなる研究に使用できます。...

このビデオでは、血液脳関門(BBB)を通過する病原体を研究するためのin...

出典:Funes, S., et.al., Human Microglia-like Cells: Differentiation from Induced Pluripotent Stem Cells and In Vitro Live-Cell Phagocytosis Assay using Human Synaptosomes. (ヒトミクログリア様細胞: 誘導多能性幹細胞からの分化およびヒトシナプトソームを使用した In Vitro 生細胞食作用アッセイ).J. Vis. Exp.

組織をキシレンに浸してパラフィンを溶解します。...

フルオロフォアタグ付きアルブミンを静脈内注射し、アルブミンが損傷したBBBを通過して脳に到達します。...

この組織には、神経障害の重要な指標であるアミロイド線維と脳血管壁の異常なタンパク質凝集体が見られます。...

MCCHは、脳への血流が減少することを特徴としています。これにより、脳血管の内皮細胞層への酸素と栄養素の供給が制限され、細胞が損傷を受けます。...

細胞混合物を細胞外マトリックスまたはECM溶液に懸濁します。...

首を切開して、両側の総頸動脈を露出させ、ゆるく結紮します。...

このビデオは、ミエリン由来のペプチドにアジュバントを注入して自己反応性T細胞を活性化し、脳に移動することにより、実験的自己免疫性脳脊髄炎(EAE)を誘発する方法を示しています。百日咳毒素は、血液脳関門の透過性を高めるために投与され、これらのT細胞や他の免疫細胞が脳に入ることを可能にします。これらの免疫細胞は脱髄を引き起こし、神経伝達の障害とEAEの発症につながります。...

このビデオは、EAEマウスモデルにおける血液脳関門の破壊を評価する手順を示しています。さまざまなサイズの蛍光色素が眼窩後方向に注入され、脳の血管を循環します。小さい色素は隙間から脳組織に漏れますが、大きい色素は混乱が深刻な場合にのみ入り、バリア損傷の程度と相関します。...

このビデオは、電気刺激を使用して麻酔をかけたラットの橋に組織損傷または梗塞を誘発する手順を示しています。...

この動画では、受精したゼブラフィッシュの胚を実体顕微鏡で解体した後、コレステロール合成阻害剤を照射することで、幼虫の血管破裂や脳出血を発症させています。明確な赤い斑点で識別できる出血性の幼虫は、その後、さらなる分析のために顕微鏡下で分離されます。...

このビデオは、リポ多糖(LPS)を使用してラットモデルで血液脳関門(BBB)の破壊と脳微小出血を誘発するプロセスを示しています。これは、BBBの透過性の増加とそれに続く脳組織の損傷につながる免疫応答の配列を強調しています。...

このビデオでは、ラットモデルで脳微小出血(CMH)を検出するアッセイを実演しています。CMHは、血液脳関門の破壊による脳出血であり、漏出した赤血球(RBC)によって特定されます。ラットモデルでは、固定された脳組織を凍結保護し、切片化し、赤血球のヘマトキシリン-エオシンで染色することで、CMHの顕微鏡観察を可能にします。...

このビデオは、新生児の低酸素虚血性脳損傷を研究するためのマウスモデルを作成する手順を示しています。これは、虚血を外科的に誘発し、動物を低酸素症にさらして脳の損傷を悪化させるための手順を概説しています。最後に、結果として生じる脳病変を評価し、マウスモデルがさらなる科学的研究のために準備されていることを確認する方法を示します。...

このビデオでは、イオン選択性およびイオントフォレーシス微小電極を使用して電気信号を測定および比較することにより、脳スライスの細胞外空間を特徴付ける方法を示します。このプロセスは、スペースの体積分率とねじれの程度を決定するのに役立ちます。...

このビデオでは、グルタミン酸オキシダーゼでコーティングされたMultielectrode...

このビデオでは、遺伝子組み換えマウスの仔マウスに、loxP部位とエストロゲン受容体に融合したCre組換え遺伝子を持つマウスの仔を使用して、脳海綿状奇形(CCM)を誘発しています。4-ヒドロキシタモキシフェンの投与は、内皮細胞のCreを活性化し、Ccm2の欠失と脳内のCCMの形成につながります。...

