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方法論記事

褥瘡脊髄損傷後のマウス ・ モデル

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DOI:

10.3791/58188

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2019年3月9日

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この記事について

サマリー

ここでは、脊髄損傷 (SCI) のマウスモデルで臨床的に関連する皮膚褥瘡 (膿) を誘導する単純な方法を説明します。このモデルは、SCI の患者の治癒の膿の異なる治療の画面に前臨床試験で使用できます。

要約

褥瘡 (膿) は一般的な外傷性脊髄損傷 (SCI) の合併症を衰弱させる、骨の出っぱりの周りの軟部組織に発生する傾向があります。しかし、ほとんど知られている SCI の動物モデルの制御の実験設定のコンテキストで創傷治癒への影響について。本研究では完全な科学のコンテキストで膿の単純な非侵襲的、再現性と臨床的に関連するマウス モデルに示します。成人男性マウス (Balb/c, 10 週齢) は、剃毛され、depilated。後脱毛 (24 h)、マウスは完全脊髄損傷 (T9 T10 椎) 続いて椎弓切除術を受けた。直後、マウスの背中の皮膚のひだは解除され次の日間、PU に開発した虚血領域を作成、次の 12 時間行われて 2 つの磁気ディスクの間に挟まれた。負傷者の領域は、3 日目後磁石アプリケーションによって組織の浮腫と表皮の消失を実証しました。膿は自発的に開発し、癒されます。癒し、ただし、SCI マウスより遅い比較傷が逆に科学のレベルの下に作成されたときは、非-SCI マウスを制御するため癒しの違い間みられなかった SCI とコントロールの非-SCI マウス理レベル上傷が作成されたときこのモデルは、皮膚 PU 開発と SCI もこのような傷を癒す治療法をテスト後の治癒過程のダイナミクスを検討する可能性がある便利なツールです。

概要

圧力潰瘍 (膿) は、外傷性の科学1の主要な合併症です。膿は、皮膚および/または患者が座っているまたは1を横になっているときに、体重が集結している骨の出っぱりに通常発生する基になる組織にローカライズされた傷害です。皮膚、脂肪、および筋肉は、ローカライズされた虚血、組織の炎症、機械的損傷、壊死2,3の開発につながるこの一定の圧力にさらされています。

膿の開発は、圧力・せん断、期間、皮膚の水分と温度、傷害長寿、一般的な皮膚の衛生状態の大きさを含むいくつかのローカル要因の影響を受けます。一般的な物理的な条件、骨と筋組織形態と強度4、患者の年齢、血液対策、性別、婚姻状況、教育なども社会経済的要因などの役割を果たす全身的要因もあります。所得4,5。

予防と膿の治療科学における重要な課題のままです。SCI 患者は、おそらく弱い瘢痕組織と保護の感覚1の不足のための 60-85% の再出現率を症例の 30 〜 40%....

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プロトコル

ラトガース大学機関動物ケアおよび使用委員会によって承認されたプロトコールに従ったすべての動物取扱および外科プロシージャを行った。マウスは、標準的な食事とアドリブの水を供給しました。

1. 手術と非手術器械の準備

  1. オートクレーブの手術と非手術器械を滅菌します。
  2. 70% エタノールで外科手術台をきれいにし、37 ° C に加熱パッドをウォーム アップ
  3. オペレーティング テーブルの上に加熱パッドを配置し、滅菌外科用ドレープでそれをカバーします。
    注:すべての生存の手順で「ノータッチ」手法は、無菌性を維持するためにここで使用します。

2. 動物の T9 T10 脊椎椎弓切除を行う準備

  1. アダルト (Balb/c) 10 週齢雄マウスを調達します。5% イソフルレン吸入器の先頭を使用してそれぞれの動物の麻酔し、手順の残りの部分のための鎮静を維持するために 2-3% に低下します。
  2. 尻尾か足ピンチによる侵害受容刺激への応答を引き出すことないが完全な麻酔を確認します。
  3. 残りの髪を削除する脱毛クリーム (3 分) を適用し、電気クリッパーと背 (頭/尾) に髪を剃る。最後に、水/濡れているスクラブを実行すると背を洗うし、自分のケージに動物を返します。

