方法論記事

豚の出血性ショックの治療のための完全なおよび部分的な大動脈閉塞症

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DOI:

10.3791/58284

2018年8月24日

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この記事について

サマリー

ここでは、外傷の最終的な治療への架け橋として大動脈閉塞を使用して豚の出血性ショック モデルを示すプロトコルを提案します。このモデルは、幅広い外科的および薬理学的治療戦略のテスト アプリケーションです。

要約

出血外傷の予防可能な死の主要な原因のまま。近年非圧縮性胴体出血の血管内管理外傷救急医療の最前線にいます。以来、完全な大動脈閉塞症は、深刻な懸念をプレゼント、大動脈の部分的な閉塞の概念は、成長注目を集めています。小説の部分の大動脈バルーン閉塞カテーテルの効果を調査し完全大動脈閉塞の原則は、カテーテルと比較して出血性ショックの大動物モデルを紹介します。豚の麻酔し、制御の固定ボリューム出血を実施するためにインストルメント化し、血行動態と生理学的パラメーターを監視します。出血、大動脈閉塞バルーンカテーテルが挿入され、その中に動物を受け取る全血液量 (TBV) の 20% として全血蘇生 60 分 supraceliac 大動脈の膨張します。バルーン デフレ、次に彼らを受信輸液蘇生と強心薬必要に応じて 4 時間クリティカルケア設定で動物が監視されます。部分的な大動脈バルーン閉塞バルーンの膨張時に改善された遠位平均動脈圧 (地図) を実証、虚血のマーカーを減少し、輸液蘇生と昇圧使用を減少します。豚生理・出血恒常性に対する十分に文書化されているし、人間のそれらのような出血性豚ショック モデルは様々 な治療戦略をテストする使用できます。出血を治療するだけでなく大動脈閉塞バルーンカテーテルは心不全、心臓・血管外科、その他の危険性の高い選択科目手術の彼らの役割のため人気となっています。

概要

出血が会計軍の設定の外傷関係した死の 90% と 40% の一般市民人口1,心的外傷後死亡、外傷性の出来事を受ける患者の予防可能な死の主要な原因であり続けます2。 直接的な圧力は、圧縮性の出血を扱うことができる、非圧縮性の胴体出血まま難しい治療と迅速な止血コントロールなし致死することができます。蘇生の開胸または開腹術大動脈遮断との歴史的なアプローチは、非常に侵襲的な3,4を証明しています。この介入は、外傷性の侮辱5を受けている患者の候補を決定する複雑な選択アルゴリズムも必要です。

近年では、前述のアプローチの興味の復活があった-蘇生血管内バルーンカテーテルによる大動脈 (REBOA)6,7,8。REBOA が授与出血の短期的な生存の優位性あり、バルーンの膨張時に大動脈の長期完全閉塞は不可逆的なエンド臓器虚血9,10を含む深刻な懸念を提起します。この潜在的な罹患率を克服しようとして、代替血管内出血の管理方法が考案されています。関心の高まりを見ているようなの 1 つの戦略は、大動脈11,12の部分的な閉塞です。部分的な大動脈バルーン閉塞のアイデアを与える閉塞、改良された生理学的近位大動脈マップ、およびバルーン デフレに漸進的な後負荷低減のサイトに遠位血管ベッドの灌流。パラメーターでこれらの変更は、出血動物の生理学的特性に必要な変更です。人間にこのメソッドの翻訳前に完了し、部分的な大動脈閉塞バルーンカテーテルを大きく出血性ショック11,12,13豚モデルでテストされています。

豚は、長年にわたり出血性ショックを伴う研究で使用されています。出血性ショックの病態生理学の現在の理解のほとんどは、豚などの動物モデルを利用した研究から派生されます。彼らの生理学と病理学的ボリューム枯渇次出血、特に血液凝固・心血管反応に係るもの、よく文書化されている、人間14のようなものの設定で恒常性の応答。出血性ショックの豚モデルはまた出血性ショックの治療方針やその他の外傷を調査する機会を提供します。