このビデオでは、脳卒中研究における炎症応答を研究するために、脳細胞と浸潤性マウスの脳組織から脳細胞と浸潤免疫細胞を酵素消化によって分離し、続いて密度勾配遠心分離によって細胞残骸とミエリンを除去する手順を示しています。...

このビデオは、マウスモデルでの血管内穿孔によるくも膜下出血の誘発を示しています。麻酔をかけたマウスの頸部領域を切開して、総頸動脈とその分岐部にアクセスします。動脈からフィラメントを挿入して頭蓋内動脈の枝を穿孔し、くも膜下出血を誘発します。...

このビデオでは、新生児脳室内出血のラットモデルを生成する方法を示します。この手順では、麻酔をかけたラットの子犬にヘモグロビンを脳の側室に注射します。ヘモグロビンは酸化ストレスを引き起こし、ヘムを放出し、脳室内出血をシミュレートします。その結果、活性酸素種と炎症性サイトカインによって引き起こされる脳組織の損傷は、脳室内出血の一般的な結果である心室拡大を引き起こします。...

このビデオは、高齢ラットの総頸動脈またはCCA結紮を使用して、虚血性脳卒中をモデル化するために、永久遠位中大脳動脈閉塞術(MCAO)を実行する手順を示しています。これにより、脳への血流が遮断され、ニューロン死につながり、脳卒中のメカニズムと潜在的な治療法を研究するためのモデルが生成されます。...

このビデオでは、くも膜下出血ラットモデルを確立する手順を示しています。麻酔をかけたラットにプローブを埋め込み、頭蓋内圧と脳血流を測定します。標的部位が特定され、針が視交叉前位置に挿入されます。その後、くも膜下腔に自家血液を注入し、頭蓋内圧を上昇させ、脳血流を減少させ、モデルを確立します。...

このビデオは、血液脳関門(BBB)内皮モデルを介したリンパ球の移動の実験的調査を示しています。in...

このビデオは、中大脳動脈閉塞を受けたラットの脳切片における梗塞帯と脳浮腫の評価を示しています。梗塞領域は酸化還元染色を使用して特定されますが、画像解析ソフトウェアのブルーフィルターと閾値機能により、影響を受けた半球の梗塞領域と浮腫が定量化されます。...

このビデオでは、in...

このビデオでは、アンジオテンシンII誘導高血圧マウスモデルで、フェノールを使用して交感神経機能を破壊し、血圧を下げる腎動脈交感神経除神経の手順を示しています。...

このビデオでは、スレッドボルトを使用して中大脳動脈(MCA)を閉塞することにより、ラットモデルで虚血性脳卒中を誘発するプロセスを示しています。この手順では、頸動脈を結紮し、外頸動脈にねじ山ボルトを挿入し、MCAから脳への血流を遮断してニューロン死を引き起こし、虚血性脳卒中を模倣します。...

このビデオでは、マウスモデルで右総頸動脈を塞ぎ、マウスを低酸素環境にさらすことにより、血栓性脳卒中を再現する手順を示しています。このプロセスにより、脳への血液と酸素の流れが減少し、血栓の形成と脳の損傷を引き起こします。...

このビデオでは、麻酔をかけたマウスに、白質内の標的脳座標に一酸化窒素阻害剤を注入することにより、白質脳卒中を誘発する正確な技術を示しています。これにより、血管が収縮し、血液供給が阻害され、ニューロンの損傷や脳卒中を引き起こします。...

出典:Wanderer, S., et al.ウサギの動脈ポーチ顕微外科分岐動脈瘤モデル。J. Vis. Exp.

出典:Sharma, T. P., et al., Translaminar Autonomous System Model for the Modulation of Intraocular and Intracranial Pressure in Human Donor Posterior Segments.J. Vis. Exp.

