方法論記事

実験的尿毒症性心筋症を誘導するマウス 5/6th腎モデル

DOI：

10.3791/55825

⸱

2017年11月7日

 ,  ,  ,  ,  , 
1Marshall Institute for Interdisciplinary Research (MIIR), Marshall University, 2Department of Biomedical Sciences, Marshall University Joan C. Edwards School of Medicine

* These authors contributed equally

この記事について

サマリー

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この原稿は、マウス 5/6th腎部分切除術 (PNx) ポール結紮とを実行する詳細な 2 段階手術を提供します。手術後 4 週間 PNx マウスは sham 群と比較して腎機能障害、貧血、心臓肥大、心筋線維化を開発し、心収縮および拡張機能の低下します。

要約

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慢性腎臓病 (CKD) 心血管疾患イベントと死亡率の大きな危険因子であり「尿毒症性心筋症」と呼ばれる臨床表現型に徐々 に成長します。5/6th腎部分切除術 (PNx) を付けポール結紮手術後 4 週間で尿毒症性心筋症を開発、実験 CKD マウス モデルをご紹介します。この PNx モデルは、2 段階の手術で行われました。ステップ 1 つの外科で左腎両極を結紮しました。ステップ 1 手術後 7 日間に実行されたステップ 2 の手術で右の腎臓が削除されました。偽手術同じ手術を行ったが、ことがなくポール左腎結紮または右の腎臓の除去。手術プロシージャは、他の方法と比較して、簡単に少ない時間がかかる。ただし、残存機能腎腫瘤が腎動脈結紮として簡単に制御されていません。手術後 4 週間 PNx マウスは sham 群と比較して腎機能障害、貧血、心臓肥大、心筋線維化を開発し、心収縮および拡張機能の低下します。

概要

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として知られている慢性腎不全 CKD は最終的に永久的な腎障害に開発時間をかけて腎機能の進歩的な損失です。CKD は、末期腎臓病 (ESRD) に腎疾病初期段階から心血管疾患イベントと死亡率の大きな危険因子であり「尿毒症性心筋症」1,と呼ばれる臨床表現型に徐々 に成長する2,3。CKD や腎不全の患者で尿毒症心筋症は主に左心室 (LV) 圧や左心室の肥大 (LVH)、左心室の拡張、左心室の収縮機能障害4 につながる量の過負荷による心血管系の異常に関連付けられて ,5,6。心臓線維症は左室拡張不全の結果心臓のコンプライアンスが減少尿毒症心筋症の別の一般的な病理学的プロセスです。重度の心筋線維化は、心臓症状7なしであっても心臓突然死につながります。

5/6th PNx は腎不全、尿毒症性心筋症と高血圧を含む動物の研究のための一般的に使用される CKD の動物モデル。PNx は 5/6 腎実質のアブレーションによって実現されます。ラット モデル....

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プロトコル

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すべての動物の世話と実験はケアと実験動物の使用のためマーシャル大学動物介護施設と国立衛生研究所 (NIH) ガイドに従って使用委員会 (IACUC) によって承認されました。男性の c57bl/6 マウス (10-12 週齢) は、指定された客室には 12 時間の明暗サイクルの下で浄化された空気を供給するケージにおける病原体の無料動物実験施設で収容されました。食料や水が指定された 広告自由

。

1 です。 手術準備

注: 手術器具および材料手術操作に固有ではない別のソースから取得されます。器具その他のソースからの材料は、同じ目的のため使用できます。手術器具のリストのための 材料表 を参照してください

。
    1. オペレーティングの届く範囲は、次の場所の 手術の準備 のテーブル: 温暖化パッド、ハロゲン ランプ、酸素タンクとイソフルラン タンク、イソフルラン気化器、バリカン、脱毛クリーム、スケール、滅菌セット、滅菌手術リネン、コットン綿棒、70% アルコール、polyhydroxydine (1% ヨウ素溶液)、0.9 %nacl 水溶液、1 mL 注射器や針 (30 G)、3-0 と 4-0 絹糸、ブプレノルフィン、ペニシリン抗生物質軟膏を営業と潤滑剤眼軟膏
      2. 。
    2. ケージをきれいにし、手術....

