動物の脳機能マッピングは、リアルタイムの機能的磁気共鳴画像法(fMRI)実験セットアップの恩恵を受けることができます。動物MRIシステムに実装された最新のソフトウェアを使用して、小動物fMRIのリアルタイムモニタリングプラットフォームを確立しました。
方法論記事
動物の脳機能マッピングは、リアルタイムの機能的磁気共鳴画像法(fMRI)実験セットアップの恩恵を受けることができます。動物MRIシステムに実装された最新のソフトウェアを使用して、小動物fMRIのリアルタイムモニタリングプラットフォームを確立しました。
動的fMRI応答は、麻酔下または覚醒状態の動物の生理学的条件によって大きく異なります。私たちは、取得中にfMRI応答を瞬時にモニターするように実験者を導くリアルタイムfMRIプラットフォームを開発し、動物の生理機能を変更して動物の脳で目的の血行動態応答を達成することができます。リアルタイムfMRIセットアップは、14.1Tの前臨床MRIシステムに基づいており、麻酔をかけたラットの一次前足体性感覚皮質(FP-S1)における動的fMRI応答のリアルタイムマッピングを可能にします。リアルタイムfMRIプラットフォームは、fMRI信号の変動につながる交絡源を調査するための遡及的分析の代わりに、カスタマイズされたマクロ機能とMRIシステムの一般的な神経画像解析ソフトウェアを使用して動的fMRI応答を識別するためのより効果的なスキームを提供します。また、動物の脳機能研究のための即時のトラブルシューティングの実現可能性とリアルタイムのバイオフィードバック刺激パラダイムを提供します。
機能的磁気共鳴画像法(fMRI)は、血行動態応答1、2、3、4、5、6、7、8、9、例えば、血中酸素レベル依存性(BOLD)、脳内の神経活動に関連する脳血液量および流量信号を測定する非侵襲的方法である。動物実験では、血行動態信号は、麻酔10、覚醒している動物のストレスレベル11、ならびに潜在的な非生理学的アーティファクト、例えば、心拍動および呼吸運動12、13、14、15によって影響を受ける可能性がある。タスク関連および安静状態機能ダイナミクスおよび接続性マッピング16、17、18、19のためのfMRI信号の遡及的分析を提供するために多くの後処理方法が開発されているが、動物の脳20におけるリアルタイムの脳機能マッピングソリューションおよび瞬間的な読み出しを提供する技術はほとんどない(そのほとんどは、主にヒト脳マッピング21に使用される、 22,23,24,25,26,27)。特に、この種のリアルタイムfMRIマッピング法は、動物実験では欠けています。fMRIプラットフォームを構築して、リアルタイムの脳状態依存的な生理学的病期の調査を可能にし、動物の脳機能研究にリアルタイムのバイオフィードバック刺激パラダイムを提供する必要があります。
本研究では、MRIコンソールソフトウェアのカスタマイズされたマクロ機能を備えたリアルタイムfMRI実験セットアップを示し、麻酔をかけたラットの一次前足体性感覚皮質(FP-S1)における誘発されたBOLD-fMRI応答のリアルタイムモニタリングを示します。このリアルタイムセットアップにより、既存の神経画像解析ソフトウェアである機能神経画像解析(AFNI)28を使用して、機能マップで進行中の脳の活性化と個々の時間コースをボクセル単位で視覚化できます。動物実験のためのリアルタイムfMRI実験セットアップの準備は、プロトコルに記載されています。動物のセットアップに加えて、画像処理スクリプトと並行して、最新のコンソールソフトウェアを使用してリアルタイムfMRI信号の視覚化と分析を設定するための詳細な手順を提供します。要約すると、動物実験用に提案されたリアルタイムfMRIセットアップは、MRIコンソールシステムを使用して動物の脳内の動的fMRI信号を監視するための強力なツールです。
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この研究は、ドイツ動物福祉法(TierSchG)および動物福祉実験動物条例(TierSchVersV)に従って実施されました。ここに記載されている実験プロトコルは、倫理委員会(§15 TierSchG)によってレビューされ、州当局(ドイツ、バーデンヴュルテンベルク州テュービンゲンのRegierungspräsidium)によって承認されました。
1. 小動物研究のためのBOLD-fMRI実験セットアップの準備
2.カテーテル法と換気手術
3.動物をMRIスキャナーの中に置きます
4. 解剖学的MR画像の測定
5. リアルタイムfMRIソフトウェアのセットアップとfMRI応答の可視化
