このコンテンツを表示するには、JoVEへの購読が必要です。 または、無料トライアルをお申し込みください。

方法論記事

リボフラビン-5′-リン酸の可視光光分解 による 病原体の不活化

2.1K 回視聴

⸱

DOI:

10.3791/63531

⸱

2022年4月6日

 ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Department of Biotechnology, Ming Chuan University, 2Department of Tourism and Leisure, Hsing Wu University, 3Department of Science Education and Application, National Taichung University of Education, 4Department of Soil and Environmental Sciences, National Chung Hsing University

この記事について

サマリー

ここでは、フラビンモノヌクレオチド(FMN)の光分解時に生成される活性酸素種を低強度の青色および紫色光照射下で不活化する病原菌を不活化するプロトコルを提示する。FMN光分解は、衛生プロセスのための簡単で安全な方法であることが実証されています。

要約

リボフラビン-5'-リン酸(またはフラビンモノヌクレオチド;FMN)は可視光に敏感です。活性酸素種(ROS)を含む様々な化合物は、可視光の照射によるFMN光分解から生成することができる。FMN光分解から発生するROSは、黄色ブドウ球菌(黄色ブドウ球菌)などの病原菌を含む微生物に有害です。本稿では、例として、可視光照射下でFMNが関与する光化学反応を介して黄色ブドウ球菌を不活性化するためのプロトコルを紹介します。FMN光分解中に生成されたスーパーオキシドラジカルアニオン()は、ニトロブルーテトラゾリウム(figure-abstract-1NBT)還元を介して評価されます。反応性figure-abstract-2種に起因する黄色ブドウ球菌の微生物生存率を使用して、プロセスの有効性を決定しました。細菌の不活化率はFMN濃度に比例します。紫色光は青色光照射よりも黄色ブドウ球菌の不活性化に効率的ですが、赤色または緑色の光はFMN光分解を促進しません。本稿では、衛生プロセスのための簡単で安全な方法としてのFMN光分解を示しています。

概要

リボフラビン-5′-リン酸(FMN)は、リビチル側鎖のリボフラビン5'位でのリン酸化によって形成され、エネルギーを生成するための多数の細胞プロセスのためにすべてのフラボタンパク質によって必要とされます。また、人体のいくつかの機能のためのビタミンの役割を果たします1。FMNは、リボフラビン2よりも約200倍水に溶けやすい。

細菌の抗菌光力学的不活性化(aPDI)は、細菌耐性の様式に依存しないため、細菌3,4に対する耐性を制御するための効率的な方法です。臨床的には、aPDIは、多耐性菌による院内皮膚の感染を減少させるために軟部組織感染症を治療するために使用されます5,6,7,8,9。aPDIはまた、活性酸素種(ROS)を生成することによって細胞死を引き起こす。スーパーオキシドラジカル()、一重項酸素、ヒドロキシルラジカル(figure-introduction-1•OH)、およびペルオキシルラジカルなどのROSは、活性酸素10,11,12を含み、通常は反応性13であるフリーラジカルまたは分子です。ROSによって引き起こされるDNA損傷と同様に、膜過酸化および内皮細胞の破壊もまた、細胞12におけるROSに起因する有害な生化学反応である。

病原性細菌に対するaPDIの使用は、塩化メチルチオニニウム14、PEI-ce6コンジュゲート15、ポルフィリン16、二酸化チタン17、トルイジンブルーO18、および酸化亜鉛ナノ粒子19などの化合物の存在下で微生物を不活性化するための可視光源またはUV光源を含む。トルイジンブルーOおよびメチレンブルーはフェノチアジニウム色素であり、メチレンブルーは毒性を有する。酸化亜鉛ナノ粒子とUV照射は、健康と環境への悪影響に関連しています。そのため、可視照射下での光分解による信頼性が高く、安全で、単純な光増感剤の開発は、さらなる研究に値します。