出典:Lani-Louzada, R., et al., げっ歯類の外科的に誘発された緑内障のための辺縁血管神経叢の全円焼灼。J. Vis. Exp.

出典:Jungen, C., et al.Impact of Intracardiac Neurons on Cardiac Electrophysiology and Arrhythmogenesis in an Ex Vivo Langendorff System. J. Vis. Exp. (2018).このビデオでは、心臓内の神経系を刺激して心臓の不整脈に対する感受性を評価するためのex...

出典:Hakim, M. A. et al., Isolation and Functional Analysis of Arteriolar Endothelium of Mouse Brain Parenchyma. J. Vis. Exp.

出典:Tang, X. et.al., 自家血液の二重注射による大量の橋出血。J. Vis. Exp.

出典:Alluri, H., et.al.血液脳関門機能障害を研究するためのIn Vitro虚血再灌流損傷モデルとしての酸素-グルコース欠乏と再酸素化。J. Vis. Exp.

出典:Gucciardo, E., et.al.、増殖性糖尿病性網膜症における線維血管合併症のex vivo組織培養モデル。J. Vis. Exp. (2019)このビデオでは、フィブリンゲルに埋め込まれた線維血管組織のex...

出典:Talley Watts, L., et al. Rose Bengal Photothrombosis by Confocal Optical Imaging In Vivo: A Model of Single Vessel Stroke.J. Vis. Exp.

出典:Kuts, R. et al.Laser-induced Brain Injury in the Motor Cortex of Rats. J. Vis. Exp.

アストロサイトは、幹細胞のニューロンやアストロサイトへの成熟と分化を促進するシグナル伝達分子を分泌します。...

このビデオは、脳室周囲内皮細胞(PVEC)からの化学療法引力の合図に応答してニューロン間移動をテストする方法を示しています。介在ニューロンは中央のコンパートメントに配置され、両側にPVECと制御細胞があります。PVECへの移動の増加は、それらの化学療法引力シグナルに対する肯定的な反応を示しています。...

このビデオは、オルガノイドの成熟を示す様々な小脳ニューロンで発現する特定の標的抗原を特定するための小脳オルガノイドスライスの免疫蛍光染色を示しています。...

このビデオは、フルオレセインジアセテート(FDA)とヨウ化プロピジウム(PI)の二重染色を使用して、小脳顆粒ニューロンとグリア細胞の混合培養からニューロンを特定する方法を示しています。生きているニューロンは緑色に、死んだニューロンは赤く見えます。...

このビデオは、突然変異したショウジョウバエの脳のキノコ体の表現型欠損を視覚化するための詳細な免疫染色プロトコルを示しています。このプロトコルには、キノコ体の適切な形態学的および機能的発達を促進する軸索誘導に関与するタンパク質であるFas2に対する抗体を使用することが含まれます。...

このビデオでは、EdU取り込みを使用して脳組織切片で新たに増殖した神経幹細胞を染色し、続いて免疫蛍光法で特定のタンパク質を可視化する手順を示し、細胞の動態と増殖の理解を深めます。...

このビデオは、蛍光顕微鏡を使用して核マーカーの発現を評価し、細胞増殖とシグナル伝達活性を決定するために、マウス胚頭蓋顔面組織からの凍結切片の免疫蛍光染色を示しています。...

このビデオでは、ニューロン小胞が特定の蛍光タンパク質で標識され、その動きを視覚化する方法を示しています。まず、蛍光タンパク質をコードするプラスミドをトランスフェクション剤とインキュベートし、次にニューロンの培養物に導入します。その後、ニューロンの画像を取得して分析し、小胞の動きを追跡します。...

このビデオは、RAレポーター細胞を使用してニューロスフィア細胞からのレチノイン酸(RA)分泌を測定する方法を示しています。ニューロスフェア細胞とRAレポーター細胞の共培養、およびRAレベルを測定するための比色RAアッセイの実施に関連するステップを概説しています。...

このビデオでは、胚性マウスの消化管の免疫染色を行い、免疫蛍光法と共焦点顕微鏡を用いてニューロン集団の分布を可視化・解析する様子をご覧いただけます。...

