マウスにおける反復低酸素プレコンディショニングに対するニューロンの適応

要約

出典: Poinsatte, K., et al., マウスにおける反復低酸素プレコンディショニングおよび一過性中大脳動脈閉塞後の神経血管保護の定量化。J. Vis. 経験。 (2015年)

このビデオは、虚血性脳卒中を誘発する前にマウスを制御された低酸素サイクルにさらすことによる反復低酸素プレコンディショニング(RHP)の方法を示しています。この実験では、血液脳関門の安定性、ニューロンの適応、および炎症に対するその効果を評価します。

プロトコル

動物モデルを含むすべての手順は、地元の施設動物管理委員会とJoVE獣医審査委員会によって審査されています。

1.反復低酸素プレコンディショニング

1. ガスレギュレーターに4つの流量計をカスタム設計し、ポリ塩化ビニル(PVC)チューブを備えた標準の15 L誘導チャンバーに取り付けて、酸素(O₂)タンクからの圧縮ガスが入口ポートを介してチャンバーに流れ込むようにします。
2. マウスを2つのグループに分けます:8%および11%のO₂への曝露を受ける反復低酸素プレコンディショニング(RHP)グループと、21%O₂(室内空気)への曝露を同時に受ける対照グループ。
3. 各ケージの上部フィルター蓋を取り外し、ケージを食品と水のボトルをそのままにして、それぞれの_O2タンクに接続されたチャンバーに置きます。チャンバーの蓋を閉じて固定します。
   1. タンクのメインガスバルブを開き、暴露の最初の5分間は、各誘導チャンバーの初期流量を毎分2 L(LPM)に設定します。残りの露光の間、流量を1LPMに減らします。
   2. 暴露の最後に、流量を0LPMに減らし、タンクのガスバルブを閉じます。
   3. チャンバーの蓋を開き、各ケージのフィルター上蓋を元に戻します。次の低酸素曝露まで、ケージを標準ハウジングに入れます。
4. 使用後は、各誘導チャンバーにNPD(ステリス)または同等の消毒剤/消臭剤をスプレーしてください。
5. 21%マウスとRHPマウスの両方を2週間にわたって同じ時間に曝露します。

材料

この記事で使用された材料の一覧

名前	会社	カタログ番号	コメント
流量計、レギュレーター	VetEquip, Inc	専門注文	4 つの流量計が 6.0 mm のフレキシブル PVC チューブに取り付けられており、プラスチック製のメス コネクタで各誘導チャンバーの入口ポートに接続されています。これらの流量計は、6.5インチ x 1インチ x 1インチの金属棒にボルトで固定されています。この金属棒は、DISS出口付きのMI-246-P圧力計にボルトで固定されています。この圧力計および流量計装置は、レンチを使用して新しいガスボンベに取り付けることができます。
21% O₂ タンク	AirGas	OX USP200
11% O₂ タンク	AirGas	特殊注文
8% O₂ タンク	AirGas	特殊注文
15 L 誘導チャンバー	VetEquip	941454