微量栄養素であるリボフラビンまたはFMNは毒性がなく、実際に食品の製造または給餌に使用されます20。FMNとリボフラビンはどちらも光照射に非常に敏感です2。UV1,2,21,22,23および青色光照射10,24の下で、これら2つの化合物は励起状態を達成する。光分解によって生成される活性化リボフラビンまたはFMNは、そのトリプレット状態に促進され、ROSが同時に生成されます2,25。Kumarらは、UV光によって活性化されたリボフラビンが病原性微生物におけるDNAのグアニン部分への傷害の増加を選択的に引き起こすことを報告した26。UV光の照射下で、光力学的に活性化されたリボフラビンは、二本鎖DNAにおいて、酸化ストレスのバイオマーカーである8-OH-dGの生成を促進することが実証されている27。黄色ブドウ球菌および大腸菌は、リボフラビンまたはFMN光分解中にROSによって不活性化されることが報告されています10、24、28。著者らによる以前の研究では、リボフラビンとFMNが関与する光分解反応が、クリスタルバイオレット、トリアリールメタン染料、および生成figure-introduction-2する抗菌剤を減少させ、クリスタルバイオレット28の抗菌能力のほとんどを排除することが示されました。フラビンアデニンジヌクレオチドまたはFMNに青色光を照射すると、得られたROSは、インビトロでの中毒のためにHeLa細胞にアポトーシスを生じます29。リボフラビンの存在下での光化学的処理を用いて、Cuiらはそれらの増殖およびサイトカイン産生を阻害することによってリンパ球を不活性化した30。

リボフラビンの光分解は、UV 10,24による血液病原体の不活性化に使用されるが、UV光照射下で血液成分が損なわれ得る30。また、UVに曝露された血小板は、それらの膜上の活性化マーカーP-セレクチンおよびLIMP-CD63の性能を徐々に増強することが報告されています。UVおよび高強度照射の細胞毒性を調べる必要があり、可視光を含むFMN光反応中に複雑で安全な光増感剤が非常に役立ちます。

より短い波長の光はより多くのエネルギーを持ち、細胞に深刻な損傷を引き起こす可能性がはるかに高くなります。しかしながら、適切な光増感剤の存在下では、低強度の紫色光の照射は病原性微生物を阻害することができる。したがって、紫色光を照射したときのFMNによる光増感と生成は、FMN光分解からのROSが細菌の figure-introduction-3 不活性化を増加させる経路を決定するために研究することが重要です。

抗菌剤の制御は一般的な問題であり、新しい抗生物質の開発には数十年かかることがよくあります。紫色光を照射した後、FMNによって媒介される光不活性化は、環境病原菌を全滅させることができる。この研究は、FMN光分解を促進し、したがってaPDIを生成するfigure-introduction-4ために紫色光を使用するin vitroで効果的な抗菌プロトコルを提示します。黄色ブドウ球菌の微生物生存率は、FMN誘発性aPDIの実現可能性を決定するために使用されます。

アクセスが制限されています。このコンテンツを表示するにはログインするか、トライアルを開始してください。

プロトコル

1. 光分解システムのセットアップ

  1. 図1に示すように、不透明なプラスチックカップ(8cm×7cm)の内側に6個の発光ダイオード(LED)(DC12V)を取り付けて、光分解システム31を確立する。
  2. 反応物(下記参照)をガラス試験管(直径13 mm、高さ100 mm)に加え、 図1に示すようにチューブをカップの上部に固定します。実験セットアップを25 ± 3°Cの安定した温度の部屋に置きます。
  3. 赤外線温度計による光分解反応全体のテストユニットの温度を監視および記録します。
    注意: 図2 は、校正されたUV-Vis光学分光計を使用して記録された、青、緑、赤、および紫の光の発光スペクトルを示しています。研究で使用された青、緑、赤、紫のLEDライトの吸光度の最大値に対応する波長は、それぞれ465、529、632、および405nmです。LEDチップは、照射実験中に装置を加熱することができます。したがって、各実験の光反応システム全体は、温度が25±3°Cに一定に保たれた部屋に置かれました。

2. FMNの光分解に及ぼす光波長の影響(図3)

  1. 100 mM リン酸カリウムバッファー(PB)中の0.1 mM FMN溶液を調製します(pH 7.8)。FMNサンプル(各3 mL)を青、緑、赤、または紫の光に10 W / m2 の強度で5分間さらします。コントロールとして、3 mLのFMN溶液を暗所に保ちます。
  2. UV/可視分光光度計を使用して、照射されたFMNサンプルの吸光度を250〜750nmの範囲で記録します。

3.ニトロブルーテトラゾリウム(NBT)還元法を検出figure-protocol-1します(図4)。

注:ここで使用したNBT還元法は、リボフラビン光反応のアッセイからわずかに変更されました。NBT還元法は、FMN光分解から発生するレベルfigure-protocol-2を評価するために使用される。光化学的に励起されたFMNは、まずL-メチオニンによってセミキノンに還元され、セミキノンは電子を酸素に供与して31を生じさせるfigure-protocol-3。生成されたfigure-protocol-4状態では、NBTをホルマザンに還元し、ホルマザンは560nmに特徴的な吸光度を有する32。