このビデオは、in...

このビデオは、新生児ラットの脳からオキシトシン受容体に富む核の分離を示しています。コロナルスライスとそれに続くオキシトシン受容体に富む脳核の同定と精密なパンチングにより、オキシトシン受容体に富む核を効果的に抽出し、さらなる分析を行うことができます。...

出典:Pericoli, G. et.al., 小児びまん性正中神経膠腫の生3D細胞免疫細胞化学アッセイ.J. Vis. Exp.

出典:Jantzie, L. L., et.alです。ラットの羊水内リポ多糖による出生前低酸素虚血を使用した未熟児の脳症のモデリング。J. Vis. Exp.

出典:Larpthaveesarp, A., et.alです。P10ラットにおける新生児脳卒中の一過性中大脳動脈閉塞モデル。J. Vis.

この疾患は、自己反応性免疫細胞がミエリンタンパク質を攻撃する引き金となり、ニューロンの軸索を囲むミエリン鞘を分解します。...

対照切片は、同心円状の原形質膜層を含む密集したミエリン鞘を有する軸索を示す。負傷した部分には、大きな隙間のある解圧されたミエリンが見られます。...

ストレスはオリゴデンドロサイトの機能を損ない、感情を調節する脳領域である内側前頭前皮質のニューロン軸索を囲む脂質に富むミエリン鞘を破壊します。...

このビデオは、標的タンパク質特異的抗体被覆磁気ビーズを使用して、幹細胞由来の運動ニューロンライセートから標的タンパク質と架橋されたDNA断片の免疫沈降を示しています。...

このビデオは、ショウジョウバエの背側縦筋の神経筋接合部の構造的完全性を評価するためのプロトコルを示しています。この手順では、ニューロンと筋肉を2つの異なる抗体で染色し、突然変異型と野生型のハエの蛍光パターンを比較します。突然変異型ハエのニューロン染色の減少は、神経変性を示していますが、筋肉構造は無傷のままです。...

このビデオは、蛍光タグ付きニューロンを持つ線虫に対する試験化学物質の神経変性効果の評価を示しています。正常なニューロンは、無傷の体細胞と突起の明るい蛍光を示し、蛍光の減少、腫脹した体細胞、および中断された突起は神経変性を示します。...

このビデオでは、TRPV1アゴニフェラトキシン(RTX)を使用してマウスの小繊維ニューロパチーモデルを確立する方法を示します。マウスへのRTX投与の手順を概説し、RTXが小径の感覚ニューロンでニューロン死を誘発し、それによってニューロパチーモデルを確立する方法を説明しています。...

このビデオでは、実験的自己免疫性脳脊髄炎(EAE)を使用して多発性硬化症のマウスモデルを確立しています。マウスにニューロンペプチドとアジュバントを含むエマルジョンを注入すると、自己反応性T細胞を活性化する免疫応答が引き起こされます。これに続いて、百日咳毒素(PTX)を注射して血液脳関門の透過性を高め、自己反応性T細胞が脳に浸潤できるようにします。この浸潤は、最終的にミエリン損傷をもたらすシグナル伝達カスケードを開始し、多発性硬化症の脱髄状態を模倣しています。...

このビデオでは、アクアポリン-4を標的とする活性化Th17細胞をマウスモデルに移すことにより、麻痺を誘発する手順を示しています。中枢神経系では、活性化されたTh17細胞がアクアポリン-4を発現するアストロサイトと相互作用し、免疫応答を引き起こしてマウスの尾部と四肢の麻痺を引き起こします。...

このビデオは、百日咳毒素とミエリン模倣ペプチドおよびアジュバントを含む接種物の投与を通じてマウスモデルの運動機能障害を評価するプロセスを示しています。その後、運動機能を評価するためのトレッドミルテストを行い、免疫活性化と脱髄による神経損傷を評価します。...

このビデオは、右脳病変のある半パーキンソン病ラットの運動機能を評価するための階段テストを示しています。この病変はドーパミンシグナル伝達を妨害し、左足の制御を損ない、その結果、左階段により多くのペレットが残り、運動機能障害を示しています。...