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結果

このプロトコルは、の完全な科学は簡単に設定で PU を作成します (図 1に示されている) として、すべてマウスに完全な SCI 容認磁石非常によく (図 1 c、1 d、1 階、1 hの 12 h の元の位置に残って).すべてのマウスは、正常の組織 (図 1e, 1 g, 1i) の橋で区切られた 2 つの円形傷を開発しました。負傷の初期応答はマウス SCI (図 1e) なしまたは sci SCI サイト (図 1 g) の科学サイト (図 1i) 上下に似ていた。

図 2

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ディスカッション

本研究ではプロトコルでは、膿は SCI の創傷治癒への影響を評価するための新しい実験モデルについて説明します。皮膚の膿は、背側皮膚のひだは、上または SCI のサイトの設定の 2 つの 12 mm 径ディスク磁石の 12 h アプリケーション経由で誘導された.データは、SCI をマウスの皮膚創傷治癒を遅らせることを示します。重要なは、専用に SCI レベル上で作った傷として、SCI の神経レベルの下の皮の傷で作られたこれらの観察とこうして残った神経、非科学マウスと比較して、治癒パターンに大きく影響を受けませんでした。

記載 PU プロトコルは、マグネット15なし 12 h で区切られた 12 h 磁気応用の 3 つのサイクルで弱い磁石 (1000 ガウス) をつけたマウスで使用される以前に公開された方法に基づいています。当初は、磁気応用の 2 つ、および 3 つの 12 h サイクルを使用して、1 つを比較しました。繰り返されるアプリケーションを使用しての欠点では、特別な注意皮膚のひだから磁石をデタッチし、正確に同じ場所で再適用する必.......

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開示事項

著者が明らかに何もありません。

謝辞

この作品は、ニュージャージー脊髄研究 (CSCR15IRG010)、米国国防総省 (SC160029)、イェール大学部の外科大瀬研究助成プログラム委員会によって部分的に支持されました。倉庫ケック共同神経科学センター、ラトガース大学のテクニカル サポートからショーン o ' Leary に感謝いたします。

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材料

この記事で使用された材料の一覧
名前会社カタログ番号コメント
マグネットMaster Magnetcs, Inc., Castle Rock, COCD14C3800 G 磁力
マウス 標準食PMI Nutrition International, Brentwood, MOStandard Food Pellet
IsofluraneHENRY SCHEIN Animal Health SKU 029405
ImageJNIH, Bethesda, MD画像解析ソフトウェア
BETADINE Surgical ScrubHENRY SCHEIN Animal Health 
眼科用軟膏 ヘンリー・シャイン・アニマルヘルス SKU 008897
NAIR-ヘアリムーバーローションチャーチ&Dwight Co., Inc. ニュージャージー
ELOXIJECT(メロキシカム)注射HENRY SCHEIN Animal Health SKU 0497555 mg/mL, 10 mL
セファゾリン ナトリウムHENRY SCHEIN Animal Health SKU 0548461 g、10 mL ボトル
Buprenorphine-SR ZooPharm、ウィンザー、CO--
0.9%塩化ナトリウム注射USPブラウン、アーバイン、CAS8004-5384
10%中性緩衝ホルマリン VWR, Radnor, PA16004-130
BALB/C Male MouseCharles River Lab., Wilmington, MA28
Sterile Cotton Tippped ApplicatorPuritan, Guilford, MESKU#: 25-806
Michel Suture ClipsFine Science Tools (USA) Inc., Foster City, CA12040-01
Surgical Suture, U.S.P.ヘンリー・シャイン・アニマルヘルス 〒101-2636
州プリンストン

参考文献

  1. Rappl, L. M. Physiological changes in tissues denervated by spinal cord injury tissues and possible effects on wound healing. International Wound Journal. 5 (3), 435-444 (2008).
  2. Salcido, R., Popescu, A., Ahn, C. Animal models in....

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再版と許可

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