このコンテンツを表示するには、JoVEへの購読が必要です。 または、無料トライアルをお申し込みください。

方法論記事

慢性的ストレス マウスに Xiaoyaosan の抗うつ効果の評価

8.9K 回視聴

⸱

DOI:

10.3791/58276

⸱

2019年1月7日

 ,  ,  ,  , 

* These authors contributed equally

この記事について

サマリー

ここでは、うつ病マウスモデルを確立し、慢性的な予期しない穏やかなストレス (CUMS) に関連付けられている動作の変更を観察 Xiaoyaosan の抗うつ効果の評価プロトコルを提案します。

要約

抗うつ薬と心理療法の標準化された使用、に加えて、伝統的な中国医学の使用法 (MDD) 大鬱病性障害患者の全体的な改善をリードしています。したがって、本研究の目的は、うつ病マウスモデルを確立し、慢性的な予期しない穏やかなストレス (CUMS) に関連付けられている動作の変化を観察し、Xiaoyaosan の抗うつ効果の評価だった。マウスが 4 つのグループにランダムに分け: 対照群、モデル グループ、処置群と Xiaoyaosan、およびフルオキセチン治療グループ。すべてのマウスに個別に檻に保たれ、うつ病は、21 日間 CUMS のいくつかの設計操作にそれらを公開することにより、マウスで誘導されたプロトコルで説明されているようです。コントロール グループおよびモデル グループのマウスは、治療群マウスがいずれかの Xiaoyaosan を受けながら 0.5 mL の蒸留水を受信 (0.25 g/kg/日)、フルオキセチン (2.6 mg/kg/日)。研究で使用される薬剤量を全体の 3 週間の間に毎日与えられました。うつ様行動を推定する一連のパラメーター コート状態、体重などオープン フィールド テストの得点とショ糖の好みテストの得点を記録しました。データ分析は、マウスは大幅変更モデルの挙動はに比べて Xiaoyaosan とフルオキセチンの治療によって改善された対照群マウスの挙動を示した。現在の調査結果は CUMS 誘発マウスの挙動に関する Xiaoyaosan の抗うつ効果を実証し、Xiaoyaosan 処方から化合物は上の有益な効果を考慮した、うつ病の治療の価値があるかもしれないことを明らかにしました。うつ病のような動作です。

概要

MDD は高い再発、慢性精神病が永続的な低気分、うつ病、自尊心、精神遅滞、興味の喪失とプレゼント睡眠障害、深く悲観的または自殺傾向;人間の健康と社会安定化1に大きな損害をもたらしました。世界の障害の主な原因の一つとなっています、それは 2030 年に従って世界保健機構2,3疾病の主な原因の一つかもしれません。現在、抗うつ薬と心理療法は、MDD を治療するために最初の選択であると見なされます。しかし、MDD と診断された患者の膨大な数が連続的な薬物や療法に応答しない、治療抵抗性うつ病4を持つものとして記載されています。

Xiaoyaosan は数千年中国6宋以来の心理的な病気の治療に広く使用されている古典的な中国複合5です。8 中国のハーブで構成される:基数柴胡、基数芍薬アルバ、基数ヒカゲノツルニンジン、茯、莪処理 Macrocephalae、基数抗莪和漢 Recens、および中ペパーミント。Xiaoyaosan 複数の成分が含まれ....

アクセスが制限されています。このコンテンツを表示するにはログインするか、トライアルを開始してください。

プロトコル

このプロトコルは、北京中医薬大学の動物倫理委員会によって承認され、ケアと中国の実験動物の使用のためのすべてのガイドラインに従った。実験中に、不慮の死の状況はなかったし、本研究で安楽死される動物は不要します。

1. 実験のため薬の準備

注: 中国のハーブに購入されリュー * 北京中国医薬大学によって認証されます。Xiaoyaosan には、6:6:6:6:3:6:2:2 の比率で次の 8 伝統的な中国薬が含まれています: 基数ヒカゲノツルニンジン、基数芍薬アルバ、茯、基数柴胡、基数抗、莪処理 Macrocephalae、中ペパーミント、大黄和漢 Recens。

  1. 前述の16Xiaoyaosan を準備します。
    注意: 我々 は日中友好病院の漢方準備室でこれらの化合物を抽出、抽出率 18.8% であった。
  2. 高性能液体クロマトグラフィー質量分析 (MS/LCMS)17Xiaoyaosan の品質を確認します。

2 実験手順のマウスを準備

注: 実験プロシージャの 12 週間を高齢者、健康の 60 男性 c57bl/6 j マウス、選ばれた 18 と 22 g の間の重量を....