本研究では、完全および部分的な大動脈バルーン閉塞を含む血管内治療戦略を評価する豚で出血性ショックの臨床的に現実的なモデルを示しています。我々 は仮定より生理学的に大動脈の部分的な閉塞の結果、研究室のプロファイル制御の固定ボリューム出血を受けている豚の大動脈の完全閉塞と比較します。

豚モデルで出血性ショックの治療として部分的な大動脈閉塞症の生理学的効果を比較を目指しました。部分的な大動脈閉塞症は、外傷 (サボ) カテーテル (図 1) の選択的大動脈バルーン閉塞を使用して達成されました。サボ カテーテルは、内管腔血流、それにより咬合の遠位血管ベッドに部分的な大動脈流を提供することができる 2 バルーン システムです。完全大動脈閉塞は単一バルーン大動脈閉塞症のカテーテル (例えばCODA) を使用して達成された (図 1)。完全なまたは部分的な大動脈バルーン閉塞カテーテルと蘇生の大動脈閉塞を受けることを無作為に治療群 (n = 2/グループ)。

モデルの主要な手順には、麻酔・気管挿管の誘導、麻酔、インストルメンテーション、35 %tbv 出血 (20 分合計; 最初の 7 分上半分と半分残り 13 分以上)、大動脈バルーン閉塞のメンテナンスと全血蘇生 (咬合 60 分; 咬合の最後の 20 分間 20% 全血蘇生)、クリティカルケアの血行動態と組織採取と安楽死 (240 分) を監視します。図 2は、この実験で利用されているモデルを示します。

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プロトコル

動物を用いた研究を行う、動物福祉の法律規則を遵守して捜査当局とのケアと使用ガイドの現在のバージョンに、動物や実験動物と原則に関するその他の連邦法が掲げる国立研究評議会の実験動物。この研究のプロトコルは、ミシガン州機関動物ケアおよび使用委員会 (IACUC) の大学によって承認されました。すべての規則および研究における動物福祉に関する指針に準拠して行った。

1. 動物の選択と順化

  1. 使用女性ヨークシャー-在来種交配豚 (n = 2/グループ、年齢の範囲: 5-6 ヶ月、体重範囲: 40 ~ 60 キロ) の実験のため。
  2. 施設到着後ケージに個別に動物を家が隣接するケージに動物の十分な相互作用があることを確認します。
  3. 彼らは完全に実験を実行する前に順応できるように、少なくとも 5 d のための動物を家します。この期間中には、標準的な食事との動物フィードし、健康の良い状態を確認するためにそれらを観察します。
  4. 食べたり飲んだり、挿管時誤嚥の危険を防ぐために手術前に真夜中の後から、動物を飼います。