このビデオは、野生型またはALS変異型のヒトTDP-43タンパク質を発現するC.エレガンスの運動機能障害を評価するための放射状移動アッセイの使用を示しています。野生型または変異型のTDP-43発現レベルが異なる線虫は這うことができ、その動きはアッセイプレートの中心点から移動した半径方向の距離によって測定されます。このアッセイは、さまざまなC.エレガンス株の移動距離に基づいて、軽度、中等度、および重度の運動障害を区別します。...

このビデオでは、培養運動ニューロン、シュワン細胞、筋管を使用して筋肉を評価し、その後、神経筋ブロッカーによる治療で収縮を抑制する様子を説明しています。色分けされたタイムモーショングラフィックスは、色分けされたタイムモーショングラフィックを示します。赤は最も速い動きを示し、青は最も遅い動きを示します。...

このビデオでは、近接ライゲーションアッセイ(PLA)を使用して、ショウジョウバエ神経筋接合部(NMJ)でのタンパク質間相互作用の可視化を示しています。体壁を単離した後、相互作用するタンパク質を一次抗体とPLA標識二次抗体でプローブします。相互作用するタンパク質が近接しているため、コネクターオリゴヌクレオチドによるプローブのライゲーションが促進され、環状DNAが形成され、ローリングサークル増幅によって増幅されます。蛍光プローブは増幅されたDNAに結合し、NMJでのタンパク質間相互作用の可視化を可能にします。...

出典:Wagner, K. et al., Studying Membrane Protein Trafficking in Drosophila Photoreceptor Cells Using eGFP-tagged Proteins. J. Vis. Exp.

出典:Deseure, K., et al. 三叉神経障害性疼痛を研究するためのラットの眼窩下神経の慢性収縮損傷(IoN-CCI)。J. Vis. Exp.

出典:Brakkee, E. M., et al. ラットの脛骨神経腫転位モデルにおける手術と行動試験。J. Vis. Exp.

出典:Lee, D. et.al., マウスの騒音性難聴の実験条件の変更と、聴覚機能と外有毛細胞の損傷の評価。J. Vis. Exp.

出典:Lee, D., et.alです。マウスの騒音性難聴の実験条件の変更と、聴覚機能と外有毛細胞の損傷の評価。J. Vis.

出典:Olmstead, D. N., et al., Facial Nerve Axotomy in Mice: A Model to Study Motoneuron Response to Injury.J. Vis. Exp.

出典:Cheah, M., et al.感覚軸索再生のモデルとして、背根神経節注射と背根潰傷傷。J. Vis. Exp.

TUNELアッセイを使用してアポトーシス細胞死を検出するには、脳切片を酵素プロテイナーゼ-Kで処理します。...

蛍光顕微鏡を使用して、軸索の腫れと切断が徐々に増加している損傷した神経を視覚化します。...

薬物のカプセル化は、腫瘍細胞の特異性を高め、神経毒性を軽減します。...

このビデオは、マウスでの外傷性脳損傷(TBI)の送達を示しています。頭蓋骨を露出させた後、TBIサイトがマークされます。次に、マウスをTBIデバイスの下に配置します。衝撃は、金属棒を持ち上げ、頭蓋骨と接触しているインパクターに自由に落下させることによってもたらされます。...

このビデオは、ニューロンの成熟と接続性を分析するために、マイクロ流体チップ内で培養されたラット海馬ニューロンの免疫蛍光染色を示しています。...

このビデオは、マウスの一次小脳顆粒ニューロンにおけるニューロン損傷モデルの生成を示しています。興奮性神経伝達物質受容体アゴニストであるNMDAとコアゴニストであるグリシンを使用して、ニューロン損傷を誘発する手順を概説しています。NMDAとグリシンは特定のニューロン受容体に結合し、それらの過剰刺激を引き起こし、細胞内に大量のカルシウム流入を引き起こし、ニューロン細胞の損傷と死につながります。...

