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方法論記事

レーザーのドップラー: 膵微小血管皮膚血管運動In Vivo測定のためのツール

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DOI:

10.3791/56028

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2018年3月8日

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この記事について

サマリー

膵微小血管バソモーション アイレット血液の分布を調節して膵島 β 細胞の生理学的機能を維持します。このプロトコルは、膵微小血管バソモーション生体内での機能の状態を確認して膵臓病に膵微小循環の貢献を評価するレーザーのドップラー モニターを使用して説明します。

要約

微小循環の機能状態、微小血管皮膚血管運動の酸素と栄養の配信と二酸化炭素と老廃物の除去のため重要です。微小血管皮膚血管運動障害疾患の微小循環関連の開発の重要なステップがあります。さらに、高度に血管膵内分泌機能をサポートする適応です。この点で、膵微小血管皮膚血管運動機能の状態が膵機能に影響を与える可能性があります推測することが可能です。貢献を決定するための実行可能な戦略があります膵微小血管皮膚血管運動の機能的状態の病理組織学的変化の分析とその膵微小循環は、糖尿病などの関連疾患膵炎等したがって、このプロトコルが膵微小血管バソモーションの機能の状態を確認して (平均血液灌流、振幅、周波数、および相対を含むパラメーターを確立するレーザー ドップラー血流モニターを使用してについて説明します膵微小血管皮膚血管運動の速度) 微小循環機能の状態の評価のため。ストレプトゾトシン誘発糖尿病マウスのモデルでは、膵島の血管皮膚血管運動の障害機能状態が見られました。結論としては、膵微小血管バソモーション生体内評価するためこの方法は、膵疾患に関連するメカニズムを明らかにするかもしれない。

概要

微小循環の機能状態のパラメーターとして微小血管バソモーション配信と酸素、栄養素、およびホルモンの交換のための責任を取るし、セル廃棄物や二酸化炭素などの代謝産物の除去に不可欠であります。1。 血管皮膚血管運動も血流分布と組織の灌流、局所微小循環血圧力と炎症は、多くの疾患で浮腫を引き起こすことができるレスポンスに影響することを調節します。したがって、微小血管皮膚血管運動は臓器2,3,4組織、およびコンポーネントのセルの生理機能を維持するために非常に重要です。微小血管皮膚血管運動の障害は、微小循環関連疾患5の開発の重要なステップの 1 つかもしれない。

レーザードップラー法は、観察と微小循環研究6のフィールドの数量のために開発されました。(例えば、レーザー スペックル7、経皮的酸素等)、その他の技術的なアプローチと共に、この技術は、微小循環の血流を評価するため黄金の標準と見なされています。レーザー ・ ドップラー、装置によって (すなわち毛細血管、細動脈、....

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プロトコル

すべての動物実験は、関連するガイドライン、規制、規制機関に準拠して実行されました。例示されている議定書を指導と承認の研究所の微小動物倫理委員会 (IMAEC) で、北京ユニオン医療大学 (医学科学院) の下で行った。

1. 動物

  1. 実験開始前に 12 時間の明暗周期下ケージ温度制御 (24 ± 1 ° C) と湿度 (55 ± 5%) につき 3 つの BALB/c マウスを維持します。マウスの通常の餌と水への無料アクセスを許可します。
  2. 糖尿病群と非糖尿病群にマウスをランダムに分割します。正確にそれぞれの個々 のマウスの重さし、それぞれのマウスの体重を使用して注入量を計算します。
  3. ストレプトゾトシン (STZ) 投与前に、4 時間マウスを高速かつ実験 1 日目に通常どおり定期的に水を提供します。
  4. Ph 4.3 0.1 M クエン酸ナトリウム バッファーを準備します。溶液 1 mL を 1.5 mL 遠心チューブに入れるし、光の露出を避けるためにアルミ箔で遠心チューブをラップします。
  5. クエン酸ナトリウム緩衝液 (4.3) を使用する前に 5 mg/mL の最終作業濃度に STZ を溶解します。
  6. 1 mL シリンジ、25 G 針を使用して 40 mg/kg の用量で stz 糖尿病グループの腹腔内注射マウスを与えます。クエン酸ナトリウム緩衝液 (4.3) の同じボ....

