マウスの聴覚脳幹反応の測定

要約

出典:Lee, D., et.alです。マウスの騒音性難聴の実験条件の変更と、聴覚機能と外有毛細胞の損傷の評価。J. Vis. Exp.(2023)

このビデオでは、マウスの聴覚脳幹反応(ABR)の測定を示しています。電極は、麻酔をかけたマウスの頭、耳の後ろ、および尾の近くに配置されます。さまざまな強度の音響刺激が供給され、生成された電気信号は波形として記録されます。

プロトコル

動物モデルを含むすべての手順は、地元の施設動物管理委員会とJoVE獣医審査委員会によって審査されています。

1.聴覚脳幹反応(ABR)に基づく聴力閾値の評価

1. 小動物用に特別に設計された市販のABR検査システムを使用してください。
2. 全身麻酔のために、チレタミンとゾラゼパム(40 mg / kg)およびキシラジン(9.3 mg / kg)の混合物をマウスに腹腔内注射します。.
   注: ABRの評価には~2時間かかります。マウスが麻酔下にある間は、加熱パッドを介して熱サポートを提供し、乾燥を防ぐために目の軟膏を塗布してください。
3. 全身麻酔下でマウスのABRを測定します。皮下針電極(12 mm)を頂点、左耳の耳介の後ろ、尾の近くに戻して、聴力閾値を測定します。
4. 動物の左耳から1cm離れた場所に設置されたスピーカーを使用して、音響刺激を提示します。
5. オシロスコープを使用して音響刺激を制御します。刺激にはSine Waveを、ウィンドウスケールには10 kを選択します。Frequency ノブを回して、音響刺激の目的の周波数を取得します。
6. 関数発生器の振幅またはAMLP ノブを回して、刺激強度を調整します。AMLP ノブをキャリブレーションから計算された適切な電圧に回して、目的の刺激強度を取得します。
7. 10 dB 音圧レベラー SPL から 100 dB SPL までの一連の刺激強度で ABR 測定値を 10 dB ステップサイズで収集します。
   注: 防音ボックスで聴力の閾値を測定します。収集された信号に識別可能な波Vを生じさせる可能性のある最小刺激強度レベルは、ABR閾値 (図1)であると仮定されました。ABR評価後、麻酔から回復するまで(~1時間)動物を監視します。

結果

図1:聴力のABR測定。代表的な 12 kHz での ABR の結果は、13 日目 (ノイズ曝露の 1 週間後) に収集されました。各強度のWave Vは、識別可能な場合はラベル付けされます。

材料

この記事で使用された材料の一覧

名前	会社	カタログ番号	コメント
1/4インチ CCP 自由音場標準マイクセット	GRAS	428158	ノイズ暴露用
アンプ入力モジュール, AMI100D	BIOPAC		聴覚脳幹反応用
バイオアンプ、BIO100C	BIOPAC		聴覚脳幹反応用
誘発反応増幅器、 ERS100C	BIOPAC		聴覚脳幹応答用
高性能データ収集システム、MP160	BIOPAC		聴覚脳幹応答用
モジュラー延長ケーブル、 MEC110C	BIOPAC		聴性脳幹反応用
針電極、ユニポーラ12 mmTp、EL452	BIOPAC		聴覚脳幹反応用
ROMPUN- キシラジン注射、 ソリューション	Bayer HealthCare, LLC
サウンドアンプ、MT-1000	ユニカ		ノイズ曝露用
サウンドジェネレーター/アナライザー/その他 FW-02	CLIO	620300719	騒音暴露用用
防音室	IEA Electro-Acoustic Technology		騒音暴露およびABR用
スピーカー	IEA Electro-Acoustic Technology		用騒音曝露
刺激装置モジュール、STM100C	BIOPAC		聴覚脳幹反応用
チューブフォンセット、OUT101	BIOPAC		聴覚脳幹反応用
Zoletil	Virbac