方法論記事

2 つのサケ科の魚で空気除去の有効性 (オンコルヒュンクス) レインボー ・ トラウトやブラウン ・ トラウト (タイセイヨウサケMorpha fario)

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DOI：

10.3791/56894

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2018年9月16日

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1Department of Gamete and Embryo Biology, Institute of Animal Reproduction and Food Research, Polish Academy of Science, 2Department of Salmonid Fish Research, The Stanisław Sakowicz Inland Fisheries Institute

この記事について

サマリー

本研究の主な目的は、標準化し、レインボー ・ トラウトやブラウン ・ トラウトの卵を集めての空気圧法 (空気ストリップ) をテストすることです。このメソッドでは、魚の腹部マッサージを必要としない卵の効果的かつシンプルなコレクションをことができます。

要約

採卵は、魚類の生殖におけるサケの孵化中に最も重要な手順の 1 つです。古典的な方法は、卵を追放する魚の腹部にハンド マッサージの使用を含みます。別の方法は、卵の後続のリリースを引き起こす体内に注入するガスの圧力を使用します。このメソッドは、broodstocks の福祉と卵の両方の品質にあまりマイナスの影響があると考えられています。ここで、我々 は空気および 2 つのサケ科の魚、(オンコルヒュンクス) レインボー ・ トラウトやブラウン ・ トラウト (タイセイヨウサケmorpha fario) で 1 年生存し、卵の量と質に関するメソッドをストリッピング手の結果を比較します。我々 の結果を示すその空気除去卵とニジマスの高い 1 年間生存率の質の向上が得られました。さらに、手除去を施したグループより低い死亡率率で起因した空気除去 (25%対. 35%)。剥奪手グループの pH と孵化率は空気除去グループのそれらより低かった。ブラウン ・ トラウトの場合手と空気除去の方法によって得られた卵の質は似ています。ただし、魚の 1 年間の損失は、剥奪航空群 (剥奪手魚で 0% と比較して 15%) で高かった。空気除去手順により再現性の高い孵化場で養子となる有望なオプションがありますがサケのすべての種で卵質の面でストリッピング手をストリッピング法エアコンの利点、観察可能性があります、・効率化

概要

(オンコルヒュンクス) レインボー ・ トラウトやブラウン ・ トラウト (タイセイヨウサケmorpha fario) は、サケ ・ マス類1のサケの家族に属しています。グローバル養殖にこれらの 2 つの種の生産は、その商業とレクリエーションの重要性のための急速な成長を得ています。ポーランドでは、サケ科の魚の生産は、レインボー ・ トラウトが優占種と約 20 000 トンに立っています。その一方で、ブラウン ・ トラウトは、養殖や釣りのための重要性の商業的価値のためヨーロッパの淡水魚類資源の主要なソースを表します。多くの水生生態系でブラウン ・ トラウトの個体群の存在が脅かされています。その結果、人工繁殖は、この種の2地域個体群を再入荷に適用されています。

レインボー ・ トラウトやブラウン ・ トラウト、成熟雌1よりも前の年の男性と、3 つの年齢で通常成熟を達成します。人工条件下で卵と精子のレインボー ・ トラウトとブラウン ・ トラウト通常穏やかな腹部マッサージによって収集されます。小さな規模での実習で卵を集めて手除去法は費用対効果です。ただし、大規模な手ストリッピング法なることが手間と体力を消耗します。その結果、この技術は、壊れた卵孵化場労働者の疲労が原因で起因します。卵の破損は、多くの場合卵巣液の pH とどちらに悪影響卵3の受精卵の黄身の放出の減少に します。さらに、採卵 (腹部を押す) の伝統的な方法は、粘液の防護壁の劣化に関連付けられている皮膚感染によって引き起こされる親死亡でもあります。

空気圧採卵法は、1957年4のオーストラリアで最初に使用されました。メソッドは、ガス圧を使用して卵を追放する体腔にへのガス (空気、窒素または酸素) に基づいています。この迅速かつ簡単な方法は、サケ科の魚魚4任意の負の副作用なしに正常に適用されています。最近では、このメソッドは、野生種 (ノーザンパイク、 Esox ルキウス) 人工条件5で成熟した卵を収集するために使用されました。いた高い受精とふ化率の手と比較して除去卵受精 (Woynarovich ソリューション、ビラード バッファーまたは放流水)5用ソリューションに関係なく空気が卵を除去ことが示されました。

本研究の主な目的は、レインボー ・ トラウトやブラウン ・ トラウト ストリッピング法従来の手との比較で卵を集めての (空気ストリップ) 空気圧メソッドをテストするだった。両方のメソッド (得られた卵のボリューム) のコレクション、品質孵化率と産卵後の死亡率と同様、配偶子 (卵巣液の pH)、時間の効率を比較しました。

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プロトコル

手順はローカル委員会は、ポーランド、オルシュティンの動物実験の倫理に従って行われました。

1. 機器の準備

  1. 魚体の空洞内へのガスの注入の注射器と針を使用します。
  2. 0.5 bar でガス圧を設定し、全体で 1 つの棒の下にあるこの圧力を維持します。
  3. 空気の流れを制御します。サケ科の魚では、1.5 L/分、ガスの枯渇の最も効率的な速度です。高い速度が遅い速度は、不必要にプロシージャを長引かせるかもしれないが、すべての卵を取得できませんので、最適な速度を維持します。
  4. ねじ込み式の針とシリンジを接続 (0.8-1.2 mm 径) ガスの圧力によって引き起こされる針剥離を避けるために。