アクセスが制限されています。このコンテンツを表示するにはログインするか、トライアルを開始してください。

結果

博士秀牙鼎らによって結果が以前公開されていることに注意してください。18

データは、平均 (SEM) の平均 ± 標準誤差として表現されました。一方通行 ANOVA または非パラメトリック テストは一般的なデータに基づく正規性の検定と分散の均一性の検証のために使用されました。LSD テストは、グループ間の比較に使われました。さらに、一般化線形モデル (GLM) の繰り返しの測定プロセスは繰り返し測定データのための一方向の分散分析を実施する使用された (スコアをコートし、体重) と比較して差異の多変量解析プロセスを採用して時に各グループ間 (LSD 法) をポイントします。

CUMS 誘発マウスの物理的な状態

アクセスが制限されています。このコンテンツを表示するにはログインするか、トライアルを開始してください。

ディスカッション

本研究で使用される CUMS モデルはうつ病24のストレス素因モデルを構築する一般的な方法です。強力な予測的妥当性25をこのモデル メソッドには示されている抗うつ薬は CUMS のほとんどの症状を復元できます。このメソッドによって動物は慢性的な予測不可能なストレス刺激を受け、低下場所優先エアコン、無快感、障害感情のような行動26など主要な不況の徴候、コアを開発します。ここでは、このプロトコルでは、Xiaoyaosan またはフルオキセチンの連続使用は CUMS 誘発モデル マウスの実験で得られた結果によるとうつ病のような動作を改善できることがフルオキセチンは、Xiaoyaosan の介入効果を証明するために陽性対照薬としては.

コートの評価スコア、オープン フィールドとは異なりテスト、強制水泳試験や目新しさの抑制給与試験、ヒトのうつ病に関連付けられていないが、うつ病モデルの最も一般的な信頼性の高い、よく検証法は、メジャーマウス

アクセスが制限されています。このコンテンツを表示するにはログインするか、トライアルを開始してください。

開示事項

著者が明らかに何もありません。

謝辞

この研究は、国家自然科学基金、中国の (号 81630104; 号 81473597) と中央大学の基礎的研究資金からの補助金によって支えられた (No. 2018-JYBZZ-XS005)。プロトコルと本稿で示される結果は、論文博士が関与の正規化グリア線維性酸性タンパク質発現慢性的ストレス マウスに Xiaoyaosan の Antidepressant-Like の効果になったから起きる。秀牙鼎、ら

....

アクセスが制限されています。このコンテンツを表示するにはログインするか、トライアルを開始してください。

材料

この記事で使用された材料の一覧
名前会社カタログ番号コメント
Chinese HerbsTongrentang (Bozhou, AnHui) Decocion Pieces Limited Company-薬は中日友好病院の漢方薬準備室で抽出され、蒸留水を使用してXiaoyaosanの懸濁液を調製し、用量は0.25g / kg / dでした。
フルオキセチンPATHEON FRANCE5545A蒸留水を使用してフルオキセチンの懸濁液を調製し、用量 2.6 mg/kg/d を調製しました。
C57BL/6j miceBeijing Vital River of the Charles River CompanySCXK 2011-000412週齢の健康な雄C57BL/6Jマウス60匹をCharles River CompanyのBeijing Vital Riverから購入しました。
マウスケージスタイリングバイオテクノロジー34853016318回;202回;135 mm
蒸留水--実験では水を使用しました。
スクロースシグマ-スクロースは、1% スクロース溶液を調製するためのスクロース選好試験で使用されました。
ACS-2EAS電子天秤北京Hengzhongheng電子技術有限公司●さまざまな段階でマウスの常衡の重さを量るために使用されました。
木製の黒い光沢のないボックス--(40 cm x 40 cm x 15 cm)、青い線で25の等しい正方形に分割されています。
WV-CP470カメラパナソニック、日本-オープンフィールドテストの全過程を記録するために使用されたHDデジタルカメラ。
Etho Vision 3.0 SoftwareNoldus, Wageningen, Holland-マウスの運動機能と感情を評価するために使用されたビデオ追跡システム。
SPSS Statistics 21.0ソフトウェアIBM-SPSS 21.0ソフトウェアを用いてデータの解析を行い、一般データには正規性検定に基づく一元配置ANOVAまたはノンパラメトリック検定と分散の均一性検定を、グループ間の比較にはLSD法を採用した。
Graphpad Prism 6.0 ソフトウェアGraphpad Software,Inc.USA-統計グラフの描画には、Graphpad Prism 6.0 ソフトウェアを使用しました。

参考文献

  1. Chrousos, G. P., Gold, P. W. The concepts of stress and stress system disorders. Overview of physical and behavioral homeostasis. JAMA. 267 (9), 1244-1252 (1992).
  2. Yao, Y., Huang, H. Y., Yang, Y. X., Guo, J. Y.

アクセスが制限されています。このコンテンツを表示するにはログインするか、トライアルを開始してください。

再版と許可

さらに記事を探す

慢性予測不能軽度ストレス逍遙散治療フルオキセチン治療ショ糖嗜好性試験オープンフィールド試験被毛状態評価体重測定抑うつ様行動マウス抑うつモデル中医学