このビデオでは、特定のシナプス前タンパク質の分布を定量化するためのマウス脳切片の免疫蛍光染色を実演しています。このプロセスでは、非特異的な部位をブロックし、標的タンパク質と参照マーカーに一次抗体を適用し、続いて二次抗体の標識と核対比染色を行います。リファレンスマーカーは、一貫したベースラインを提供することで正確な定量を保証し、シナプス前タンパク質の分布は共焦点顕微鏡を使用して脳領域全体で分析されます。...

このビデオは、走査型電子顕微鏡(SEM)と透過型電子顕微鏡(TEM)の両方の要素を組み合わせて高解像度の画像を生成する技術である大規模な走査型透過型電子顕微鏡(STEM)を使用して、ゼブラフィッシュの幼生の脳損傷を調査する方法を示しています。サンプルの準備と、脳損傷を特定するための高解像度STEM画像の取得に必要な手順を概説しています。...

このビデオでは、ラットモデルでの手術プロトコルを示し、麻酔の準備から顔面神経損傷の誘導までの手順を詳しく説明しています。このプロトコルは、医学研究における神経再生や外科的技術の研究に役立ちます。...

このビデオは、マウスに頭蓋骨の開放性外傷性脳損傷を誘発する手順を示しています。これは、頭蓋骨の正中線切開を行い、頭蓋骨をドリルで穴を開けて骨皮弁を取り外して脳皮質を露出させ、高圧を加えて外傷を誘発する方法を示しています。次に、創傷を縫合して、その後の実験のためにマウスモデルを準備します。...

このビデオは、自然な脳死を模倣して、バルーンカテーテルを介して制御された頭蓋内圧を増加させることにより、マウスモデルで脳死を誘発する手順を示しています。...

このビデオは、レーザーを使用してラットの運動皮質に正確で制御された脳損傷を生成する手順を示しています。...

このビデオでは、初代神経幹細胞や前駆細胞、ニューロンにおける修飾シアロ糖タンパク質のビオチン化と蛍光標識、および蛍光顕微鏡を用いたそれらの可視化を実演しています。...

この動画では、衝撃管装置を使用して、制御された加圧によってポリマーダイアフラムを破裂させることで衝撃波を発生させています。衝撃波は、固定されたバッグに収められた脳スライスに衝撃を与え、脳スライスに外傷を誘発します。...

このビデオでは、リサイクルされたシナプス小胞の光学分析のために培養ニューロンを準備する手順を示しています。このプロセスには、シナプス小胞タンパク質の蛍光標識と免疫染色が含まれ、ニューロン内のリサイクルされた小胞を標識して視覚化します。...

このビデオは、ヒトが誘導した多能性幹細胞由来ニューロン(hiPSCN)に伸張損傷を誘発するプロセスを示しています。細胞は、シリコンメンブレンが付着した底なしのマルチウェルプレートで採取されます。制御された機械的ストレスが膜に加えられ、細胞骨格の破壊と細胞膜の損傷を誘発し、細胞に伸張損傷の表現型を誘導します。...

このビデオは、麻酔をかけたショウジョウバエに、ガス推進式インパクターを備えたストライクデバイスを使用して、閉頭部外傷を負わせる手順を示しています。この損傷は神経機能に影響を及ぼし、歩行能力を損ないます。...

このビデオは、頭蓋骨の露出と脳病変の作成を含む、マウスの皮質刺し傷の手順を示しています。アストロサイトの神経保護反応である反応性アストログリオーシスを誘導し、中枢神経系の外傷、炎症、修復メカニズムを研究します。...

このビデオでは、側方流体打楽器装置(LFPI)を使用して外傷性脳損傷(TBI)のマウスモデルを生成する方法を示します。マウスに麻酔をかけると、頭蓋骨に窓を作ることで脳が露出します。生理食塩水で満たされたカニューレが窓に取り付けられ、LFPIに接続されます。デバイスの振り子が解放され、外傷性脳損傷を引き起こす圧力パルスが生成されます。...

