誘導およびマウス モデルにおける脳海綿静脈奇形のマイクロ CT イメージング

Jaesung P. Choi; Xi Yang; Matthew Foley; Xian Wang; Xiangjian Zheng

doi:10.3791/56476

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方法論記事

誘導およびマウスモデルにおける脳海綿静脈奇形のマイクロ CT イメージング

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DOI:

10.3791/56476

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2017年9月4日

Jaesung P. Choi¹^,² , Xi Yang³ , Matthew Foley⁴ , Xian Wang¹ , Xiangjian Zheng¹^,²^,³

¹Lab of Cardiovascular Signaling, Centenary Institute, ²Faculty of Medicine, Sydney Medical School, University of Sydney, ³Department of Pharmacology, School of Basic Medical Sciences, Tianjin Medical University, ⁴Australian Centre for Microscopy & Microanalysis, University of Sydney

この記事について

サマリー

このプロトコルはマウスモデルにおける脳海綿静脈奇形病の誘導を示し、使用造影病変の負担を測定するマイクロコンピューター断層撮影。このメソッドは、分子基盤と脳海綿静脈奇形の潜在的な治療とその他の脳血管疾患を勉強する確立されたマウスモデルの価値を高めます。

要約

突然変異、 CCM1 (別名 KRIT1)、CCM2、またはCCM3 (別名 PDCD10)遺伝子は人間の脳海綿静脈奇形 (CCM) を引き起こします。CCM 病気のマウスモデルはCcm遺伝子は生後のタモキシフェンによる削除によって設けられています。これらのマウスのモデル分子機構と CCM の病気のための治療上のアプローチを調査するための非常に貴重なツールを提供します。これらの動物モデルの完全な値を活用する病変負担と進行を評価する正確な定量的な方法が欠かせません。ここでは、CCM 病マウスモデルでの誘導を示す、コントラストの使用強化 x 線マイクロコンピューター断層撮影 (マイクロ CT) マウス脳におけるメジャー CCM 病変負担します。生後日 1 (P1)、 Ccm2の floxed の対立遺伝子を切断するのに Cdh5 CreErt2 遺伝子から Cre リコンビナーゼアクティビティを有効にするのに 4-hydroxytamoxifen (第 4 はレディース) を使用しました。マウス脳における CCM の病変は、P8 で分析しました。マイクロ CT によるヨウ素・ルゴール液脳組織のコントラストを高めるため使用しています。スキャンパラメーターを最適化し、約 25 μ m の最小機能サイズにつながる 9.5 μ m のボクセルディメンションを利用しました。この解像度で世界的にかつ正確に、CCM 性病変の容積と数を測定し、高品質マウス脳の CCM 病変の 3次元マッピングを提供するのに十分です。このメソッドは、CCM と他の脳血管疾患の分子基盤と潜在的な療法を研究するため設立されたマウスモデルの価値を高めます。

概要

CCM は壁が薄く、人間の人口¹で最大 0.5% の有病率と脳の血管の奇形を拡張します。CCM は、3 つの遺伝子の 1 つの機能喪失変異による支配的な障害として継承できる: CCM1 (別名Krit1)、 CCM2、およびCCM3 ( PDCD10とも呼ばれる)²^,³^,⁴ ^,⁵^,⁶。これらの遺伝子は、単一の複雑な信号に存在。

モデル CCM 疾患、CCM⁷^,⁸^,⁹^,¹⁰は、CCM の遺伝子の下流の経路を理解し、様々なモデルが開発されています。最も堅牢なモデルは、新生の子犬⁸^,