2. 麻酔・気管挿管

  1. 動物が住宅地にある間、動物を中殿筋に 5 mg/kg チレタミン/チレタミン筋肉に与えられた (IM) で落ち着いた。同時に、挿管時の分泌物を抑える抗コリン剤としてアトロピン 0.05 mg/kg IM を与えます。
  2. 手術室には、住宅地から動物を輸送し、手術台に仰臥位。
  3. 麻酔に吸入イソフルラン (2%-5%) を使用します。キャリア ガスとして空気 (4 L/分) で 21% 酸素 (0.4 L/分) を使用すると、吸入麻酔ガスを提供します。
  4. 麻酔深度の目的は達成されている間は、必要に応じて、液体、薬や麻酔の IV 管理の耳静脈に 20 G の末梢静脈内 (IV) カテーテルを配置します。
  5. 動物は、麻酔の必要な深さを取得するには廃棄物と左と右鼠径部の領域、左側と右側の首と腹部を含む手術のサイトからの残骸を水洗い。手術のサイトからすべての髪を削除するのにには、電気バリカンを使用します。動物の後肢をつまんで、その (の欠如) 応答を観察することによって麻酔の深さを評価します。
  6. 挿管を考える前に、それぞれの端の周りの外科用綿ロープを使用してオペレーティング テーブルには、動物を保護します。
  7. 外科用綿ロープの短い部分を使用すると、口腔のオリフィスを開くに舌と下顎を持ち上げます。綿ロープの別の部分を使用して、下の上顎を抽出します。顎の緩和が十分ではない、声帯ヒダが折りたたまれている場合にイソフルランのレベルを簡単に上げるし、この手順を繰り返します。
  8. 照明付きミラーのブレードで 12 装備従来の喉頭鏡のハンドルを保持するために非支配的な手を使用します。中咽頭を介してミラー刃の先端を渡します。口腔内にブレードを操縦している間の歯や口腔粘膜を維持するために注意を練習します。ゆっくりと刃先喉頭蓋を明確に視覚化できるまでと過去の喉頭口の前貸しを進めます。手首を使って、エレベーターの喉頭蓋、喉頭のクリアな視界が得られるように、刃を持ち上げます。
  9. 6.5 は Fr や気管に声帯間スタイレットと 7 Fr の気管内チューブ (ETT)。喉頭粘膜の炎症が原因の場合声帯の中央 glosso 喉頭蓋フィールド 2% リドカインを適用し、見直します。
  10. チューブにしっかりしたグリップを維持しながら気管にチューブを完全に進む前に、スタイレットを削除します。カフ周りの空気漏れを防ぐために空気の 10-15 cm3と胃内容物の誤嚥バルーン カフを膨らませます。
  11. 呼吸フィルター (熱・湿気交換器) を介して、ETT を人工呼吸器に接続します。鼻 (上顎) 周りに綿テープを結ぶことによって、気管内チューブを固定します。
  12. 挿管の失敗が発生した場合に、動物酸素を聞かせて任意の追加の試み前に簡潔に換気し、なさい。
  13. 適切な人工呼吸器の設定を確認: 21% 酸素と空気の混合物を7-10 mL/kg 体重の一回換気量40 mmHg ± 2 mmHg の呼気終末 pCO2を維持するために 10-15 呼吸/分の呼吸。
  14. 耳、舌、血液酸素濃度と心拍数を測定する尾のいずれかに、パルスオキシメータを配置します。連続使用温度を監視するため肛門のオリフィスを通って直腸プローブを進めます。
    注: 動物の温度 40 ° C 加熱温度による発現調節のオペレーティング テーブル、熱マットや毛布を使用してに 38 ° C の間は維持することです。
  15. イソフルラン (1%-3%) を使用すると、プロシージャ全体で麻酔の維持のため。この時、後肢ピンチを使用して痛みの反射神経をテストすることによって麻酔の深さを評価します。さらに、プログラム呼吸率が一致するかどうかの人工呼吸器で呼吸数を監視します。
    注: 過呼吸麻酔の不十分な深さを示します。

3. 手術部位の殺菌 (準備とドレープ)

  1. 実験手順のためそれらを取り巻く広範な領域と同様に、切開サイトを準備します。実験のため切開サイトには、下腹部・両側頸部両側鼠径領域が含まれます。5 分ポビドン ヨードのおびただしい量とそれらのスクラブで施術部位を消毒します。
  2. 乾燥、滅菌ガーゼを使用すると、皮膚からポビドン ヨード石鹸を削除します。
  3. 滅菌手術フィールドを維持するために手術のサイト周り滅菌手術用タオルを配置します。タオル鉗子を使用して、場所にタオルをセキュリティで保護します。施術部位の汚染防止のために滅菌ドレープで動物をカバーします。

