マウスの左前下冠動脈の動脈の常設ライゲーション：心筋梗塞後のリモデリングおよび心不全のモデル

Summary

心不全は入院の主な原因であり、主要な死亡原因です。マウスにおける左前下行冠動脈の永久結紮のモデルを適用して、心室リモデリングと心筋梗塞後の心機能障害を調査します。マウスにおける侵襲的血行動態測定の技術が提示されます。

Abstract

心不全は、心臓が、安静時またはストレス中の細胞酸素要求に見合った速度で血液を送り出すために失敗する症候群である。これは、労作時、特に、体液貯留、息切れ、疲労によって特徴付けられる。心不全は、成長している公衆衛生問題、入院の主要な原因であり、死亡率の主要な原因である。虚血性心疾患は、心不全の主な原因である。

心室リモデリングは、左心室の構造、大きさ、形状の変化を指す。左心室のこのアーキテクチャのリモデリング（ 例えば、全身性動脈高血圧症または大動脈弁狭窄症）、または容量過負荷による圧負荷により、傷害（ 例えば、心筋梗塞）によって誘導される。心室リモデリングは、壁応力に影響を与えるので、それは心機能及び心不全の発症に重大な影響を与える。左前descendinの永久結紮のモデルマウスにおけるグラム冠動脈心室リモデリングおよび心臓機能心筋梗塞後を調査するために使用される。このモデルは、左冠動脈前下行枝の過渡結紮のモデルに比べて目標や病態生理学的関連性の点で基本的に異なる。虚血/再灌流傷害のこの後者のモデルにおいて、梗塞の初期の程度は、再灌流後の心筋救済に影響を与える要因によって調節され得る。対照的に、左冠動脈前下行枝の永久結紮後24時間での梗塞領域は固定されている。このモデルにおける心機能は、1）梗塞拡大、梗塞の治癒、および瘢痕形成のプロセスによって影響される。 2）左心室拡張、心肥大、及び心室リモデリングの同時開発。

左冠動脈前下行枝の永久結紮モデル、侵襲的血行動態MEAの技術に加えてマウスにおけるsurements詳細に示されている。

Introduction

心不全は、心臓が安静時またはストレス時に細胞の酸素必要量に見合った速度で血液を送り出すことができない症候群です。これは、体液貯留、息切れ、特に運動時の疲労を特徴としています。心不全は、増大する公衆衛生問題であり、入院の主な原因であり、死亡の主な原因です。虚血性心疾患は心不全の主な原因です¹。

心室リモデリングとは、左心室の構造、サイズ、形状の変化を指します。言い換えれば、心室リモデリングは左心室構造の変更に関係しています。この左心室の構造的リモデリングは、損傷(心筋梗塞など)、圧力過負荷(全身性動脈性高血圧症や大動脈弁狭窄症など)、または体積過負荷(僧帽弁閉鎖不全など)によって誘発されます。心室リモデリングは壁面ストレスに影響を与えるため、心機能や心不全の発症に大きな影響を与えます。

急性心筋梗塞後の心筋組織の喪失は、収縮期駆出の減少と左心室拡張末期の容積と圧力の増加をもたらします。Frank-Starlingメカニズムは、拡張末期の容積の増加が収縮期に発生する圧力の増加をもたらすことを示唆しており、心拍出量の回復に役立つ可能性があります。しかし、それに伴う壁応力の増加は、非梗塞領域では局所肥大を誘発する可能性があるが、梗塞領域では拡大と菲薄化が起こり得る。実験動物実験では、梗塞性心室肥大と肥大の程度は梗塞サイズ²に依存する....

Protocol

注：この項で説明するすべての実験手順は、動物実験ルーヴェン·カトリック大学の研究諮問委員会によって承認された（プロジェクト：2013分の154-B·デ·沖積層）。

