蛍光顕微鏡を用いた硬膜細胞の感覚ニューロンの起源の調査

要約

出典:Wang, J., 他.Visualizing the Calcitonin Gene-Related Peptide Immunoreactive Innervation of the Rat Cranial Dura Mater with Immunofluorescence and Neural Tracing. J. Vis. Exp. (2021).

このビデオは、蛍光顕微鏡を使用して硬膜の感覚ニューロンの起源を追跡する方法を示しています。逆行性トレーサーを麻酔ラットの露出した硬膜に導入します。トレーサーは感覚ニューロン軸索に取り込まれ、三叉神経節と頸部後根神経節内の細胞体に逆行性に移動します。次に、神経節を切片化し、細胞体内のトレーサーと神経ペプチドを標識する抗体で染色し、蛍光顕微鏡を使用して分析して、感覚ニューロンの神経節の起源を確認します。

プロトコル

動物モデルを含むすべての手順は、地元の施設動物管理委員会とJoVE獣医によってレビューされています。レビューボード。

結果

材料

この記事で使用された材料の一覧

名前	会社	カタログ番号	コメント
Alexa Fluor 488 ロバ抗マウスIgG (H+L)	Invitrogen by Thermo Fisher Scientific	A21202	光から保護します。RRID: AB_141607
Brain stereotaxis instrument	Narishige	SR-50
CellSens Dimension	Olympus	バージョン1.1	蛍光顕微鏡のソフトウェア
フルオロゴールド(FG)	Fluorochrome	52-9400	Protect from light
Fluorescent imaging system	Olympus	BX53
凍結ミクロトーム	Thermo	Microm InternationalGmbH
Micro Drill	Saeyang Microtech	Marathon-N7
マウス反CGRP	Abcam	ab81887	RRID: AB_1658411
Normal donkey serum	Jackson ImmunoResearch	017-000-121
Phalloidin568	Molecular Probes	A12380	Protect from light
Photoshopとイラスト	Adobe	CS6	写真編集ソフト
Rabbit anti- Fluorogold	Abcam	ab153	RRID: AB_90738
Sprague Dawley	国立食品医薬品局	SCXK (JING) 2014-0013
Superfrost plus microscope slides	Thermo	#4951PLUS-001<

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