4. 穿刺

  1. 大腿動脈、静脈穿刺
    注: 右大腿動脈、左大腿動脈、左大腿静脈の穿刺が実行されます。右大腿動脈は、大動脈バルーン閉塞カテーテル挿入 14 Fr 挿入シースを使用して cannulated です。左の大腿動脈は 5 Fr カテーテルを用いて遠位マップの監視を cannulated です。8 Fr カテーテルは、流体管理、血液回収のため左大腿静脈に配置されます。すべての深くすべての残15血管アクセスに開くセルジンガー法を採用します。
    1. 切開する前に、動物の後肢をつまんで麻酔深度を評価します。
    2. メスを使用して数 10 滅菌手術ブレード装備、右に縦 8 cm の切開を 4 cm 上と右鼠径部のしわの下 4 cm 脚の付け根。
    3. 皮下組織や筋肉を介して分析し、適切な露出を得るための 2 つの Weitlaner リトラクターを使用します。必要な場合、追加の撤回のため陸軍海軍リトラクターを使用します。
    4. 神経血管束が表立ってるまで結合組織を解剖する Mixter 直角鉗子や電気メスを使用します。
    5. 慎重に分析する動脈。外側の構造体である神経を保持します。
    6. 慎重に分析する静脈、動脈から最も内側に位置しています。
    7. 2-0 シルク ネクタイを使用して動脈の近位と遠位のコントロールを得る。
    8. 20 G 斜めイントロデューサ針を使用して、動脈を穿刺します。拍動を観察することによって血管内腔内の適切な位置を確保する針のもう一方の端を介して血液の流れ。
    9. 斜め針の内腔を通じてガイドワイヤーでラウンド先端の 0.35 を進めます。
    10. ガイドワイヤ上針を撤回します。場所にそれを保持することによって、ガイドワイヤの移行を防ぐため。
    11. 動脈の開口部を広げるためガイドワイヤーを 10 Fr ガイドワイヤーを通過します。10 Fr 散大を削除します。ガイドワイヤ上 14 Fr 挿入シースを挿入します。
    12. 動脈内カニューレを維持、ガイドワイヤーに沿って挿入シースから、散大を慎重に取り外します。
    13. 血管内腔内の位置を確保するため挿入シースをフラッシュします。
    14. 3-0 polyglactin 縫合糸でカテーテルの端を固定します。
    15. 3-0 ナイロン縫合糸を使用して、穿刺部位の皮膚の一時的な実行中の閉鎖を行います。
    16. 5 Fr カテーテル (初期拡張術) を用いた左大腿動脈穿刺の前述の手順を繰り返します。同様の方法で左大腿静脈を隔離し、8 Fr カテーテルを使用してそれを cannulate します。3-0 ナイロン縫合糸を使用して、穿刺部位の皮膚の一時的な実行中の閉鎖を行います。
  2. 内頚動脈と外頚静脈穿刺
    注: 両側外頚静脈と左総頚動脈カニュレーションが実行されます。5 Fr カテーテルは、近位の地図を監視する左総頚動脈、左外頚静脈輸の昇圧注入追加中心静脈アクセスのために 8 Fr カテーテルに置かれます。9 Fr カテーテルは (例えばスワン-ガンツ) に肺動脈と肺動脈カテーテルの右外頚静脈にカテーテル、頸動脈流プローブは頸動脈流量右総頸動脈周囲に配置中監視します。治療アプローチは、すべて深くすべての残のバスキュラー アクセスを得るために使用されます。
    1. 10 刃メスを使用すると、首の左側の正中線上に 6 cm の縦切開約 2 cm が横になります。
    2. 電気焼灼器を使用して、(SCM) 胸鎖乳突筋の露出まで皮下組織を解剖します。
    3. 完全撤回のため切開の近位および遠位側面に Weitlaner リトラクターを配置します。
    4. 左外頚静脈を公開する SCM 筋の外側縁に沿って解剖します。
    5. 血管穿刺は、以下の手順 4.1.8 - 4.1.14 で実現できます。挿入、フラッシュ、および静脈内 8 Fr カテーテルを確保します。
    6. 左の一般的な頸動脈の露出の SCM 筋の内側縁を解剖します。露出を高めるために Weitlaner リトラクターを配置します。
    7. 気管の外側縁に沿って縦結合組織を解剖します。彼らが発生した場合は、胸腺を保持します。
    8. 頚動脈, 内頸静脈, と迷走神経を含む頚三角形を公開します。その軌道を決定する総頸動脈を触診します。
    9. 慎重に静脈と神経から頸動脈を切り裂きます。
    10. 次の手順 4.1.8 - 4.1.14 頸動脈穿刺を実行します。挿入、フラッシュ、および前述した動脈 5 Fr カテーテルを固定します。
    11. 4.1 の手順を繰り返します。郭清と右外頚静脈と右総頚動脈の分離。
    12. 右総頚動脈の周り 4 mm 頸動脈流プローブを配置します。フロー プローブと最適なフロー シグナルの容器間の探触子ゲルを適用し、キャプチャします。
    13. 次の手順 4.1.8-4.1.14 9 Fr イントロデューサー シースを使用して右外頚静脈を cannulate します。フラッシュ、場所にカテーテルを固定します。3-0 ナイロン縫合糸を使用して、穿刺部位の皮膚の一時的な実行中の閉鎖を行います。

