ラット脳血流と組織構造のマルチスペクトル拡散反射イメージング

要約

出典:Nishidate, I., et al.マルチスペクトル拡散反射イメージングを用いた、In vivoラット脳の脳血行動態と光散乱特性の同時評価。J. Vis. Exp. (2017)

このビデオでは、麻酔をかけたラットの脳血流、酸素レベル、組織構造の変化を分析するためのマルチスペクトル拡散反射イメージングの使用を実演し、さまざまな条件下での脳の血行動態と形態に関する洞察を提供します。

プロトコル

動物モデルを含むすべての手順は、地元の施設動物管理委員会とJoVE獣医審査委員会によって審査されています。

1. サンプル画像の取得
   注：9波長でばく露されたラット脳の拡散反射光強度の画像は、同じ取得条件でパソコンのハードドライブに撮影され、保存されます。
   1. ラットをステージにそっと置き、カメラがラットの脳の表面に焦点を合わせることができるように、ステージレベルをゆっくりと調整します。
   2. ファイルメニューから「保存」コマンドを選択して、画像をファイルに保存します。
   3. フィルターホイールを回転させて、フィルターの位置を変更します。
   4. 上記のプロセスに従って、他の波長で画像を保存します。ファイル名は、サンプルと波長(R500、R520、R540、R760など)を識別する必要があります。
2. 暗い画像の取得
   注:CCD(電荷結合デバイス)カメラは、電気信号に応答して光強度を生成できます。ただし、電気回路や検出器のノイズにより、検出器に光が入らなくても、わずかな出力があります。これは暗電流ノイズと呼ばれます。光のスペクトル強度を正確に測定するには、暗い電流成分を暗い画像として記録し、測定された信号から差し引く必要があります。暗い画像は、光路を遮った状態で撮影した画像です。
   1. ハロゲンランプの光源を消してください。
   2. シールドプレートを使用して、CCDカメラシステムへの光路をブロックします。
   3. ファイルメニューから「保存」コマンドを選択して、画像をファイルに保存します。ファイル名はサンプルを識別する必要があります(例:Dark)。

材料

この記事で使用された材料の一覧

名前	会社	カタログ番号	コメント
150-W ハロゲンランプ光源	時計製作所, 東京, 日本	LA-150SAE
光ガイド	林時計製作所, 株式会社, 東京, 日本	LGC1-5L1000
収集レンズ	林時計製作所, 東京, 日本	SH-F16
干渉フィルター l@500nm	エドモンド・オプティクス・ジャパン株式会社 (東京)	#65088
干渉フィルター l@520nm	エドモンド・オプティクス・ジャパン株式会社 (東京)	#65093
干渉フィルター l@540nm	エドモンド・オプティクス・ジャパン株式会社 (東京)	#65096
干渉フィルター l@560nm	エドモンド・オプティクス・ジャパン (東京)	#67766
干渉フィルター l@570nm	エドモンド・オプティクス・ジャパン株式会社(東京)	#67767
干渉フィルター l@580nm	エドモンド・オプティクス・ジャパン株式会社(東京)	#65646
干渉フィルター l@600nm	エドモンド・オプティクス・ジャパン株式会社(東京)	#65102
干渉フィルター l@730nm	エドモンド・オプティクス・ジャパン(株)(東京)	#65115
干渉フィルター l@760nm	エドモンド・オプティクス・ジャパン(株)(東京)	#67777
電動フィルターホイール	Andover Corporation, NH, USA	FW-MOT-12.5
16-bit cooled CCD camera	Bitran, Japan	BS-40
ビデオズームレンズ	Edmund Optics Japan Ltd, Tokyo, Japan	VZMTM300i
Spectralon white standard with 99% diffuse reflectance	Labsphere Incorporated, North Sutton, NH, USA	SRS-99-020

林