このビデオは、マウスモデルで外傷性脳損傷(TBI)を誘発する手順を示しています。頭蓋骨が露出した麻酔マウスを採取して頭蓋骨に開口部を作り、その後、衝撃装置を使用して制御された皮質損傷を誘発します。損傷は脳組織に損傷を与え、認知機能や運動協調性に障害を引き起こします。...

このビデオは、ラットで胸部脊髄半肉片を行うための外科的手順を示しています。T8脊髄セグメントを露出させ、片側の神経管を破壊するための半切開を行い、術後ケアを提供する手順を概説しています。...

このビデオは、高出力レーザーを使用してショウジョウバエの幼虫に標的ニューロン損傷を誘発する方法を示しています。幼虫を顕微鏡下に置いた後、低出力レーザーで蛍光ニューロンをスキャンし、レーザー出力を上げて局所的な損傷を誘発します。損傷は、蛍光の増加と損傷部位のクレーターによって確認されます。...

このビデオでは、ショウジョウバエに閉鎖性外傷性脳損傷(TBI)を誘発するためのHigh-Impact...

このビデオは、ショウジョウバエの脳に貫通性外傷性脳損傷が誘発される様子を示しています。新たに出現したハエを選別し、麻酔をかけ、蛍光付き実体顕微鏡で位置決めします。GFPを発現するキノコの本体を特定し、ミヌーティエンピンを挿入して傷害を引き起こす。ハエはさらなる研究のために回復することが許されています。...

出典:Shandra, O. et al., 反復性びまん性外傷性脳損傷のマウスモデルにおける心的外傷後てんかんの誘導。J. Vis. Exp.

このビデオは、側方輸液打楽器損傷(FPI)デバイスを使用したラットの外傷性脳損傷(TBI)の誘発を示しています。この手順では、麻酔をかけたラットの頭蓋骨に穴を開けて硬膜を露出させ、その上にカニューレを取り付けます。その後、ラットはデバイスに接続され、圧力波が発生して脳に到達し、神経細胞の死と血管障害を引き起こすことでTBIを模倣します...

出典: Yang, Z., et.al. マウスにおける反復脳震盪性頭部外傷モデル。J. Vis. Exp.

出典:Logsdon, A. F., et al. Low-intensity Blast Wave Model for Preclinical Assessment of Closed-head Mild Traumatic Brain Injury in Rodents.J. Vis. Exp.

出典:Macheda, T., et.al.マウスの軽度外傷性脳損傷の電磁制御クローズドヘッドモデル。J. Vis. Exp.

出典:Elzat, E. Y. Y., et al., Establishing a Mouse Contusion Spinal Cord Injury Model Based on a Minimally Invasive Technique.J. Vis. Exp.

出典:Lakshman, N., et al.A Neurosphere Assay to Evaluate Endogenus Neural Stem Cell Activation in a Mouse Model of Minimal Spinal Cord Injury. J. Vis. Exp.

出典:Kumar, S., et.al. 脊髄損傷後の褥瘡のマウスモデル。J. Vis. Exp.

このビデオでは、ビオチン化を使用してマウス皮質アストロサイトの標的タンパク質のインターナリゼーションを評価する方法を示し、その後、細胞溶解、ストレプトアビジンベースのタンパク質抽出、変性、およびウェスタンブロット分析を行い、インターナリゼーションの成功を確認する方法を示します。...

このビデオは、パターン化されたタンパク質ゾーン上の海馬ニューロンを使用してタンパク質活性を評価する方法を示しています。ニューロンは、試験タンパク質ゾーンでは反発を示し、制御タンパク質ゾーンでは付着を示し、引力的または反発的なタンパク質活性の影響を強調しています。...

このビデオは、麻酔をかけたラットで高張生理食塩水を強膜上静脈に注入することにより、緑内障誘発を示しています。生理食塩水はシュレム管を介して海綿網に入り、組織の瘢痕化を引き起こし、房水の流出をブロックし、眼圧を上昇させます。圧力の上昇は網膜神経節細胞に損傷を与え、緑内障を引き起こします。...