5. 動脈カテーテル挿入

  1. 注入ポート、近位のポート、および食塩 (NS) とカテーテルの遠位のポートをフラッシュし、トランスデューサーに接続します。遠位のポートは、中心静脈圧 (CVP) ポートとして近位のポートを指定しながら肺動脈 (PA) ポートとして指定されます。
  2. カテーテルを移動することによってモニターのアイテム トレースをチェックします。これは、カテーテルが機能していることを確認します。
  3. 滅菌スリーブを介して PA カテーテルを進めます。
  4. 3 cm3の注射器を使用して、インフレをテストする空気の 1.5 cm3以上で PA カテーテルのバルーンを膨らませます。挿入シースにカテーテルを挿入してバルーンを収縮させます。
  5. 9 Fr 挿入シースを介して PA カテーテルを挿入します。少なくとも 18 cm 用 PA カテーテルを挿入すると、空気の 1.5 cm3以上でバルーンを膨らませます。
  6. ゆっくり PA カテーテルを進めるし、挿入時に不整脈のモニターを確認します。心室 ectopy 場合ふくらませ、進行を予防するために、バルーンを収縮させます。挿入は、任意の方法では困難になると、バルーンの空気を抜く必要があり、カテーテルを撤回し再挿入する必要があります。
  7. 肺動脈楔入圧 (PWP) に pa (RA) 右心房から右心室 (RV) への移行を評価するモニターを観察します。
  8. バルーンを収縮し、PA トレースをモニターに返すことを確認します。
    注: 右外頚静脈に挿入部位からカテーテルの適切な長さは、約 45-55 cm です。
  9. PA 内カテーテルの位置を確保するために滅菌スリーブの端を挿入シースに接続します。
  10. 心拍出量 (CO) と (svo-シェレメーチエボ2) 静脈血酸素の飽和を取得するキャプチャ ユニットに PA のカテーテルの挿入ポートを接続します。
  11. 監視システム PA カテーテルを調整します。体の長さと動物の重量を使用して、動物の監視システム PA カテーテルの体内の校正を実施します。酸素飽和度とヘモグロビン レベルを使用してさらに校正用静脈血ガスを使用します。

6. 膀胱のチューブ

  1. 10 刃メスによる正中線で 5 cm より低い腹部切開を行います。
  2. 皮下組織と白線を解剖、電気焼灼器を使用してアルバ。解剖時に各レイヤーを視覚化します。
  3. 膀胱を extracorporealize します。
  4. 2 つの DeBakey 鉗子で尿管の開口部から腹側表面に膀胱を把握します。
  5. 電気焼灼器を使用して、内部ルーメンを公開する、膀胱に小さな開口部を作る。
  6. 吸引を使用して、膀胱腔内から任意の尿を削除します。手術用スポンジは、尿、膀胱外の偶発的な流出に使用できます。
  7. 4-0 ポリプロピレン縫合糸を使用して、膀胱の一時的な巾着閉鎖を行います。
  8. 膀胱腔内 18 Fr の Foley カテーテルを置き、バルーンを膨らませる 10 cm3の注射器を使用します。フォーリー カテーテルに尿排液バッグを接続し、オペレーティング テーブルの側に固定します。
  9. 膀胱内腔に Foley カテーテルを保護する 4-0 ポリプロピレン縫合糸を結ぶ。
  10. 3-0 ナイロン縫合糸を使用して腹壁穿刺部位の皮膚の一時的な実行中の閉鎖を実行します。