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図3と図4は、代表的なリアルタイムボクセル単位のBOLD-fMRIタイムコースと、電気前足刺激(3 Hz、4 s、パルス幅300 us、2.5 mA)を使用した関数マップを示しています。fMRI設計パラダイムは、10回の刺激前スキャン、3回の刺激スキャン、および合計8回のエポック(130回のスキャン)の12回の刺激間スキャンで構成されています。合計スキャン時間は3分15秒(195秒)です。図3は、リアルタイム取得フォーマットにおけるブロック設計パラダイム(赤線)に対応する対側FP-S1のボクセル単位の時間経過(黒線)を示しています。図4は、電気前足刺激に対応する活性化されたBOLDマップを示す。活性化された領域が検出され、色付きのクラスター(赤と黄色の色)として表示されます。実験者は、AFNIソフトウェアの「クラスター」機能を使用して、クラスター化されたボリュームをインタラクティブに探索し、オーバーレ...
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fMRI信号のリアルタイムモニタリングは、実験者が動物の生理機能を調整して機能マッピングを最適化するのに役立ちます。覚醒している動物における運動アーチファクト、ならびに麻酔効果は、fMRI信号の変動性を媒介する主要な要因であり、信号の生物学的解釈をそれ自体で混乱させる31,32,33,34,35,36,37,38.リアルタイムfMRIプラットフォームは、スキャンパラメータと麻酔投与スキームの最適化を支援するための瞬時の情報を提供します。また、リアルタイムの脳血行動態応答を使用して、マルチモーダル脳機能研究にお...
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Sascha KöhlerはBruker BioSpin MRI GmbHの従業員です。
PV 5のリアルタイムfMRIをセットアップするためのAFNIスクリプトを共有してくれたD.Chen博士とC.Yen博士、およびソフトウェアサポートを提供してくれたAFNIチームに感謝します。この研究は、NIHブレインイニシアチブの資金提供(RF1NS113278-01、R01 MH111438-01)、およびドイツ研究財団(DFG)のマルティノスセンターへのS10機器助成金(S10 RR023009-01)、およびマックスプランク協会からの内部資金提供によってサポートされました。
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| 名前 | 会社 | カタログ番号 | コメント |
|---|---|---|---|
| 14.1T ブルカー MRI システム | ブルカー BioSpin MRI GmbH | N/A | |
| A365 刺激アイソレーター | World Precision Instruments | N/A | |
| AcqKnowledge Software | Biopac | RRID:SCR_014279, http://www.biopac.com/product/acqknowledge-software/ | |
| AFNI | Cox, 1996 | RRID:SCR_005927, http://afni.nimh.nih.gov | |
| CO2SMO (ETCO2/SpO2 モニター)、モデル 7100 | Novametrix Medical Systems Inc | N/A | |
| イソフルラン | CP-Pharma | Cat# 1214 | |
| Master-9 | A.M.P.I | N/A | |
| Nanoliter Injector | World Precision Instruments | Cat# NANOFIL | |
| 臭化パンクロニウム | Inresa Arzneimittel | Cat# 34409.00.00 | |
| ParaVision 6 | Bruker BioSpin MRI GmbH | RRID:SCR_001964 | |
| Phosphate Buffered Saline (PBS) | Gibco | Cat# 10010-023 | |
| ラット:Sprague Dawley ラット | Charles River Laboratories | Crl:CD(SD) | |
| SAR-830/AP Ventilator | CWE | N/A | |
| α-chloralose | Sigma-Aldrich | Cat# C0128-25G;RRIDの |
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