イヌモデルにおける神経再生に対するエタノール誘発性交感神経節ブロックの効果

要約

出典:塩野谷 Y.、他。人工神経を用いたイヌ下歯槽神経再生促進のためのエタノール誘発頚部交感神経節ブロックの応用J. Vis. 経験。(2018年)

このビデオでは、生分解性足場とエタノール誘発性交感神経遮断を使用した下歯槽神経 (IAN) 再生のための犬歯モデルを示します。この手順には、頸部交感神経節に外科的にアクセスし、血管拡張を誘発するためにエタノールを注射することが含まれます。その結果、損傷部位への血流の増加は、シュワン細胞誘導軸索再生と組み合わされて、神経再生を促進します。

プロトコル

動物モデルを含むすべての手順は、地元の施設動物管理委員会とJoVE獣医審査委員会によって審査されています。

1. 麻酔と皮膚の準備

:

1. 5 mg/kg の塩酸ケタミンと 1 mg/kg キシラジンの混合物で筋肉内注射により犬を麻酔します。
2. 直径7.5mm、長さ25cmの気管チューブで挿管します。
3. 犬を右側の位置に置きます。酸素を含む 3.2% セボフルラン (1.0 L/分) で全身麻酔を維持します。
4. 温熱パッドを使用して体温を37°Cに保ちます。
5. 角膜の擦り傷を避けるために、目の前面に眼科用ジェルを塗布します。
6. 外科用バリカンを使用して、手術野(左側の胸の領域)を慎重に剃ります。手術部位にかなりの量のアルコール溶液をスプレーします。少なくとも 15 秒待ちます。塗布を3回繰り返します。
7. 手術中の心拍数と酸素飽和度を記録します。

2. ポリグリコール酸コラーゲン(PGA-C)チューブを用いた下歯槽神経再建術:再建のみモデルの開発

局

1. 所麻酔薬および鎮痛薬として、27G針を使用して左下顎歯肉に3mLの1%リドカインを注入します。
2. 左下顎歯肉に5番メスの刃で15cmの横切開を行い、動物の下顎骨を露出させます。
3. 圧電超音波振動を使用して、下顎骨の近位面を後顎孔を通して3cm×8mmの長方形に研磨します。
   注:振動周波数は28〜32kHzでした。
4. 下顎骨プレートの前頭部分(寸法、3 cm × 8 mm)を取り除き、左のIANを露出させます(図1A)。
   注:再建部位は、第一大臼歯の根尖に対応し
、
5. メスでIANを横断し、10 mmセグメントを除去します。
6. 切断された神経の近位および遠位の断端を神経管に2mmの深さまで挿入します。
7. 8-0 を使用ナイロン縫合糸と8倍倍の手術用顕微鏡を使用して、チューブを近位および遠位神経末端に縫合します(図1B)。
8. 骨板を下顎骨の元の位置に戻します。
9. 4-0ナイロン縫合糸で傷を閉じます。
10. 手術の翌日、下顎骨プレートが適切な位置にあることを確認します。
    1. 4.10.1 麻酔下で顔面骨のコンピューター断層撮影 (CT) イメージングを実行します。CTパラメータを次のように設定します:120 kVp、200 mAs、0.5 mm / s、0.5 mmのスライス厚さ。
       1. 5 mg/kg の塩酸ケタミンと 1 mg/kg キシラジンの混合物を使用して麻酔を投与します (図 2)。
11. 抗生物質としてアンピシリン(100mg/日)、鎮痛剤としてアセトアミノフェン(100mg/日)を手術後1週間投与します。

3. エタノール誘発性頸部交感神経節ブロック (CSGB): 再構成 + CSGB モデルの開発

1. セクション 2 で説明されているように IAN 再建を実行し、回復に 1 週間かかります。
2. 酸素(4 L / min)および空気中(6 L / min)中の1.5%セボフルランで動物を麻酔します。セクション3で説明されているように、目的の手術野を剃ってきれいにします。
3. 左側の胸部領域に線を引いて、外科用皮膚マーカーで切開線をマークします(図3、切開線の長さは20 cmです)。
4. 局所麻酔薬および鎮痛剤として、21 G 針を使用して 5 mL の 1% リドカインを左側の胸部領域に注射します。
5. 10番メスの刃で左側の胸の皮膚を切開する。
6. 脂肪層を電動メスで切開し、筋膜を露出させます。
7. 腹前鋸筋と斜角筋を露出させます。
8. 腹鋸筋と斜角筋を腹側から背側に持ち上げて、2番目と3番目の肋骨を露出させます(図4)。
9. 2番目と3番目の肋間腔で左側開胸術を行い、左頸部交感神経節を露出させます(図5)。
直接
10. 可視化下で30 G針を使用して、0.2 mLの99.5%エタノールを頸部交感神経節に注入します(図6)。
中断
11. された1-0吸収性ステッチで肋間腔を閉じます。
12. 中断された3-0ナイロンステッチで皮膚を閉じます。
13. 抗生物質としてアンピシリン(100mg/日)、鎮痛剤としてアセトアミノフェン(100mg/日)を手術後1週間投与します。
14. CSGB の 1 週間後に、赤外線サーモグラフィーで顔の皮膚温度を測定し、CSGB を確認します。

結果

図1:左下歯槽神経(IAN)の再建前および再建後。A)左IANが露出した後の再構成前画像骨の除去。B) ポリグリコール酸コラーゲンチューブを使用して再構成された左 IAN の再構成後画像。

材料

この記事で使用された材料の一覧

名前	会社	カタログ番号	コメント
外科用バリカン	ボズ手術器具会社	RC-5903
使い捨てメス(No.15)	改医療	219ABBZX00073000
VarioSurg3	中西	VS3-LED-HPSC, E1133	骨加工用圧電手術
4-0ナイロン縫合糸	エチコン	8881H
8-0ナイロン縫合糸	エチコン	2775G
硫酸イセパマイシン	日一いこ	620005641
使い捨てメス (No.10)	甲斐メディカル	219ABBZX00073000
30ゲージ針	ニプロ	1134
1-0吸収性ステッチ	Ethicon	J347H
3-0ナイロンステッチ	Ethicon	8872H
Neo Thermo	NEC Avio	TVS-700	赤外線サーモグラフィ

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