7. 完全および部分的な大動脈バルーン カテーテル挿入

  1. いずれか、完全または部分的な大動脈閉塞バルーンカテーテルを受信する動物をランダムに。
  2. 260 cm 14 Fr 挿入までを硬いガイドワイヤー右大腿動脈にシースし、超音波検査腹部や胸部の大動脈 supraceliac 大動脈 (ゾーン 1) にそれを導く、0.035 を挿入します。
  3. 次の出血オクルー ジョンを実行する大動脈のゾーン 1、ガイドワイヤーを閉塞バルーンカテーテルを挿入します。
  4. ゾーン 1 の超音波検査で大動脈に大動脈閉塞バルーンカテーテルの最終的な位置を確認します。

8. 術中血行動態と研究室の監視

  1. 侵襲カテーテル チューブ、トランスデューサーと血行動態モニターするためにチューブを用いた監視システムへの接続を確認します。侵襲的なモニタリング システムは、正確な監視を確保するため動物の心のレベルで 'ゼロ' する必要があります。
  2. 近位と遠位の地図など心拍数 (HR)、CVP、CO、PA 圧力、SVO2、呼気 CO2体温、実験を通して生理学的データを記録。
  3. 実験の残りの間に 15 分毎に出血やバルーン インフレーション段階中にこれらの変数 5 分ごとを記録します。
  4. 4 の時点で採血を収集: ベースライン (BL)、ショック後 (PS)、後蘇生 (PR)、実験の終了 (E)。血液 10 mL、各時点での血清中および血漿の分析のため収集されます。
  5. クローラー式注射器で血液の最大 1 mL を集めることによって動脈血ガス (ABG) サンプリングを実行します。各上記の時間ポイントで ABG サンプリングを実行し、また実験中に必要なとき。血液ガス分析装置を使用して、分析のため。
    注: 各サンプルを分析し、10 分以上の遅れは、結果16の効率を減らすことができますので、採血の 10 分以内。

9. 出血

  1. TBV を計算します。
    ML で TBV = g の重量× 0.06 + 0.77
  2. 最初 7 分上半分と次の 13 分上にもう半分 20 分削除の期間にわたって自動ポンプを用いた TBV の 35% を出血します。
  3. 標準的な血液コレクション バッグで血を収集します。将来輸血を見越して 4 ° C で保存します。
  4. マップは、以下の 30 mmHg 低下した場合の出血を停止、イソフルランをオフに、NS の 50-100 mL のボーラスを管理します。
  5. マップが 30 mmHg に返されるときは、出血を再起動します。

10. 大動脈バルーン閉塞カテーテル インフレと全血の蘇生

  1. 9-12 cm3以上追加バルーン インフレが指摘した遠位のマップ次の減少まで、または空気の大動脈閉塞バルーンカテーテルを膨らませます。
  2. 完全な大動脈バルーン閉塞カテーテルの残しながら遠位大動脈の流れを容易にする部分の大動脈バルーン閉塞カテーテルからワイヤを削除します。カテーテルの移行を排除するため超音波検査を使用してゾーン 1 に大動脈バルーン閉塞カテーテルの位置を確認します。
  3. 中断された 3-0 ナイロン縫合糸を使用して皮膚にカテーテルを固定します。
  4. 大動脈閉塞症の 40 分は、次の自動化されたポンプを使用して 20 分間全血、TBV経由で左大腿静脈カテーテルの 20% に等しいボリューム内の動物を蘇生します。暖かい血液を輸血、40 ° C の温度をターゲット用します。
  5. 蘇生後、バルーン 5 分間かけて徐々 に収縮します。
  6. 14 Fr 挿入シースから大動脈閉塞バルーンカテーテルを削除します。
  7. 監視血行動態密接にこの時間の間に関連する低血圧を虚血再灌流障害の既知のリスクを与えられました。

