血管機能不全および生理学的メカニズムに寄与する度合いは、上腕動脈流依存性血管拡張反応、大動脈の脈波速度、および血管内皮細胞のタンパク質発現を測定することにより、慢性腎疾患を有する患者で評価することができる。
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この記事について
サマリー
要約
慢性腎臓病（CKD）を有する患者は、有意に、一般集団と比較して、心血管疾患（CVD）のリスクが増加し、これは部分的にのみ従来のCVD危険因子によって説明される。血管機能不全は、血管内皮機能障害（最も一般的に減損内皮依存性拡張[EDD]として評価さ）と大きな弾性動脈の硬直が特徴の重要な非伝統的な危険因子です。様々な技術がEDDと大きな弾性動脈剛性を評価するために存在するが、最も一般的に使用される上腕動脈流依存性血管拡張反応（FMD BA）及び大動脈の脈波速度（aPWV）である。血管機能不全のこれらの非侵襲的措置の両方を持つと腎臓疾患のない患者では、将来の心血管イベントの独立した予測因子である。 CKDの患者は両方の障害をFMD BAを発揮し、aPWVを増加させた。しばらくする正確なメカニズムは、血管機能不全DEVECKDでのLOPは完全には理解され、増加した酸化ストレスおよび一酸化窒素（NO）の生物学的利用能におけるその後の低下が重要な要因である。酸化ストレスの細胞変化は、肘正中静脈から血管内皮細胞を採取し、免疫蛍光法を用いて酸化ストレスのマーカーのタンパク質発現を測定することによって評価することができる。ここではFMD BA、aPWV、および血管内皮細胞のタンパク質発現を測定するためのこれらの方法の議論を提供する。
概要
慢性腎臓病（CKD）は、米国だけで1の人口の〜11.5％に影響を与え、大流行に達している公衆衛生上の大きな関心事である。 CKDの患者での心血管死亡または心血管イベントのリスクが大幅に一般集団2-4と比較して増加する。 CKDの患者は、従来の心血管危険因子の高い有病率を示すが、これは心血管疾患の彼らの発生率の増加（CVD）5の一部を説明しています。血管機能不全は、腎臓6-9の分野で増加した認識を得ることが重要非伝統的な心血管の危険因子である。
多くの変更は、おそらく最大の関心事のものの中に最も一般的に損なわれる内皮依存性拡張（EDD）と、LAの補強として評価され、血管内皮機能障害の開発である、動脈機能不全の発展に貢献しながら、RGE弾性動脈10。様々な技術が、EDDと大きな弾性動脈の硬さを評価するために存在するが、最も一般的に使用され、それぞれ、上腕動脈の流れ依存性血管拡張反応FMD BAおよび大動脈脈波速度（aPWV）です。 EDDを評価するための別の一般的に使用される技術は、例えば静脈閉塞プレチスモグラフィー11,12を用いて、アセチルコリンなどの薬理学的薬剤に対する前腕血流応答を測定する。ただし、この方法論は、口蹄疫BAよりも侵襲的であり、CKD患者では禁忌である上腕動脈のカテーテル挿入を必要とし....
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プロトコル
このプロトコルは、コロラド州の複数の治験審査委員会（COMIRB）のガイドラインに従っています。
テストセッションのために1。準備
- 参加者は、最も正確な測定のために、これらの制限に従う必要があります。薬から喫煙による食品やカフェインからの高速12時間、12時間の拘束運動から、12時間の拘束、該当する場合は、> 4半減期拘束可能な場合（に可能でないかもしれませんこのようなCKD患者人口）、および閉経前の女性はホルモンの影響を最小限に抑えるために、月経周期の日数1-7にテストする必要があります。
- リン酸緩衝生理食塩水（PBS）の476.8ミリリットルにする2ミリリットルの0.5Mエチレンジアミン四酢酸（EDTA）、ヘパリン（180 USP単位/ mg）を0.05g、及びウシ血清アルブミンを2.5gを添加して解離緩衝液を500mlを調製7.4のpH。これは、数ヶ月間、4℃で保存することができる。
- 超音波、コンピュータ、および非侵襲血行動態をオンにするワークステーション（NIHem、動脈硬化装置）。ケーブルは、コンピューターR波トリガーボックスに超音波を出力に接続します。
血管内皮細胞の2。収集および処理
- 訓練を受けた看護師や医師がコレクションを実行（2.2から2.5、2.7ステップ）、および研究者は、ワイヤを収集し、処理します（2....
