丸い窓の膜を介してヒト以外の霊長類コモンマーモ (用いた) の内耳に薬を管理する手術法を報告する.
このコンテンツを表示するには、JoVEへの購読が必要です。 または、無料トライアルをお申し込みください。
方法論記事
ヒト以外の霊長類コモンマーモ (用いた) で内耳に薬の管理術
* These authors contributed equally
この記事について
サマリー
要約
研究を聞いて長いによって促進されています齧歯動物モデルがいくつかの疾患では、ことはできませんですが、人間の症状が締めくくっています。コモンマーモ (用いた) が小さい、ハンドル簡単新しい世界猿と齧歯動物の比較よりも中耳の耳小骨連鎖と人間、内耳を含む頭骨のような解剖学を持っています。ここでは、一般的なマーモセットの内耳への薬物送達の蝸牛の丸い窓のニッチに再現可能な安全かつ合理的な手術アプローチを報告する.後部鼓膜、鼓膜伝導性の聴力損失を引き起こす可能性のある操作を避けるために人間の外科で臨床的に使用されるプロシージャを採用しました。この手術は、任意の重要な聴力損失には至らなかった。外側半規管、顔面神経の垂直部分を慎重に検討する必要がありますが、このアプローチは共通マーモセットの大きな嚢胞構造のために可能だった。この手術方法では、前臨床トランスレーショナルリサーチの概念実証を得ることに非常に重要なは、聴覚の損失、薬剤の安全で正確な管理を実行することが出来ます。
概要
難聴 (SNHL) は、損傷や、蝸牛の欠乏から主に発生します。SNHL の一般的な原因は、高齢化 (例えば老人性難聴)、遺伝的欠陥、耳毒性薬物1感染症、騒音への暴露。世界保健機関 (WHO) は、以上 3 億 6000 万人、世界の人口の 5.3% を表すが損失2を聞いて苦しむ推定されます。1 で 2,500 新生児に 900 の 1 が中等度、重度と先天性重度の永続的な難聴、および 65 歳以上の約 3 つの大人はある程度聴力損失3とも推定されます。ただし、これらの患者の難聴の効果的な治療はありません。
聴覚研究はネズミやモルモット モデルを使用して実行されて長いが、難聴の新しい治療法として遺伝子治療や再生療法などさまざまな方法が提案されています。しかし、人間および齧歯動物聴覚システムの面で大きな差がある、人間のアプリケーションに動物モデルを変換する非常に困難であります。コモンマーモ (C. 用いた)、アマゾンから発信された新しい世界猿いくつかの理由のための様々 な基礎調査研究魅力的な非ひと霊長類モデルとなっています。まず、その解剖学と生理学よりこれらの齧歯動物ではなく人間に似ています。第二に、基本的な生物学的疾患、神経回路網、動作、およびゲノムを含むこの種についてはよく特徴付けられます。聴覚とボ....
アクセスが制限されています。このコンテンツを表示するにはログインするか、トライアルを開始してください。
プロトコル
すべての実験手順は、東京慈恵会医科大学、東京都で行われました。機関動物ケアおよび使用委員会東京慈恵会医科大学の動物取り扱いと実験プロシージャを承認 (承認なし: 26-060)、慈恵で実験動物の使用のための機関のガイドラインに沿って行われ、大学: 日本学術会議 (2006 年) で動物実験の適切な実施のためのガイドラインに同意します。ケアと実験動物の使用 (資源研究所の実験動物、1996) のガイドの推奨事項に従って動物のケアを行った。
1. 術前検査
- 少なくとも 1 ヶ月個々 の解剖学的構造の識別を容易にするため手術の前に動物 (コモンマーモ セット) の頭蓋の計算された断層レントゲン写真撮影 (CT) スキャンを取る。
- 聴力検査手術の前に、少なくとも 1 ヶ月を実行します。
注: ここでは、聴覚の状態を評価するために、ABR を使用しました。簡単に言えば、肯定的な電極は、頂点と刺激耳背下部参照否定的な電極で皮下置かれました。接地電極は首の背の部分に皮下配置されました。17,18 Abr をトーン バーストと誘発した (1.0 ms トーン バースト 0.1 ms の上昇と持続時間と立下り時間)。音圧レベルは最大振幅から 10 dB ステップで、減った。各音のレベルで 512 応答を (交互刺激の極性) を平均しました。ABR 閾値はであらゆる波を検出で....
アクセスが制限されています。このコンテンツを表示するにはログインするか、トライアルを開始してください。
結果
手術部位感染、血管の損傷や中耳の操作で発生する前庭障害と出血など合併症なく後部鼓膜を行った。7 歳コモンマーモの右の耳の後部の鼓膜を行い丸い窓のニッチに 1 μ L のリン酸緩衝生理食塩水を投与します。Abr は、前に、(図 5A B) 術後後 2 ヶ月を測定しました。波形と Abr のしきい値が以前研究17,18に匹敵して手術 (図 5C) 前後にこれらのパラメーターに変化はないです。したがって、我々 はその後の鼓膜は共通のマーモセットの丸い窓のニッチに薬の管理のための安全で有用なプロシージャを締結しました。
アクセスが制限されています。このコンテンツを表示するにはログインするか、トライアルを開始してください。
ディスカッション
蝸牛の血流の量が非常に小さい 1/1,000,000 人間の総心臓出力の順番になっていると推定される、一般的な循環19 から内耳を隔てる血蝸牛バリアの存在によってアクセスを制限 ,20。これらの理由から、薬物や内耳へのウイルスのベクトルの管理は直接管理ではなく、全身投与ではなく、良好です。マウス、モルモット実験で様々 なアプローチが報告されているトランス後耳介による丸窓や腹側アプローチ、cochleostomy、内リンパ嚢配信、および半規管に近づく21, 22,23,24,25,26。
アクセスが制限されています。このコンテンツを表示するにはログインするか、トライアルを開始してください。
開示事項
著者が明らかに何もありません。
謝辞
仕事は日本政府文部科学省科研費 (24592560, 15 H 04991、15 K 15624) から m. f. と m. f. に武田科学財団、東京慈恵会医科大学戦略的な優先順位付け研究基金 H.J.O. の補助金によってサポートされて
....アクセスが制限されています。このコンテンツを表示するにはログインするか、トライアルを開始してください。
材料
| 名前 | 会社 | カタログ番号 | コメント |
|---|---|---|---|
| コモンマーモセット | クレアジャパン | EDM:C.マーモセット(Jic) | |
| イソフルラン | ファイザー | ||
| メデトミジン | ゼノアQ | ||
| ミダゾラム | アステラス | ||
| ブトルファノール | 明治製菓 | ||
| アンピシリン | 明治製菓 | ||
| リドカイン塩酸塩 | アストラゼネカ | ||
| 6-0 吸収糸 | エチコン | RD-1 | |
| アチパメゾール塩酸塩 | ゼノアック | ||
| リン酸緩衝生理食塩水 | 和光 | 045-29795 | |
| サージウェーブ | モリタ | TR-900-OR | |
| ダイヤバー 006 | モリタ | 14070057 | |
| ダイヤバー 010 | モリタ | 14070081 | |
| 集中治療室 | Menix | P-100 |
参考文献
- Liberman, M. C., Kujawa, S. G. Cochlear synaptopathy in acquired sensorineural hearing loss: Manifestations and mechanisms. Hear Res. 349, 138-147 (2017).
- World Health Organization. Deafness and hearing loss (Fact sheet N8300). , Available from:
アクセスが制限されています。このコンテンツを表示するにはログインするか、トライアルを開始してください。
再版と許可