11. クリティカルケア、観察、および回復

  1. 生理学研究所パラメーターの継続的な監視と 4 h のための動物を観察します。
  2. 維持輸液 (50 ml/h で NS 注入) を提供します。
  3. CVP がターゲットを下回る 20 ml/kg ボーラス続いて NS の 30 ml/kg ボーラス投与による 6 mmHg の CVP をターゲットします。毎時流体の応答性を評価します。
  4. ノルエピネフリン投与 (0.024 mg/ml) を使用して 60 mmHg の地図をターゲットします。
  5. 毛布を使用して 38-40 ° C の生理学的な温度を維持します。
  6. 4 時間の期間の終わりに、ナトリウム 100 mg/kg のペントバルビ タール注入と動物を安楽死します。

12. 剖検

  1. 動物からすべての重要な行とチューブを取り外します。
  2. 正規の氷が付いている容器を準備し、体内から除去後すぐに臓器組織を凍結するオペレーティング テーブルの横に置いてください。
  3. メスを使用して、皮膚、皮下組織、筋肉、大胸筋、肋軟骨を介して解剖左の胸骨の境界に沿って 6 cm 縦に長い切開を行います。心臓と肺を公開する胸腔内を入力します。
  4. 心嚢膜をメスで切開することで心の底から削除し、鉗子を使用して中心の頂点をつかみます。メスを使用すると、頂点で、心の 5 × 5 cm のセクションをカットします。
  5. 肺の基部の前縁から肺の 5 × 5 cm のセクションをカットするのにはさみを使用します。
  6. 腹部、腹部の内臓を公開の前正中線切開は、開胸を拡張します。
  7. 肝臓の左葉 5 × 5 cm のセクションをカットして鉗子を使用します。
  8. 脾臓からサンプルを取得するためには、同じ処理を繰り返します。
  9. 右手を使って、腎臓をつかむ左後腹膜を入力するウィンドウを作成します。腎実質を動員後、腎動脈、静脈、尿管を縦断面します。腎被膜を削除します。
  10. 軽く 5 cm 長い部小腸から便を絞るし、腸間膜から腸の 5 cm の長いセクションをカットするはさみを使用してください。
  11. メスを使用して、大腿部から大腿四頭筋の 5 × 2 cm の長いセクションをカットします。
  12. さらにこれらのサンプルを遠心管に配置する小さなセクションにそれらを切断することによって処理します。ドライアイスまたは液体窒素にチューブを配置することによってこれらの組織のサンプルをフラッシュ-凍結。
  13. 組織学的評価のための組織の部分を細かくカット 3 センチを修正するのにホルマリン溶液 50 ml の円錐管を使用します。

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結果

血行動態と生理学的なパラメーター:

マップは、出血 (図 3 a - 3 D) 後すぐに減少しました。バルーン インフレ段階で完全閉塞群の動物は (図 3A3B) の部分的な閉塞のグループの動物と比較して高い近位地図を経験しました。バルーンの膨張時平均遠位マップは完全閉塞群の部分的な閉塞群で高く (平均遠位地図、気球のインフレーション段階; 部分: 31 ± 2.9 mmHg、完全な: 16.5 ± 1.14 mmHg;p > 0.05) 部分の遠位大動脈フロー (図 3および3 D) を反映しました。次の蘇生、近位および遠位マップは両方のグループに増加し、次の (3 a の数字 3...

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ディスカッション

このプロトコルでは、豚の出血性ショック モデルを強調表示されます。このモデルは、信頼性が高く、再現性のある16,17,18,19示されています。これに似たようなモデルは、動物生理学16,20に出血性ショックの影響を調べていくつかの科学的研究で採用されています。さらに、このモデルはまたマーク付きの成功12,13,16,19、出血性ショックの両方の薬理学的、外科的治療介入をテストするため使用されています

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開示事項

この作品は、陸軍衛生研究資材コマンド契約番号の下によってサポートされてW81XWH-16-C-0102。ビュー、意見や調査結果がこのレポートに含まれているもの、ように他のドキュメントで指定された場合を除き、軍位置、方針、または決定の公式部門としてない解釈する必要があります。