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結果
FMD BAが反応性充血次上腕動脈の直径のピーク変化として定量化される。したがって、安静時の直径は、5分間血圧カフ閉塞期間（ 図1）の端部以下の直径と比較される。パネルAは、上腕動脈の代表的な超音波画像を示しており、市販のソフトウエアを用いて得られたパネルBは、以下の2分のカフから放出直径がR波ゲートさ変化のグラフを表示する。変更は（ 図1の変化は4.8％である）、しばしば非常に最小限に抑えられますように、測定のわずかな違いが結果に大きな影響を持つことができます。市販の自動エッジ検出ソフトウェアの使用は、高度計測44,45にバイアスと潜在的なエラーを最小限に抑えることをお勧めします。反応性充血の間の拡張のための刺激は、比較される基または状態との間で異なっていてもよいように、剪断速度は、ドップラー血流を用いて計算されるべきである速度、およびFMD BAは 46,47、該当の違いを調整する必要があります。
aPWVは、当社の研究.......
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ディスカッション
FMD BAとaPWVための正確な結果を得ることは、それぞれ、高品質の超音波画像および圧力波形を取得することが必要である。これの中心は、オペレータ44による各手法の適切かつ継続的なトレーニングと使用することである。また、テストセッション（ 例えば 、前に12時間の速い、気候制御室など ）44,45を標準化することによって、可能な結果に影響を与える可能性がある多くの外部の変数を制御するために重要です。上述したように、商業的にR波ゲーテッド取得ソフトウェアとエッジ検出ソフトウェアを使用することは非常に測定44,45にバイアスと潜在的なエラーを最小限に抑えることをお勧めします。 FMD BAが損なわれる場合、これは損なわNO放出に起因する、または起因する内皮から放出されるNOの血管平滑筋の応答性を損なわのいずれかであり得る。舌下ニトログリセリンは、滑らかなの応答性を制御するために投与され、FMD BA内の任意の障害が一酸化窒素44,45を生成するために血.......
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開示事項
著者は、彼らが競合する経済的利益を持っていないことを宣言します。
謝辞
著者は、彼女の技術支援のためのニーナファムに感謝します。この作品は、アメリカ心臓協会（12POST11920023）、およびNIH（K23DK088833、K23DK087859）によってサポートされていました。
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材料
| 名前 | 会社 | カタログ番号 | コメント |
|---|---|---|---|
| J-wire | セントジュード | 404584 | 2 per collection |
| 使い捨てショーツ (MediShorts) | Quick Medical | 4507 | |
| 非侵襲的血行動態ワークステーション (NIHem) | Cardiovascualr Engineering | N/A | カスタム定規が含まれています。 別のシステムは、Sphygmocor |
| Ultrasound | GEです。 | モデル:Vivid7 Dimension | G.E.を使用していますが、多くの会社やモデルがあります |
| Vascular software(Vascular Imager) | 医用画像アプリケーション | N/A | |
| R-waveトリガーボックス | 医用画像アプリケーション | N/A | カスタムメイド |
| ラピッドカフインフレーションシステム | Hokanson | モデル:Hokanson E20 | |
| 前腕血圧カフ | Hokanson | N/A | 6.5 x 34 cm膀胱付きカスタムカフ |
| HUVECs | Invitrogren | C-015-5C | |
| ロバ血清 | ジャクソン | 017-000-121 | |
| パップペン | リサーチプロダクツ インターナショナル | 195505 | |
| VE Cadherin | Abcam | ab33168 | |
| AF568 | Life Technologies | A11011 | microscpe |
| AF488 | Life Technologies | A11034 | マイクロスペックの仕様による |
| ニトロチロシン抗体 | Abcam | ab7048 | |
| NADPHオキシダーゼ抗体 | Upstate | 07-001 | |
| DAPI | ベクターH-1200 | ||
| リケートタスクワイプ(Kimwipe) | フィッシャーサイエンティフィック | 06-666-A | |
| プラスチックパラフィンフィルム(パラフィルム) | フィッシャーサイエンティフィック | 13-374-10 | |
| 共焦点顕微鏡 | オリンパス | モデル:FV1000 FCS/RICS | 多くのオプションあり |
参考文献
- Levey, A. S., et al. A new equation to estimate glomerular filtration rate. Ann Intern Med. 150, 604-612 (2009).
- Foley, R. N., Parfrey, P. S., Sarnak, M. J. Epidemiology of cardiovascular disease in chronic renal disease. J Am Soc Nephrol. 9, (1998). ....
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