アミロイドβペプチド注入によるアルツハイマー病ラットモデルの確立

要約

出典:Xiaoguang, W., et al.複合アミロイドベータタンパク質の脳室内注射によるラット動物モデルにおけるアルツハイマー病の貴重な模倣の確立。J. Vis. Exp.(2018年)。

このビデオは、アミロイドベータペプチド、塩化アルミニウム、および海馬領域での有毒なアミロイドプラーク形成をまとめて助ける神経炎症性成長因子を注入する手順を示しています。これは、アルツハイマー病の特徴であるラットの記憶障害を引き起こします。

プロトコル

動物モデルを含むすべての手順は、地元の施設動物管理委員会とJoVE獣医審査委員会によって審査されています。

1. 外科的処置

>注:20匹の雄Sprague-Dawleyラットに複合アミロイドβタンパク質(Aβ)を側脳室と視床前核にマイクロインジェクションし、複合Aβ治療群として指定しました。別の20匹のラットが同じ手術を受けましたが、0.1%ジメチルスルホキシド(DMSO)生理食塩水マイクロ注射を受け、偽手術群に指定されました。

1. ラットを吸入により100%イソフルランで麻酔し、脳定位固定装置に拘束します。
2. 手術用ハサミで頭の頂点の毛皮を剃り、ヨードフォアで消毒します。次に、頭に使い捨ての手術用タオルを覆います。
3. 外科的ビスツアーとハサミで縦縦の頭蓋骨の中央に沿って頭の皮膚を切開します。
4. 皮下組織と筋膜を分離し、頭蓋骨の頭蓋骨を滅菌乾燥綿で拭いて出血を止め、マーカーペンでブレグマに印を付けます。
5. Bregmaを起点としてRat Brain Stereotaxic Mapを参照し、組換えヒト形質転換成長因子-β1(RHTGF-β1)を注入するための前背視床核(ad)(後部(P):束縛部から2.0mm、側方(L):正中線から1.4mm)の3点を印をつけ、1本....

材料

この記事で使用された材料の一覧

名前	会社	カタログ番号	コメント
Sprague-Dawleyラット	Beijing Vital River Laboratory Animal Technology Co., Ltd, 中国	SCXK(京) 2012-0001	300〜350グラム
可動式小動物麻酔	RWD Life Science Co., Ltd. 中国	R580
脳定位固定装置	RWD Life Science Co., Ltd. 中国	68001
フレキシブル骨ドリル	Shanghai Soft Long Technology Development Co., Ltd. 中国	BW-sD908
透過型電子顕微鏡	Japan Co., Ltd. 日本	JEM-1400
2チャンネルマイクロインジェクションポンプ	RWD Life Science Co., Ltd. 中国	RWD202
EMミクロトーム	Hitachi Co., Ltd. 中国	H-7650
ダミーカニューレ	RWD Life Science Co., Ltd. 中国	62001	0.D.0.64×I.D.0.0.45mm/M3.5 http://www.rwdls.com/English/Product/3985102014.html
ガイドカニューレ	RWD Life Science Co., Ltd. 中国	62101	0.D.0.40mm/M3.5
内部カニューレ	RWD Life Science Co., Ltd. 中国	62201	0.D.0.41×I.D.0.25mm/M3.5
ナットを締めます	RWD Life Science Co., Ltd. 中国	62501	0.D.5.5mm/L7.5mm/M3.5
固定ネジ	RWD Life Science Co., Ltd. 中国	62514	M1.2×L2.0mm(100BAO)
ドライバー	RWD Life Science Co., Ltd. 中国	62999	45 * 1ミリメートル
PEチューブ	RWD Life Science Co., Ltd. 中国	62302
アミロイドβ 25-35	シグマ・アルドリッチ社(米国	SCP0002-5MG
組換えヒトトランスフォーミング成長因子-β1	PeproTech Inc. 米国	100-21
三塩化アルミニウム	Tianjin Kemiou Chemical Reagent Co., Ltd. 中国	3011080
リン酸亜鉛歯科用セメント	工場上海医療器械Co.、株式会社の歯科材料中国	201311

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