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結果

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データは、これが変更ことを示して5/6thポール結紮 PNx モデル尿毒症性心筋症を調査する簡単で効果的なモデルです。手術の後 4 週間、モデルを提示この PNx 障害腎機能、貧血、心臓肥大、心筋線維化と心収縮および拡張機能の低下します。結果は以下のとおり。

4 週間後の手術では、PNx マウスは人間の尿毒症心筋症の表現型と一致している心臓の形態学的・生化学的変化だけでなく腎機能の障害を開発しました。PNx を介した変更には sham 群と比較して次の点が含まれます。まず、予想通り、PNx 手術は腎機能の重大な障害を引き起こされます。PNx 手術によってシスタチン C の血漿中濃度が有意に増加した図 2のように、(図 2に、n = 16)、クレア.......

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ディスカッション

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ラット 5/6th PNx モデルは CKD を研究に広く使用されています。多く腎サイズが小さいのでマウスで、古典的な動脈結紮とポール切除可能性の高い死亡率と予期しない出血・血液喪失マウス モデルで非常に挑戦しています。

出血・血液喪失を克服するためにポールの結紮とマウス PNx モデルを採用しました。この PNx モデル改良された生存率と再現性の高い時間はかかりません。この極結紮モデルは 4 週間後の手術の時に人間の尿毒症心筋症の表現型の変化を開発して言い、治療の対象を研究するモデルを提供します。

この PNx モデルで 5/6th PNx は以来、腎質量削減の近似的評価と、今までまったく異なるサイズ/質量を持ち 2 つの腎臓の残腎質量を計算する方法はありません。ただし、操作バリエーションを減らすために非常によく似た方法で結紮を実行する必要があります。尿毒症性心筋症の表現型の開発を損なうことがなく、左腎臓 (腎総量の約 20%) の約 40% を維持する減らすことができる死亡率 (.......

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開示事項

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著者が明らかに何もありません。

謝辞

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この作品は、NIH R15 1R15DK106666-01A1 (劉) して (アオカビ シャピロ) に NIH RO1 HL071556 によって支えられました。

....

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材料

この記事で使用された材料の一覧
名前会社カタログ番号コメント
アイリスハサミ、11.5 cm、ストレートワールド精密機器501758
WPI スイスピンセット #5 11 cm、0.1x0.06 mm ヒントワールド精密機器504506
ジュエラーズ #5 鉗子、11cm、ストレート、チタンワールド精密機器555227F
アイリス鉗子、10cm、ストレート、鋸歯状ワールド精密機器15914
ピンセット #3、11cm、0.2x0.4mm チップWorld Precision Instruments501976
Medesy Iris 4.5" Curved Scissors, Stainless SteelNet233512www.Net32.com
Dr. Slick Iris Hasrs; 3.5"Avid Max220-1-965-IrisScsrs-P www.Avid Max.com
Miltex Iris Scissors 4 1/8 "湾曲4mdmedicalV95-306www.4mdmedical.com
5 "止血拍手、湾曲した顎PJTool4355www.pjtool.com
sklar Knapp Iris はさみ、まっすぐでシャープ/鈍い 4 "医療機器デポ64-3430www.medicaldevicedepot.com
ケリー止血鉗子ストレート 5.5"ピルグティムメディカルFA710-50
www.pilgtimmedical.com C57BL/6 マウスヒルトップ ラボアニマルズ
 マウスハンドリングテーブルと直腸体温計Visualsonics
MicroScanトランスデューサー Vevo 1100MS400
Vevo 1100イメージングシステム 富士フイルムビジュアルソニックス株式会社
シスタチンC ELISAキットおよびマウスクレアチニンキット クリスタルケム株式会社
ねずみBUN ELISAキット 株式会社MyBioSource 

参考文献

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  1. Sarnak, M. J., et al. Kidney Disease as a Risk Factor for Development of Cardiovascular Disease: A Statement From the American Heart Association Councils on Kidney in Cardiovascular Disease, High Blood Pressure Research, Clinical Cardiology, and Epidemiology and Prevention. Circulation.

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