ホモジナイザーで組織をホモジナイザー化して、脳機能に不可欠なグルタミン酸デカルボキシラーゼ(GAD酵素アイソフォーム)などのタンパク質を放出します。...

このビデオは、麻酔をかけた動物の視神経に外科的にアクセスし、リゾレシチンを正確に送達して限局性脱髄を誘発し、さらなる研究のための神経病理学的条件を作り出す手順を示しています。...

蛍光偽神経伝達物質またはFFNを含むaCSFでスライスをインキュベートします。...

このビデオは、Theiler's Mousephalomyelitis...

このビデオは、てんかん関連の遺伝子変異を持つトランスジェニックマウスで、制御されたチャンバー内で体温を徐々に上昇させることにより、熱誘発性発作を誘発する手順を示しています。このプロトコルは、てんかんの発作メカニズムと潜在的な治療法を研究するために使用されます。...

このビデオは、皮質興奮性錐体ニューロンの光活性化陽イオンチャネルを発現するトランスジェニックマウスの冠状皮質スライスにおける発作イベントの誘導を示しています。スライスを記録室に入れ、記録電極を表在皮質層に挿入します。カリウムチャネルを遮断する発作誘発薬を投与すると、ニューロンは過興奮性になり、自発的な発作イベントを引き起こします。オンデマンドの発作イベントを生成するには、短い光パルスを使用して錐体ニューロンの陽イオンチャネルを活性化し、興奮性神経伝達物質の放出を誘発し、シナプス後ニューロンが短時間発作イベントを生成するように誘導します。...

このビデオでは、GABA-A受容体拮抗薬であるペンチレンテトラゾール(PTZ)注射を用いてマウスでてんかんを誘発する過程を実演しています。PTZの腹腔内反復投与は、塩化物イオンの流入を阻害し、抑制性神経伝達を阻害し、発作を引き起こすニューロンの過興奮を引き起こすことにより、発作の閾値を徐々に低下させます。このプロセスは、慢性てんかんを模倣した自然発作の発散と発症をもたらします。...

出典:Soukupová, M., et al.自由に動くラットの脳波記録中の興奮性アミノ酸の微小透析。J. Vis. Exp.

出典:Schönherr, S., et.al. は、マウス扁桃体におけるグルタミン酸受容体の入力特異的配置を調べるために、光遺伝学的免疫標識と凍結骨折レプリカ免疫標識を組み合わせました。J. Vis.

このビデオでは、膠芽腫とミクログリアの細胞をポリマーマトリックス溶液と混合し、ゲルが形成される多孔質チャンバーインサートに移して細胞を埋め込みます。ミクログリアは、多孔質インサートを介して膠芽腫細胞の移動を刺激し、腫瘍細胞の周囲の組織への浸潤を模倣し、細胞を固定してさらなる分析の準備をします。...

このビデオでは、蛍光標識されたミトコンドリアを遠心分離によって膠芽腫幹細胞(GSC)に移す方法が示されています。ドナーミトコンドリアの良好な取り込みと機能的統合は、共焦点顕微鏡を使用して蛍光を検出することによって確認されます。...

出典:Guyon, J., et al.膠芽腫の3Dスフェロイドモデル. J. Vis. Exp.

出典:Lim, M., et al.がん細胞の内部頸動脈注射による脳転移のモデリング。J. Vis.

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出典:Mudduluru, G., et.al. インピーダンスに基づくがん細胞の移動と浸潤のリアルタイム測定。J. Vis. Exp.

出典:Bolcaen, J., et.al.、マイクロ照射器を使用した神経膠芽腫ラットモデルのPETおよびMRIガイド照射。 J. Vis. Exp.

出典:Mendez, F. M. et al., Native Chromatin Immunoprecipitation Using Murine Brain Tumor Neurospheres. J. Vis. Exp.

出典:Núñez, F. J., et al. Evaluation of Biomarkers in Gliomas by Immunohistochemistry on Paraffin-Embedded 3D Glioma Neurosphere Cultures. J. Vis. Exp.