慢性ストレスばく露によるマウスのうつ病の誘発と評価

要約

出典:Yan, Z., et al. Evaluating the Anti-depression Effect of Xiaoyaosan on Chronically-stressed mice.J. Vis. Exp. (2019).

このビデオは、慢性ストレス誘発性うつ病のマウスモデルを確立し、抑うつ行動を評価するプロセスを示しています。さまざまなストレッサーが慢性的に作用すると、コルチコステロンが放出され、ニューロンの過剰興奮と最終的にはニューロンの死につながり、マウスにうつ病のような症状が現れます。

プロトコル

動物モデルを含むすべての手順は、地元の施設動物管理委員会とJoVE獣医審査委員会によって審査されています。

1.実験手順のためのマウスの準備

注:実験手順では、12週齢の健康な雄C57BL/6Jマウスを選択し、各マウスの体重は18〜22gでした。

1. 典型的な特定の病原体を含まない(SPF)実験動物室(22 ± 1°C、 12 時間/12 時間の暗い/明るいサイクル、相対湿度: 30–40%) CUMS 手順の 1 週間前。
2. すべてのマウスを体重に応じてランダムに対照群とモデル群に分けます。各グループには15匹のマウスがいます。
3. 実験を開始する前に、マーキングペンを使用して、各グループのマウスの尾に番号を付けます。

2. マウスにおけるうつ病の誘発

注: うつ病を誘発するために、モデル群と2つの治療群のマウスは、21日間、予測不可能な軽度のストレス(CUMS)を受けました。計画は実際の状況に応じて変更できますが、同じストレッサーを連続して使用できないという原則に従う必要があります。

1. マウスを次の7つのストレッサーのいずれか2つに毎日21日間連続してさらします。私たちのモデリング計画は次のように設計されています:
   1. 月曜日に、マウスを食物剥奪(各ケージの飼料を24時間、午前8:00から午前8:00まで空にする)と水分剥奪(各ケージの飲料ボトルを24時間、午前8:00から午前8:00まで)にさらします。
   2. 火曜日に、マウスを拘束ストレス(午前8時から午前11時まで3時間、小さなプラスチックの浴槽にマウスを拘束する)と空のケージ(各ケージのパッドを11時間、午前8時から午後19時まで)にさらします。
   3. 水曜日には、マウスを濡れた汚れたケージ(各ケージに水を注ぎ、午前8時から午前8時まで24時間濡らしておく)と混雑したケージ(1つのケージに5匹のマウスを午前8時から午前8時まで24時間入れる)にさらします。
   4. 木曜日に、マウスを拘束ストレスと氷のように冷たい水泳にさらします(各マウスを氷水のある透明なガラスの水槽で5分間泳がせます)。
   5. 金曜日には、マウスを濡れた汚れたケージと食物の剥奪にさらします。
   6. 土曜日には、マウスを拘束ストレスと混雑したケージにさらします。
   7. 日曜日には、ネズミを空のケージにさらし、氷のように冷たい水泳をします。
2. モデリング終了(21日目)まで、毎週コートの状態と体重を記録します。コート状態の合計スコアを、頭、首、背側コート、腹側コート、前足、尾、後足の 7 つの異なる体の部分からのスコアの合計として計算します。スコア 1 は手入れの行き届いたコートを示し、スコア 0 はボサボサのコートを示します。

材料

この記事で使用された材料の一覧

名前	会社	カタログ番号	コメント
C57BL/6j マウス	Beijing Vital River of the Charles River Company	SCXK 2011-0004	健康な雄 12 週齢の C57BL/6J マウス 60 匹を Charles River Company の Beijing Vital River から購入しました。
マウスケージ	スタイリングバイオテクノロジー	34853016	318×202×135 mm
蒸留水			水は実験を通して使用しました。
ACS-2EAS 電子天秤	Beijing Hengzhongheng Electronic Technology Co., Ltd.		さまざまな段階でマウスの常用を量るために使用されました。
SPSS Statistics 21.0ソフトウェア	IBM		SPSS 21.0ソフトウェアを使用してデータを分析しました。一般データには一元配置分散分析またはノンパラメトリック検定を使用し、分散の均一性検定を、グループ間の比較にはLSD法を採用しました。
Graphpad Prism 6.0 Software	Graphpad Software,Inc.USA -		Graphpad Prism 6.0 ソフトウェアを使用して統計グラフを描画しました。