2. 空気の産卵

  1. 0.2% で魚を麻酔 Propiscin。0.2 と水浴中に魚をプレイス %propiscin と魚が応答しなくなるまで待つ。
  2. 慎重に乾燥木綿布で拭くことによって産卵前に乾きます。
  3. 約スラント ベッドの上の魚の場所を彼女の尾側に 35-40 °。魚の腹部の穏やかなプッシュ、生殖管から卵の流れを確認します。卵が存在しない場合、魚が生成できませんする必要があります。
  4. 卵を収集する魚乳頭下メッシュで覆われているコンテナーを配置します。
  5. すぐに腹部ひれ下針を挿入します。
  6. 自由に特異な卵のみが魚の体から削除されるまでのガスによって卵を削除します。
  7. 魚体から過剰なガスを除去する腹部を優しくマッサージします。
  8. 産卵した後、そっと魚を水の流れとタンクに転送します。魚のタンク、水の表面に最初に泳ぐかもしれない空気産卵後で解放。数分後、魚は泳ぎながら残りのガスを解放し、通常泳ぎ始めます。
    注: 得られた卵は、非常にきれいな、血液または糞便の汚染から無料です。

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結果

成熟した男性とレインボー ・ トラウト (年齢 2 + 1700 ± 328 g) の女性およびブラウン ・ トラウト (年齢 3 + 1900 ± 435 g) は、サケ科の魚卵孵化場 (Rutki Żukowo、内陸漁業研究所ポーランド、オルシュティンの) から得られました。男性と女性は別タンク約 5 m3の量に置かれました。水の温度は 12±1 ° C0.2% で麻酔された魚操作前に Propiscin。魚は、2 つのグループに分けられました。それらの一部を施行した腹部圧力すなわち卵を得るために従来の方法 (n = 20)。残りのグループは空気の使用空気圧に手術 (n = 20)。各女性から卵は別々 に採集、乾燥のプラスチック製のボウルに配置。

卵の除去、手の中に乾いた布で彼女の側では、尾の魚を押しながら魚を一掃する最初だった。産卵期間は、魚と、腹部を押して起動または針を挿入、オペ...

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ディスカッション

空気魚からの採卵法が成熟卵母細胞 (本作) の高品質を確保できる (手ストリップ)、従来の方法よりも時間がかかる。これは、この手順を適用するとき卵の機械的破壊の低リスクに関連です。受精率の増加と同様、卵巣流体の高 pH は空気圧法の有用性を証明します。全体的にみて、成功した応用はないオペレーターの手動の卓越性に関連して、魚類の生殖の卵のコレクションのメソッドを除去する空気の未来プロトコルの標準化の観点から有望なオプション可能性があります。

空気の産卵は、自動のオプションと思われる、手動起動よりも時間がかかることがありますが分かった。この期間の違いは、経験豊富な孵化場労働者が手除去手順を適用する場合に特に明らかです。しかし、それは指摘する必要がありますの使用での産卵の期間空気圧アウトはまだ不十分である;魚ごとに約 20 秒。また、ストリッピング法手の場合と同様、この手法の有効性は労働者の経験に依存しません。

得られた卵の量に違いは見られなかった、卵巣液の pH の違いが明らかにニジマスの場合。この効果おそらく壊れた卵 pH はこ...

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開示事項

著者が明らかに何もありません。

謝辞

提示された研究プロジェクトによって支えられました"空気圧法魚ストリップ - 可能なアプリケーション、配偶子の質と量と魚の福祉に及ぼす影響」(頭字語: PNEUFISH)」運用プログラム開発、水産の下でセクターと沿岸エリア 2007-2013」(OR-61724-OR1400001/10)、動物繁殖研究所・食品研究にあてる資金はポーランド、オルシュティン、ポーランド科学アカデミー、コスト オフィスによるサポート (食品と農業コスト アクション FA1205: AQUAGAMETE).我々 は、スタンレー ・ イファニー Ugwu 英語の編集で素晴らしいサポートのために感謝したいと思います。アニメーション製作者「Studio Filmowe Ruchome Obrazki」で認識もします。

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材料

この記事で使用された材料の一覧
名前会社カタログ番号コメント
グリシンピュアP.A.AVANTOR527560117精子活性化バッファー
Trizma baseSigma AldrichT1503精子活性化バッファー
塩化ナトリウム BioreagentSigma AldrichS5886精子活性化バッファー
塩化カルシウム無水Sigma AldrichC4901精子活性化バッファー
プロピシン (0.2% エトミデート溶液)IRS Olsztyn, Poland表示
コンプレッサートーマス 米国ウィスコンシン州シボイガン DT/SR 070800001882
リダクションバルブカモッツィ cRJUS U7J
エアホースZEC T.P.U. SH.98 
syrgineEFD7012118
Air spawning stageBiopasz, PolandPNEU001
Orion Ross Ultra electrodeThermo Scientific, Waltham, MA, USA8102BNUWP
されていない

参考文献

  1. Nelson, J. S. Fishes of the World. , 4th, JohnWiley and Sons, Inc. Hoboken, NJ, USA. (2006).
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