  1. 109.3 mgのL-メチオニンを73.3 mLのPB(100 mM;pH 7.8)に加えます。溶液をボルテックスしてL-メチオニンを溶解する。
  2. L-メチオニンが完全に溶解したら、10 mgのNBT粉末と1.53 mLの0.117 mM FMNを溶液に加えます。適用した反応溶液(すなわち、FMN、L-メチオニン、およびNBTの混合物)1 mLごとに、FMN、メチオニン、およびNBTの最終濃度はそれぞれ2.4 x 10-6 M、1.0 x 10-2 M、および1.6 x 10-4 Mです。
  3. 反応溶液(1 mL)を青色または紫色のLED光照射に10 W / m2 で1〜5分間さらします。
  4. 光化学反応によって生成された種を(560 nmの吸光度から)検出 figure-protocol-5 し、NBTを減少させ、ホルマザンを生成します。

4. FMN光分解後の 黄色ブドウ球菌 の生存率(図5)

  1. 黄色ブドウ球菌(BCRC 10451)のコロニーを培養プレートから15 mLスクリューキャップ試験管に採取した10 mLのLysogenyブロスに伝達します。振とう機で37°Cで16時間培養する。
  2. 0.5 mLの培養液を1.5 mLの遠沈管に移します。滅菌水を遠沈管に加え、培養液を600 nmで0.5の光学密度(OD600)(~6 x 107 CFU/mL)に希釈します。
  3. 培養液0.5 mLを1.5 mL遠沈管に移し、14,000 x g で10分間遠心分離し、上清をデカントして細胞ペレットを得た。
  4. ステップ4.3と同様に得られた細胞ペレットに1 mLのFMN緩衝溶液(PB溶液30、60、および120 μM FMN)を加え、ボルテックスします。照射コントロールの場合は、PBを1mL単独で添加します。
  5. 30 μM FMNとPBのみを含む生菌細胞液を各1 mLのガラス管に移し、紫色光を10 W/m2 で30分間照射します。
  6. 30、60、120 μM FMNとPBのみを含む生菌細胞液を各1 mLのガラス管に移し、20 W/m2 の青色光を120分間照射します。120 μM FMNを含む生菌細胞溶液1 mLをガラス管に別のガラス管を設置し、20 W/m2 の青色光を60分間照射します。
  7. 手順4.5および4.6の説明に従って試験管をセットアップし、厚いアルミホイルで覆います。これらのチューブはダークコントロールとして機能します。
  8. 照射チャンバー(およびダークコントロール)を9〜1°Cの冷蔵室に保管し±30〜120分の照射期間中。
    注:カップ内に配置されたLEDチップは、照射実験中に光反応システムを加熱する可能性があるため、LEDライトから放出される熱を無視することはできません。したがって、実験は9 ± 1°Cに維持された冷蔵室で実施されました。
  9. 照射後、各反応液から0.2 mLをルリア寒天(LA)プレートに移します。L字型のガラス棒でプレート上に細菌を広げ、37°Cで一晩インキュベートします。
  10. 一晩の成長後の 黄色ブドウ球 菌の生存可能なプレート数と不活性化率を計算します。
    注: 黄色ブドウ球菌 の不活性化率は、[1 -I / D] ×100%に等しい減少率として計算され、 I と D はそれぞれ照射されたサンプルとダークコントロールのCFUの数を示します。減少率は、不活性化率の負の値として定義されます。

5. figure-protocol-6黄色ブドウ球菌の検出(図6) 

  1. ステップ4で説明したように 黄色ブドウ球菌 サンプルを準備します。
  2. サンプルの細菌密度を滅菌水で600 nmで0.5の光学密度に希釈します(OD600、~6 x 106 CFU/mL)。0.5 mLの培養液を1.5 mLの遠沈管に移します。14,000 x g で10分間遠心分離し、上清をデカントして細胞ペレットを得た。
  3. 75 mL PBに0.1093 gのL-メチオニン、0.1 gのNBT、および25 mLのFMN(400、240、または120 μM)を追加します。適用される反応物1mLごとに、FMN、メチオニン、およびNBTの最終濃度はそれぞれ100(60または30)x 10-6 M、7.3 x 10-3 M、および1.2 x 10-3 Mです。
  4. 各反応剤溶液1mLを(すなわち、FMN濃度を変化させて)ステップ5.2のように得られた細胞ペレットに加える。紫色光を10W/m2 で10分間照射する。
  5. 混合物を14,000 x g で10分間遠心分離し、上清をデカントします。ペレットを1 mLのジメチルスルホキシド(DMSO)に再懸濁して、還元されたNBTを抽出します。560 nmの吸光度から産生 figure-protocol-7 種を検出します。