左前下冠動脈の動脈の1常設ライゲーション

1. / kgのペントバルビタールナトリウム70mgの40〜10mg / kgの腹腔内投与によりマウスを麻酔。それはもはやしっかりとつま先のピンチを反応するときに、マウスが麻酔のその適切な面に到達しないことを確認してください。常に適切な麻酔の前に、任意の外科的処置または介入にこの方法を確認する。麻酔下ながら、角膜の乾燥を防ぐために、眼軟膏、潤滑使用してください。手順（ブプレノルフィン0.05 mg / kgをSQ）の開始前に術前鎮痛2-4時間を提供します。
   1. 生存手術中に一貫性のある無菌技術を適用します。最大限可能な範囲で微生物詐欺に抑制する手順を実装tamination重大な感染や化膿が発生しないようにします。これらの手順は、このサイトの手術部位と消毒の上、滅菌器具及び無菌材料の使用、手術領域の消毒、および毛皮/髪の除去が含まれています。
2. 自己準備平滑化20ゲージ針でマウスを挿管。
   1. 頭の過伸展と仰臥位でマウスを置きます。
      1. 首領域に光の焦点を合わせる。鈍いピンセットと舌を持ち上げます。喉頭の入口を明瞭に見ることができる。
      2. 直視下気管内に喉頭を鈍化針を渡します。....

Results

心筋梗塞の程度は、エバンスブルー/塩化2,3,5-トリフェニルテトラゾリウム（TTC）の二重染色によって評価することができる。 TTCは、NADH ⁸の存在下で様々なデヒドロゲナーゼの活性による生体組織の深い赤1,3,5- triphenylformazanに変換され、酸化還元指示薬、ある。 図1は、24時間後に心臓の代表的な断面を示している左冠動脈前下行枝の結紮。ブルー染色領域が非虚血/正常な領域を示している。リスクのある心筋の領域は、左冠動脈前下行枝の結紮から遠位ベッド灌流内の心筋組織として定義されている。ネガティブ染色領域（淡赤色）が梗塞領域を示すのに対し、深い赤色に染色された領域は、虚血が、実行可能な領域（リスクのある非梗塞面積）領域を示している。このモデルでは、リスクのある非梗塞領域は、目の永続的なキャラクターを反映したこの画像、で無視できなく見える左冠動脈前下行枝のEライゲーション。総左心室壁領域^9,10の60％ -梗塞領域は、典型的には50の間である。梗塞ゾーンの進化の二成分は識別されるべきである：1）梗塞の三次元形状）は、梗塞の総容積をより薄く.......

Discussion

慢性心筋の構造および機能の変化、左心室機能不全の発症、および心不全への進行は、いくつかのマウスモデル¹²で調査することができる。心臓リモデリングおよび機能不全は、心筋障害、または圧力大動脈狭窄を横断する第二過負荷、または拡張型心筋¹²の遺伝モデルで研究することができることによって誘導することができる。明らかに、マウスモデルの最も顕著な利点は、トランスジェニックおよび細胞型特異的および誘導性トランスジェニックモデルを含むノックアウト株の多数の利用可能性がある。これらのモデルにおける心臓リモデリングの評価は非常にmicromanometryを用いて超解像度2D-及び3次元心エコー検査、マイクロ磁気共鳴イメージング、血行力学的評価のような技術の開発により容易化されており、圧力容量ループの微圧計コンダクタンス技術は、分析する。本稿では、MODに焦点を当てている心筋傷害のelは左心室micromanometryにより冠動脈および左心室機能の評価を左前の永久結紮により誘発される。

心筋梗塞の最初のマウスモデルはZolotareva ら

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
ブプレノルフィン(ブプレネックス)	ベッドフォード研究所
ナトリウムペントバルビタール(ネンブタール)	セバ
ベタジン	VWR国際	200065-400
5 - 0シルク縫合	チコン、ジョンソン&ジョンソンメディカル	K890H
6 - 0プロレン縫合糸	エチコン、ジョンソン&ジョンソンメディカル	F1832
6 - 0 Ti-Cron 縫合糸	Ethicon, Johnson &ジョンソンメディカル	F1823
ウレタン	シグマ	94300
アルコノックス	アルコノックス株式会社
人工呼吸器、MiniVent Model 845	Hugo Sachs	73-0043
胸部リトラクターまたは胸部リトラクター	Kent Scientific Corporation	INS600240	ALM 自己保持、鋸歯状、長さ 7 cm、4 x 4 "L" 字型プロング、3 mm x 3 mm
1.0 フレンチミラー圧力カテーテル	ミラー・インスツルメンツ	SPR - 1000/NR
Powerlab	ADInstruments Pty Ltd.
LabChart®	ADInstruments Pty Ltd.
直腸ゾンデ	ADInstruments Pty Ltd.