ワンポットビエンツマティックカスケードを確立することにより、フラバノンからのフラボノールの生合成

Zhiping Zhang; Shuhang Fan; Zhiqiang Chen; Yanzhi He; Mengfei Huang; Li Ding; Yanyan Zhang; Lin Chen; Xinyue Zhang

doi:10.3791/59336

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方法論記事

ワンポットビエンツマティックカスケードを確立することにより、フラバノンからのフラボノールの生合成

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DOI:

10.3791/59336

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2019年8月14日

Zhiping Zhang¹ , Shuhang Fan¹ , Zhiqiang Chen¹ , Yanzhi He¹ , Mengfei Huang¹ , Li Ding¹ , Yanyan Zhang⁵ , Lin Chen¹ , Xinyue Zhang¹^,²^,³^,⁴

¹College of Bioscience and Biotechnology, Yangzhou University, ²Key Laboratory of Prevention and Control of Biological Hazard Factors (Animal Origin) for Agrifood Safety and Quality, Ministry of Agriculture of China, Yangzhou University, ³Joint International Research Laboratory of Agriculture & Agri-Product Safety, Yangzhou University, ⁴Jiangsu Co-innovation Center for Prevention and Control of Important Animal Infectious Diseases and Zoonoses, ⁵The Testing Center, Yangzhou University

この記事について

サマリー

フラボノールの誘導は、ヘルスケアおよび食品産業におけるその応用に不可欠です。ここでは、フラバノンからのフラボノールの生合成のための詳細なプロトコルを提供し、他のアプローチに対する重要なステップとその利点について議論する。

要約

フラボノールは、様々な生物学的および薬理学的活動を伴うフラボノイドの主要なサブクラスである。ここでは、フラボノールのインビトロ酵素合成の方法を提供する。この方法では、Atf3hおよびAtfls1は、フラボノールの生合成経路における2つの主要遺伝子を、エシェリヒア大腸菌においてクローニングおよび過剰発現する。組換え酵素は、アフィニティカラムを介して精製され、その後、特定の合成バッファーにビエンザイマティックカスケードが確立されます。2つのフラボノールは、例としてこのシステムで合成され、TLCおよびHPLC/LC/MS分析によって決定される。この方法は、他のアプローチよりもフラボノールの誘導に明らかな利点を表示します。それは時間と省力化および非常に費用効果が大きい。反応は正確に制御され易く、従って大量生産のためにスケールアップされる。対象製品は、システム内の単純なコンポーネントにより、簡単に精製できます。しかし, このシステムは、通常、フラバノンからフラボノールの生産に制限されます。.

概要

フラボノールは、植物フラボノイドの主要なサブクラスであり、植物の開発と色素沈着1、2、3^に関与しています。さらに重要なことに、これらの化合物は、抗癌4、5、抗酸化6、抗炎症7、抗肥満8、抗高血圧症などの健康に有益な活動の広い範囲を有する、および記憶リコール^特性10は、これらの植物由来二次代謝産物に関する多数の研究につながる。伝統的に、これらの化合物は、主に有機溶媒を用いた植物抽出に由来する。しかし、植物11、12、13の中身が非常に低いため、ほとんどのフラボノールの生産コストは高いままで、ヘルスケアや食品への応用に大きな制限を課しています。業界。

過去数十....