ドーパミン負荷エクソソームキャリアシステムの定式化

要約

出典: Yavuz, B., et al.エクソソームベースのドーパミンキャリアシステムの定式化と特性化J. Vis. 経験。(2022年)

このビデオでは、エクソソーム内のドーパミンカプセル化を強化するためのサポニン誘発膜透過処理に焦点を当てて、ドーパミン負荷エキソソームの製剤

化を示します。

プロトコル

1.エクソソームへのドーパミン負荷

注:ウォートンゼリー間葉系幹細胞(WJ-MSCs)エクソソームの特性評価が完了した後、ドーパミン負荷エクソソームをドラッグデリバリーシステムとして得ました。エクソソームへの薬物ローディングは、インキュベーション法を使用して行われます。

1. 3 mLのリン酸緩衝生理食塩水(PBS)をエクソソーム懸濁液に加えます。0.22 μmフィルターを使用したろ過により、希釈した懸濁液を滅菌します。滅菌したエクソソーム懸濁液500 μLを別のチューブに移します。
2. ドーパミン溶液(0.5 mg / mL)を蒸留水で調製します。エクソソームを含むチューブに500 μLのドーパミン溶液を加えます。
3. ステップ1.2の懸濁液にサポニンを加えます。調製したエキソソーム-ドーパミン懸濁液を37°Cで24時間インキュベートします。注:サポニン濃度は、全溶液の0.002%を超えてはなりません。
4. 懸濁液を90,000 × gで70分間超遠心分離し、培地から遊離ドーパミンとサポニンを除去します。単離されたエクソソームは、さらなる分析に使用するまで-20°Cで保存します。手記：調製したドーパミン溶液の安定性のために0.02%アスコルビン酸を加えます。

材料