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結果

図 1 aに微小血管皮膚血管運動測定レーザー半導体レーザー ダイオードを用いたドップラー装置の写真を示します。ユーザー インターフェイス ソフトウェアは、図 1 bに提示されます。上記の方法を使用して、非糖尿病のコントロールと糖尿病マウスの両方の膵微小血管皮膚血管運動の血行動態パラメーターが検出されました。レーザードップラーを含む技術のさまざまな反射散乱光、赤外線分光とイメージング技術、最初に定義したので血管皮膚血管運動を研究に使用されています。表 1は、研究グループおよび糖尿病および関連疾患における微小循環の役割を決定するレーザー ドップラー技術を使用して公開された記事をまとめたものです。

一般に、膵島の微小循環の条件が平均血液灌流、振幅、周波数、相対を含む微小パラメーターを使用して膵微小血管皮膚血.......

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ディスカッション

微小血管障害 (例えば、糖尿病、急性膵炎、末梢血管疾患、等) を含む場合は、いくつかの疾患は血流の低下に します。血流の変化以外は、微小循環の機能状態をミラー化する微小血管皮膚血管運動などの重要な指標があります。特定の指標、微小血管皮膚血管運動は血管ベッドで微小音の振動として一般的に定義されます。現在のプロトコルの監視システム微小血管血流を直接可視化と微小血管皮膚血管運動の機能的状態の定量分析のためことができます。私たち微小循環の評価アプローチは、対象となる組織や臓器に血液灌流のダイナミックな変化を識別することによって、選択的に適用できます。レーザー ドップラーを使用して糖尿病の微小血管の血流の役割を決定する方法その他のグループによる報告し、その合併症を表 1に要約されました。現在の研究では、我々 のアプローチを実証する糖尿病マウスの膵島の血管皮膚血管運動の機能の状態を評価しました。

微小血管皮膚血管運動は微小循環の機能状態のパラメーターとして認識され、局所組織23.......

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開示事項

著者が明らかに何もありません。

謝辞

この作品は、北京ユニオン医療大学青少年基金、中央大学 (許可番号 3332015200) の基礎的研究資金からの補助金によって支えられました。

....

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材料

この記事で使用された材料の一覧
名前会社カタログ番号コメント
MoorVMS-LDF2Moor InstrumentsGI80PeriFlux 5000 (Perimed Inc.) は、データを収集するための代替装置として使用できます
MoorVMS-PCソフトウェアMoorVMS-PCソフトウェア MoorVMS-LDF2GI80-1
Moor InstrumentsGI-calキャリブレーションツール
キャリブレーションベースMoor InstrumentsGI-calキャリブレーションツール
校正フラックス標準Moor InstrumentsGI-cal校正ツール
One Touch UltraEasy 血糖値計Johnson and Johnson#1955685高血糖の確認
One Touch UltraEasy stripsJohnson and Johnson#1297006高血糖の確認
StreptozotocinSigma-AldrichS0130クエン酸ナトリウム緩衝液(pH 4.3)に溶解
ペントバルビタールナトリウムSigma-AldrichP3761使用濃度3%
エタノールSinopharm Inc.200121作業濃度 75 %
ショ糖Amresco335作業濃度 10 %
医療用ガーゼ中国健康材料有限公司S-7112外科
鈍鼻鉗子Shang Hai Surgical Instruments Inc.N-551外科
用サージカルテープ3M会社3664CU外科
用ガーゼスポンジFu Kang Sen Medical Device CO.BB5447外科
用メスYu Lin Surgical Instruments Inc.175C外科
用皮膚はさみCarent255-17外科
用縫合Ning Bo Surgical Instruments Inc.3325-77外科用
シリンジと25Gニードルミサワ3731-2011スケール:1 ml
キャリブレーションスタンドのソフトウェア用糸

参考文献

  1. Aalkjaer, C., Nilsson, H. Vasomotion: cellular background for the oscillator and for the synchronization of smooth muscle cells. Br J Pharmacol. 144 (5), 605-616 (2005).
  2. Serne, E. H., de Jongh, R. T., Eringa, E. C., IJzerman, R. G., Stehouwer, C. D.

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