謝辞

動物の研究援助のレイチェル オコネルとジェシカ ・ リーを認識したいと思います。我々 はまた少佐一般ハロルド Timboe、MD、MPH、米国軍 (中国と)、アドバイザーとこのプロジェクトの指導者をされているを確認したいと思います。

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材料

この記事で使用された材料の一覧
名前会社カタログ番号コメント
ヨークシャー-ランドレース豚ミシガン州立大学獣医農場
麻酔:テラゾールファイザー用量:2-8 mg / kg;IM
抗コリン作用薬:アトロピンザー用量:1mg、IM
麻酔:イソフルランバクスター用量:1-5%、INH
ベタジンハムコ
アルコール70%ハムコNDC 0395-4202-28
Datex-Aespire麻酔器ヘルスケア7900
管内チューブDEE20170518動物(6.5または7.0F)
喉頭鏡ミラー85-0045
スティレットハドソンRCI5-151--1
Jelco 20G IVカテーテルミスメディカル4054
手術室モニター(バイタルサインモニター)SurgiVetアドバイザーV9201、少なくとも2
手術用ガウンキンバリークラーク90142外科医に適したサイズを使用してください。
滅菌手術用手袋Cardinal Health (Allegiance)22537-570外科医に適したサイズを使用してください。
焼灼ペンシルMedlineESPB 2000
吸引チューブMedlineDYND50251
Sunction チップ: YankauerMedlineDYND50130
Bovie Aaron 1250 電気焼灼ユニットBovie Medical Co. FLBOV-A1250U
サルペルブレード - サイズ #10Cardinal Health (Allegiance)32295-010
メスハンドルマーティン10-295-11
デバキー鉗子ロボズRS-7562
ワイトランダー リトラクターロボズRS-8612
メイヨーはさみロボズRS-76870SC
陸海軍リトラクターテレフレックス164715
ミクスター 直角鉗子テレフレックス175073
5F (1.7 mm) 11 cm 挿入シース 0.35 インチ GuidewireBoston Scientific16035-05B
8F (2.7 mm) 11 cm 挿入シース 0.35 インチ GuidewireBoston Scientific16035-08B
20G アングル イントロデューサー ニードルアローAK-09903-S
14F (4.78 mm) 13 cm 挿入シース 10F 拡張器付きCook MedicalG08024
2-0 シルク 18インチ 45 cmエチコンA185H
3-0 ビクリル 36インチ 90 cmエチコンJ344H
3-0 ナイロン 18インチ 45 cmエチコン663G
4-0 プロレン 30インチ 75 cmエチコン8831H
20 ml シリンジメトロニック/コヴィディエン8881512878
3 mL シリンジメトロニック/Covidien1180300555
6 mL シリンジMetronic/Covidien1180600777
1000ml 0.9% 生理食塩水Baxter2B1324X
フォーリーカテーテル (18F 30 cc)Bard0166V18S
尿ドレナージバッグBard154002
9F 10 cm 挿入シース矢印AK-09903-S
Swan-Ganz 肺動脈カテーテル (8F)Edwards Lifesciences co. CA746F8
Carotid Flow Probe SystemTransonic, Ithaca, NY3, 4, or 6 mm probes
SABOT catheterHayes Inc.
CODAバルーンカテーテルCook Medical8379144
Ultrasound, M-TurboSonoSite
Amplatz Stiff Guidewire (0.035 inch, 260 cm)Cook MedicalG03460
動脈血ガスシリンジSmiths Medical4041-2
動脈血ガス分析器Nova BiochemicalABL800
MasterflexポンプコールパーマーHV-77921-75
採血バッグテルモ1BBD606A
マクロIVドリップセットホスピーラ12672-28
ペントバルビタールファイザー用量:100mg / kg;IV
エッペンドルフ チューブソレンソン11590
50 cc コニカル チューブファルコン352097
ホルマリンフィッシャーブランド431121
ベア ハガー ノーマザーミア システムアリザント ヘルスケア インク
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参考文献

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