長時間の大音量音ばく露によるマウスの難聴誘発

要約

出典:Lee, D. et.al., マウスの騒音性難聴の実験条件の変更と、聴覚機能と外有毛細胞の損傷の評価。J. Vis. Exp. (2023)

このビデオは、マウスの騒音性難聴の手順を示しています。大音量の音は、内耳の有毛細胞に損傷を与え、聴覚経路を乱し、聴覚障害を引き起こします。

プロトコル

動物モデルを含むすべての手順は、地元の施設動物管理委員会とJoVE獣医審査委員会によって審査されています。

1。マウスにおける騒音性難聴(NIHL)の誘発

1. 実験用マウス用のケージを準備します
   1. そのためには、14cm×17cm×24cmの寸法のラットトラップケージを使用します。段ボールのプラスチック板を4枚適当な大きさにカットし、ケージ(13cm×23cm、13cm×16cm)に収まるようにします。
   2. メッシュグリッドで足を切られるのを防ぐために、2つのピースをそれぞれ底面と裏面に置きます。他の2つのピースを互いに垂直に連動させて配置し、ケージ内のスペースを4分の1に分割します。
2. この調査は防音ボックスで実施してください。ケージの8.5cm前にスピーカーを置き、スピーカーとケージの両方を防音ボックスに入れます。
3. CLIOアプリケーションソフトウェアを開きます。
4. カーソルをスピーカーのアイコンに移動し、TwoSin をクリックします。周波数1の値を1000 Hzに、周波数2を6000 Hzに入力して変更し、OK をクリックしてサウンドの再生を開始します。
5. [Leq]タブで、[デシベル電圧(dBV)]を[デシベル音圧レベル(dBSPL)]に変更します。ソフトウェアインターフェースで時間を設定したら、緑色の三角形のボタンをクリックして音を再生します。
6. スピーカーの前にマイクを8.5cmの距離で配置して、ノイズレベルを調整します(図1)。ノイズレベルを125dB SPL-Aに調整し、ノイズレベルが十分に安定していることを確認するために3分以上継続的に監視します。発電機、アナライザー、アンプを使用して、ノイズを作成および制御します。(図2)
   注: この手順は、オペレーターの聴覚障害を避けるために、防音ボックス内で行ってください。
7. 4匹の雄C57BL/6Jマウスをケージに入れます(各四半期に1匹ずつ)。ノイズ曝露中に各クォーターにマウスをランダムに割り当てます。ケージの上部にマイクを配置して、ノイズ曝露中のノイズレベルを監視します(図3)。
   注:このステップは、オペレーターの聴覚への損傷を避けるために、防音ボックスで行ってください。
8. マウスを1 kHzおよび6 kHzの周波数で、1日6時間、5日間連続してノイズにさらします。

結果

図 1: キャリブレーションからの電圧計算。特定の周波数ごとに、選択した電圧(横軸)の値が検量線に入力され、対応するサウンドレベル(縦軸)が得られます。

材料

この記事で使用された材料の一覧

名前	会社	カタログ番号	コメント
1/4インチ CCP 自由音場型標準マイクセット	GRAS	428158	ノイズ暴露用
ネズミ捕獲ケージ			14 cm x 17 cm x 24cm
サウンドアンプ、 MT-1000	ユニカ		騒音暴露用
音響発生器・分析器・その他、FW-02	CLIO	620300719	騒音暴露用
防音室	IEA Electro-Acoustic Technology		用)騒音曝露とABR
スピーカー	IEA Electro-Acoustic Technology		騒音曝露用