有髄マウス軸索におけるニューロフィラメント輸送の蛍光光活性化イメージング

要約

出典:Boyer, N. P. et.al., 切除マウス脛骨神経におけるニューロフィラメント輸送のイメージングと分析. J. Vis. Exp. (2020)

このビデオは、分析するための蛍光光活性化法を示しています。末梢神経の有髄軸索におけるニューロフィラメント輸送。光活性化された緑色の蛍光色素でタグ付けされたニューロフィラメントを追跡することにより、この技術は神経変性疾患における軸索輸送に関する洞察を提供します。

プロトコル

動物モデルを含むすべての手順は、地元の施設動物管理委員会とJoVE獣医審査委員会によって審査されています。

結果

材料

この記事で使用された材料の一覧

名前	会社	カタログ番号	コメント
14 x 22 長方形ガスケット 0.1mm	Bioptechs	1907-1422-100	Inner gasket
2-deoxy-D-glucose	Sigma	D6134
30mm 穴付き丸型ガスケット	Bioptechs	1907-08-750	Outer gasket
35 x 10mm 皿	Thermo Fisher	153066	Dissection dishes
40mm丸いカバースリップ	Bioptechs	40-1313-0319
60mL syringe - ルアーロックチップ	BD	309653
Andor Revolution WD 回転ディスク共焦点システム	Andor		パーフェクトフォーカスとFRAPPAシステムを装備
塩化カルシウム	Fisher	C79
Coverslips	Fisher	12-541-B	フルオレセインスライド用
D-(+)-glucose solution	Sigma	G8769
ピンの解剖	ファインサイエンスツール	26001-70
解剖鉗子	ファインサイエンスツール	11251-30	先端が細かい鉗子
解剖顕微鏡	Zeiss	47 50 03
ワックスでパンを解剖	ギンズバーグ・サイエンティフィック	568859
解剖ハサミ	ファインサイエンスツール	14061-09	初期解剖ハサミ
FCS2 灌流チャンバー	Bioptechs	60319-02-03
フルオレセインナトリウム	Fluka	46960
インラインソリューションヒーター	ワーナーインストゥルメンツ	SH27-B
椎弓切除鉗子	ファインサイエンスツール	11223-20	初期解剖鉗子
Magnesium sulfate	Sigma-Aldrich	M7506<
Microaqueductスライド	Bioptechs	130119-5<
顕微鏡スライド	Fisher	12-544-3	フルオレセインスライドの場合
顕微鏡ステージ挿入	Applied Scientific Instrumentation	I-3017
Objective ヒーターシステム	Okolab		Oko Touch with objective collar
Objective oil - type A	ニコン	discontinued
Plan Apo VC 100x 1.40 NA objective	Nikon	MRD01901
塩化カリウム	Fisher	P217
リン酸カリウム	Sigma-Aldrich	P0662
重炭酸ナトリウム	Sigma-Aldrich	S6297
塩化ナトリウム	Sigma-Aldrich	S7653
シリンジポンプ	Sage Instruments	Model 355
チューブアダプター - メス	Small Parts Inc.	1005109
チューブアダプター - オス	Small Parts Inc.	1005012
Tygon チューブ	Bioptechs		1/16" ID, 1/32" 壁の厚さ
Vannas spring scissors	ファインサイエンスツール	15018-10	fine はさみ

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