6.統計分析

  1. データを3つの独立した検定の平均±標準偏差(SD)として表します。
  2. 等分散2標本 t検定を適用して、2つの測定値が異なるかどうかを評価します。0.05< p値は統計的に有意と見なされます。

アクセスが制限されています。このコンテンツを表示するにはログインするか、トライアルを開始してください。

結果

FMNに対する光波長の影響
青、緑、赤、紫のLEDを使用して照射された0.1 mM FMNの吸光度スペクトルを 図3に示します。ダークコントロールのFMNには2つのピーク(372nmと444nm)があります。緑と赤の光は、スペクトルの変化が重要ではないため、効果はありません。一方、444 nmのFMNの吸光度は、10 W/m2 で5分間青色光照射後、紫色光をそれぞれ約19%、34%減少させ、青色/紫色光の照射がFMN光分解を増加させることが示唆された。

の検出 figure-results-1青色または紫色の光を使用して照射されたFMNから
NBT化は、32の形成

アクセスが制限されています。このコンテンツを表示するにはログインするか、トライアルを開始してください。

ディスカッション

光増感剤は、化合物の光化学反応を高めてROSを生成します。病原性微生物は、光増感剤の存在下で光照射することによって不活性化することができる。本研究では、外因性光増感剤FMNの紫色光照射により発生するROSに起因する 黄色ブドウ球菌 のaPDIを決定した。

図3に示すように、FMNの場合、紫色または青色光を用いた5分間の照射後に444nmの吸光度は有意に低下し、緑色または赤色光の照射下でのFMN吸光度に大きな変化はありません。NBT化は、電荷移動プロセス10、33を介したの形成figure-discussion-1を決定するために使用される。著者らによる以前の研究では、青色、緑色、または赤色光照射下でFMNを使用して、NBT還元を使用した...

アクセスが制限されています。このコンテンツを表示するにはログインするか、トライアルを開始してください。

開示事項

著者は利益相反を宣言しません。

謝辞

著者らは、Tak-Wah Wong博士とZong-Jhe Hsieh氏の実験支援に感謝している。

アクセスが制限されています。このコンテンツを表示するにはログインするか、トライアルを開始してください。

材料

この記事で使用された材料の一覧
名前会社カタログ番号コメント
青、緑、赤のLEDライトVita LED Technologies Co., 台南, 台湾DC 12 V 5050
ジメチルスルホキシドSigma-Aldrich, St. Louis, MO190186
赤外線温度計Raytek Co. Santa Cruz, CAMT4
LB brothDifco Co., NJ
L-MethionineSigma-Aldrich, St. Louis, MO1.05707
NBTBio Basic, Inc. カナダ オンタリオ
Power supplyChina tech Co., New Taipei City, TaiwanYP30-3-2
リボフラビン 5′-リン酸Sigma-Aldrich, St. Louis, MOR7774
RNaseNew England BioLabs, Inc. マサチューセッツ州
ソーラーパワーメーターTenmars Electronics Co., 台北, 台湾TM-207
黄色ブドウ球菌亜種 黄色ブドウ球バイオリソースコレクション研究センター(BCRC)、新竹市台湾 10451
UV-Vis光学分光計Ocean Optics、ダニーデン、フロリダ州USB4000
紫外可視分光光度計日立ハイテクサイエンス株式会社、東京、日本U-2900
Violet LEDLong-hui Electronic Co., LTD,東莞, 中国
州マーカムイプスウィッチ菌、

