マウスの子犬の神経形態をイメージングするための2光子顕微鏡法

要約

出典: Mizuno, H., et al. In Vivo 新生児マウスの皮質ニューロンの2光子イメージング J. Vis. Exp. (2018)

このビデオでは、麻酔をかけたトランスジェニックマウスの子犬の脳内のニューロンを画像化するために使用されている2光子顕微鏡を紹介しています。2光子レーザーは、高い空間分解能と最小限の光散乱でより深いイメージングを可能にし、樹状突起を含むニューロンの形態を詳細に捉えることができます。

プロトコル

動物モデルを含むすべての手順は、地元の施設動物管理委員会とJoVE獣医によってレビューされています。<span style='font-family:Arial,sans-serif;font-size:12pt;font-style:normal;font-variant:normal;text-decoration:none;vertical-align:baseline;white-space:pre-wrap;'>

結果

図1:手術、頭蓋窓の準備、チタンバーの取り付け。(A)このパネルは、頭蓋骨を覆っている皮膚の除去を示しています。(B)このパネルは、皮膚と頭蓋骨の間の隙間の固定を示しています。結像部.......

材料

この記事で使用された材料の一覧

名前	会社	カタログ番号	コメント
pK031.TRE-Cre	著者	-	から利用可能理研BRCとAddgene
pK029.CAG-loxP-STOP-loxP-RFP-ires-tTA-WPRE	著者	-	から利用可能理研BRCとAddgene
pK273.CAG-loxP-STOP-loxP-CyRFP-ires-tTA-WPRE	著者	-	から利用可能authors
イソフルラン	Wako	099-06571
410 麻酔ユニット(イソフルランガスマシン)	Univentor	8323101
Vetbond (ティッシュ接着剤)	3M	084-1469SB
MμltiFlex Round (読み込みのヒント)	Sorenson	13810
Gelfoam (ゼラチンスポンジ)	Pfizer	09-0353-01
Agarose	Sigma	A9793	低融点
丸い形のカバースリップ	Matsunami	-	カスタムメイド
Unifast 2 (dental cement)	GC	-
Titanium bar	著者	-	カスタムメイド（図1Gを参照）<
Zoetis	-	injectable
2-photon microscope	Zeiss	LSM7MP
チタンサファイアレーザー	Spertra-Physics	マイタイ eHPDS
チタンプレート	Authors	-	カスタムメイド (図2A参照)
IMARIS, FilamentTracer, MeasurementPro	BITPLANE
Goniometer stage	Thorlabs	GN2/M

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