Method Article

1匹のウサギにおける血行動態の異なる嚢状エラスターゼ消化動脈瘤の作製

DOI:

10.3791/62518

⸱

April 15th, 2021

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Department of Neurosurgery, Kantonsspital Aarau, 2Cerebrovascular Research Group, Department for BioMedical Research, University of Bern, 3Experimental Surgery Facility, Department for Biomedical Research, Faculty of Medicine, University of Bern

In This Article

Summary

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

このプロトコルは、異なる血行動態(断端と分岐星座)を持つ2つのエラスターゼ消化動脈瘤を持つウサギモデルを作成するための手順を説明しています。これにより、1匹の動物内で異なる血管構造および血行動態状態の動脈瘤における新しい血管内デバイスの試験が可能になります。

Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

ヒト頭蓋内動脈瘤に近い血行動態、形態学的、および組織学的特徴を持つ前臨床動物モデルは、病態生理学的プロセスの理解と新しい治療戦略の開発とテストにおいて重要な役割を果たします。この研究は、新しいウサギ動脈瘤モデルを記述することを目的としています 同じ動物内で異なる血行動態を持つ2つのエラスターゼ消化嚢状動脈瘤の作成を可能にします。

平均体重4.0(±0.3)kg、平均年齢25(±5)週齢の5匹の雌のニュージーランド白ウサギに、顕微手術断端および分岐部動脈瘤の作成を受けました。1つの動脈瘤(断端)は、腕頭体幹の起点における右総頸動脈(CCA)の露出によって作成されました。一時的なクリップがCCAの原点に適用され、別のクリップが2 cm上に適用されました。このセグメントを100Uのエラスターゼの局所注射で20分間処理した。第2の動脈瘤(分岐部)は、エラスターゼ処理された動脈嚢を右CCAから左CCAの端から側への吻合部に縫合することによって作成されました。開存性は、作成直後に蛍光血管造影によって制御されました。

平均手術時間は221分であった。同じ動物における2つの動脈瘤の作成は、合併症なしにすべてのウサギで成功した。エラスターゼインキュベーションによる極端な組織反応と即時管腔内血栓症を示した1つの分岐動脈瘤を除いて、すべての動脈瘤は手術直後に特許を取得しました。手術中および最大1カ月の追跡期間中の死亡率は観察されなかった。罹患率は一過性前庭症候群(ウサギ1匹)に限定され、1日以内に自然に回復した。

ここで初めて実証されたのは、断端と分岐の血行動態特性と高度に変性した壁の状態を備えた2つの動脈瘤ウサギモデルを作成する可能性です。このモデルは、異なる流動条件下での動脈瘤生物学に基づいて、自然な経過および潜在的な治療戦略の研究を可能にする。

Introduction

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頭蓋内動脈瘤は、破裂後の死亡率が50%に達し、患者の10〜20%で長期障害がある重篤な状態です1。過去10年間で、血管内治療の選択肢が急速に発展しましたが、同時に、コイル状の後、動脈瘤再開通の最大33%で再発率も増加しています2,3。動脈瘤の閉塞と再開通の根底にある病態生理学をよりよく理解し、新しい血管内デバイスの開発とテストのために、現在、血行動態、形態学的、および組織学的特徴がヒト頭蓋内動脈瘤の特徴を模倣する信頼性の高い前臨床モデルが必要です4,5,6.今日の時点で、前臨床試験の標準として定義されたモデルはなく、広範囲の種と技術が研究者に利用可能です7,8。

しかしながら、ウサギは、その頸部動脈とヒト脳血管との間のサイズおよび血行力学的類似性、ならびにその類似した凝固および血栓溶解プロファイルのために特に興味深い種である。総頸動脈(CCA)にエラスターゼ消化嚢状動脈瘤を有するいくつかのモデルは、流動条件、幾何....

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Protocol

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注:実験はスイスのベルン州の動物管理のための地方委員会(申請番号BE108 / 16)によって承認され、すべての動物の世話と手順は、制度上のガイドラインと3Rの原則15,16に従って実施されました。データは ARRIVEガイドラインに従って報告されます。周術期管理は、理事会認定の獣医麻酔科医によって行われました。この研究では、平均体重4.0(±0.3)kg、平均齢25(±5)週齢の雌のニュージーランド白ウサギを、22〜24°Cの室温で飼育し、水、ペレット、干し草に自由にアクセスできる12時間の明暗サイクルで飼育しました。

1.術前段階と麻酔

  1. 獣医麻酔医協会と欧米獣医麻酔鎮痛学会が推奨する臨床検査を実施し、各動物の体重を測定し、粘膜を評価し、毛細血管の補充時間と脈拍の質を文書化し、肺と心臓の聴診と腹部触診を行うことにより、ウサギが健康であることを確認します。
  2. 臨床所見に基づいて、各ウサギ17に米国麻酔科学会(ASA)分類を帰属させる。ASA Iスコアの動物にのみ手術を行います。
  3. 両方の外耳を剃り、耳介動脈と静脈にプリロカイン-リドカインクリームを塗ります。ケタミン20 mg / kg、デクスメデトミジン0.1 mg / kg、メタドン0.3 mg / kg....

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Results

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

断端と分岐部動脈瘤の作成は、術中合併症なしに5匹のニュージーランドの白ウサギすべてで成功しました。手術中または24±2日間の追跡期間中に死亡率は観察されなかった。1匹のウサギは前庭症候群と右側の失明を伴う術後合併症を経験しました。動物は24時間後に完全かつ自発的に回復した。この合併症は、その通常の活動(自由な動き、水と食物の摂取、他の動物との相互作用)を妨げず、特別な治療を必要としませんでした。自発的な動脈瘤破裂はなかった.

