このビデオでは、ラットの脳組織サンプルの疎水性組織を透明化する方法を示します。サンプルをメタノール中で順次脱水し、ジクロロメタンとメタノールの混合物で処理して脂質と色素を溶解し、ジベンジルエーテルに移して完全な組織透明化を行うため、薄い切片化のない詳細なイメージングが可能になります。
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方法論記事
ラット脳組織試料の疎水性組織透明化法
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2025年4月28日
この記事について
要約
プロトコル
動物サンプルを含むすべての手順は、適切な動物倫理審査委員会によって審査され、承認されています。
1. 組織清澄化
- サンプルを20%メタノール/80%脱イオン水溶液で室温(RT)で1時間インキュベートします。
- サンプルを 40% メタノール溶液 / 60% 脱イオン水溶液で RT で 1 時間インキュベートします。
- サンプルを 60% メタノール/ 40% 脱イオン水溶液で RT で 1 時間インキュベートします。
- サンプルを 80% メタノール/ 20% 脱イオン水溶液で RT で 1 時間インキュベートします。
- サンプルを 100% メタノール溶液で RT で 1 時間インキュベートします。
- 新鮮な100%メタノール中でRTで一晩インキュベートします。
- 66%ジクロロメタン(DCM)/33%メタノールで3時間、振とうしながらRTでインキュベートします。
- ジベンジルエーテル(DBE)で振とうせずにインキュベートします。サンプルは透明になるまでDBEに放置し、イメージングまでDBEに保存します。
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材料