手術の平均期間は221分(190〜255分の範囲)でした。エラスターゼインキュベーションと即時血栓症による極端な組織反応を示した1つの分岐動脈瘤を除いて、すべての動脈瘤は手術直後に特許を取得しました。経過観察時に,磁石共鳴血管造影(図3)および組織摘出後の肉眼的検査(図4)により動脈瘤開存性を確認した。手術中にすでに血栓を起こした分岐部動脈瘤を除いて、すべての動脈瘤はフォローアップエンドポイントで依然として特許を取得していました。これにより、.......

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Discussion

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動脈瘤作成のための最も一般的な技術は、開放法または血管内法のいずれかを介して、右CCAの起点に断端動脈瘤を作成することを含む。このモデルは、時間20,21とともに開いたままの安定した非成長動脈瘤であることが検証されています。第2の可能な技術は、左のCCAを吻合し、分岐部14、22、23に動脈瘤ポーチを縫合することによって動脈分岐動脈瘤を顕微手術で作成することを含む。どちらの方法も血管内デバイスの試験および病態生理学の研究に適していることを示しているが、動脈瘤の形態、したがって、関与する血行動態力および流動特性は実質的に異なる。既存のモデルでは、1匹につき1つの動脈瘤タイプしか作成できないことを考えると、分岐タイプの動脈瘤の自然な経過と断端タイプの動脈瘤の自然な経過を直接比較することは現在のところ困難です。

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Disclosures

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

著者は利益相反を宣言しません。

Acknowledgements

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著者らは、ハンス・ルドルフ・ウィドマー教授、ルカ・レモンダ博士、ハビエル・ファンディーノ教授の科学的支援と技術的貢献に感謝します。手術中のアドバイスをしてくれたオルギカ・ベスラックと、彼の助けをしてくれたケイ・ネッテルベックに特に感謝します。さらに、ダニエラ・カソーニDVM、博士号、医学博士に感謝します。ルイサナガルシア、PD博士アレッサンドラベルガダーノ、カルロッタデトット博士の献身的な獣医サポート。

....

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Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
4-0 吸収性縫合糸Ethicon Inc., USAVCP292ZH
4-0 吸収性縫合Ethicon Inc., USAVCP304H
6-0 非吸収性縫合糸B. Braun, ドイツC0766070
9-0 非吸収性縫合糸B. Braun, ドイツG1111140
AdrenalineAmino AG1445419 any generic
AmiodaroneHelvepharm AG、一般的な
麻酔器Drä 5078567。他の
アスピリンサノフィ-アベンティス(スイス)SA622693任意の一般的な
トロピンLabatecファーマSA6577083任意の一般的な
バンドパスフィルター青ThorlabsFD1B他の
任意のバンドパスフィルター緑ThorlabsFGV9任意の他の
ビーマー血管クリップ(2x)B.ブラウンメディカルAG、Aesculap、スイスFD560R、他の
バイポーラ鉗子、他の
バイスペクトル指数(新生児)、その他の
血圧カフ(新生児)、その他の
Bycilcesスポットライト他の
クラモキシル、グラクソ・スミスクラインAG758808任意のジェネリック
デクスメデトミジンエバー ファーマ136740-1任意のジェネリック
エラスターゼシグマ アルドリッチE7885
心電図電極
エフェドリンアミノ AG1435734
エスモロールOrPha Swiss GmbH3284044
フェンタニル (静脈内使用)ヤンセン・シラグ AG98683
フェンタニル(経皮)Mepha Pharma AG4008286
FluoresceineCuratis AG5030376
FragminPfizer PFE Switzerland GmbH1906725
加熱パッドまたは加熱強制空気加温システム
等張性塩化ナトリウム溶液(0.9%)ゼニウスKABI336769
ケタミンPfizer PFE Switzerland GmbH342261
lid retractorApproach
LidocaineStreuli Pharma AG747466
Longuettes
MetacamBoehringer IngelheimP7626406Medication
MethadoneStreuli Pharma AG1084546 Sedaton
マイクロ鉗子 湾曲ウルリッヒ スイス、スイスU52-015-15
マイクロ鉗子  ストレート 2xウルリッヒ スイス、スイスU52-010-15
マイクロハサミウルリッヒ スイス、スイスU52-327-15
ミダゾラムアコード ヘルスケア AG7752484
針 23 G動脈切開
ニードルホルダー
O2-フェイスマスク
手術顕微鏡Wild Heerbrugg
PapaverinBichsel局所アプリケーション
ポビドン ヨウ素Mundipharma Medical Company任意のジェネリック
プリロカイン-リドカイン クレームエムラ
PropofolB. Braun Medical AG、スイス全身麻酔
パルスオキシメーター
直腸温プローブ(新生児)
Ringer LactateBioren Sintetica SAInfusion
RopivacainAspen Pharma Schweiz GmbH1882249局所麻酔
ScalpellSwann-Morton210
小動物シェーバー
軟部組織鉗子
軟部組織スプレッダー
ステンレス鋼スポンジボウル滅菌
マイクロスワブ
診器
手術ドレープ
手術用ハサミ
シリンジ 1 mL、2 mL、5 mL
Tris-BufferSigma Aldrich93302エラスターゼ溶液
血管クリップ アプリケーターB. ブラウン、ドイツFT495T
静脈および動脈カテーテル 22 G
血管ループアプローチ
ビデオカメラまたはスマートフォン
VitarubinStreuli Pharma AG6847559
Yasargil titan 標準クリップ (2x)B. Braun Medical AG, Aesculap, SwitzerlandFT242T
糸 はア、、フレ聴

References

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Grasso, G., Alafaci, C., Macdonald, R. L. Management of aneurysmal subarachnoid hemorrhage: State of the art and future perspectives. Surgical Neurology International. 8, 11(2017).
  2. Raymond, J., et al.

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