参考文献

  1. Jian, H. L., Cheng, C. W., Chen, L. Y., Liang, J. Y. The photochemistry of riboflavin. MC-Transaction on Biotechnology. 3, 1-11 (2011).
  2. Lin, Y., Eitenmiller, R. R., Landen, W. O. Riboflavin. Vitamin analysis for the health and food sciences. , CRC Press. 329-360 (2008).
  3. Xie, L. J., Wang, R. L., Wang, D., Liu, L., Cheng, L. Visible-light-mediated oxidative demethylation of N(6)-methyl adenines. Chemical Communications. 53 (77), 10734-10737 (2017).
  4. Tim, M. Strategies to optimize photosensitizers for photodynamic inactivation of bacteria. Journal of Photochemistry and Photobiology B: Biology. 150, 2-10 (2015).
  5. Maisch, T., et al. Photodynamic inactivation of multi-resistant bacteria (PIB) - a new approach to treat superficial infections in the 21st century. Journal of the German Society of Dermatology. 9 (5), 360-366 (2011).
  6. Hamblin, M. R. Antimicrobial photodynamic inactivation: a bright new technique to kill resistant microbes. Current Opinion in Microbiology. 33, 67-73 (2016).
  7. Del Rosso, J. Q. Oral Doxycycline in the management of acne vulgaris: Current perspectives on clinical use and recent findings with a new double-scored small tablet formulation. The Journal of Clinical and Aesthetic Dermatology. 8 (5), 19-26 (2015).
  8. Wong, T. W., et al. Photodynamic inactivation of methicillin-resistant Staphylococcus aureus by indocyanine green and near infrared light. Dematologica Sinica. 36 (1), 8-15 (2018).
  9. Yuann, J. M. P., et al. Effects of free radicals from doxycycline hyclate and minocycline hydrochloride under blue light irradiation on the deactivation of Staphylococcus aureus, including a methicillin-resistant strain. Journal of Photochemistry and Photobiology B: Biology. 226, 112370(2022).
  10. Liang, J. Y., Cheng, C. W., Yu, C. H., Chen, L. Y. Investigations of blue light-induced reactive oxygen species from flavin mononucleotide on inactivation of E. coli. Journal of Photochemistry and Photobiology B: Biology. 143, 82-88 (2015).
  11. Yang, M. J., et al. Effects of blue-light-induced free radical formation from catechin hydrate on the inactivation of Acinetobacter baumannii, Including a carbapenem-resistant strain. Molecules. 23 (7), 1631(2018).
  12. Yuann, J. M. P., et al. A study of catechin photostability using photolytic processing. Processes. 9 (2), 293(2021).
  13. Yuann, J. M. P., Wang, J. S., Jian, H. L., Lin, C. C., Liang, J. Y. Effects of Clinacanthus nutans (Burm. f) Lindau leaf extracts on protection of plasmid DNA from riboflavin photoreaction. MC-Transaction on Biotechnology. 4 (1), 45-59 (2012).
  14. Rineh, A., et al. Attaching NorA efflux pump inhibitors to methylene blue enhances antimicrobial photodynamic inactivation of Escherichia coli and Acinetobacter baumannii in vitro and in vivo. Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters. 28 (16), 2736-2740 (2018).
  15. Dai, T., et al. Photodynamic therapy for Acinetobacter baumannii burn infections in mice. Antimicrobial Agents and Chemotherapy. 53 (9), 3929-3934 (2009).
  16. Nitzan, Y., Ashkenazi, H. Photoinactivation of Acinetobacter baumannii and Escherichia coli B by a cationic hydrophilic porphyrin at various light wavelengths. Current Microbiology. 42 (6), 408-414 (2001).
  17. Tseng, C. C., et al. Altered susceptibility to the bactericidal effect of photocatalytic oxidation by TiO2 is related to colistin resistance development in Acinetobacter baumannii. Applied Microbiology and Biotechnology. 100 (19), 8549-8561 (2016).
  18. Boluki, E., et al. Antimicrobial activity of photodynamic therapy in combination with colistin against a pan-drug resistant Acinetobacter baumannii isolated from burn patient. Photodiagnosis and Photodynamic Therapy. 18, 1-5 (2017).
  19. Yang, M. Y., et al. Blue light irradiation triggers the antimicrobial potential of ZnO nanoparticles on drug-resistant Acinetobacter baumannii. Journal of Photochemistry and Photobiology B, Biology. 180, 235-242 (2018).
  20. Code of Federal Regulations. , Available from: https://www.gpo.gov/fdsys/pkg/CFR-2009-title21-vol6/pdf/CFR-2009-title21-vol6-sec582-5695.pdf (2022).
  21. Lu, C. Y., et al. Generation and photosensitization properties of the oxidized radical of riboflavin: a laser flash photolysis study. Journal of Photochemistry and Photobiology B, Biology. 52 (1-3), 111-116 (1999).
  22. Sato, K., et al. The primary cytotoxicity in ultraviolet-a-irradiated riboflavin solution is derived from hydrogen peroxide. The Journal of Investigative Dermatology. 105 (4), 608-612 (1995).
  23. Tripathi, A. K., et al. Attenuated neuroprotective effect of riboflavin under UV-B irradiation via miR-203/c-Jun signaling pathway in vivo and in vitro. Journal of Biomedical Science. 21 (1), 39(2014).
  24. Liang, J. Y., et al. Blue light induced free radicals from riboflavin on E. coli DNA damage. Journal of Photochemistry and Photobiology B, Biology. 119, 60-64 (2013).
  25. Ottaway, P. B. The Technology of Vitamins in Food. , Chapman and Hall. London. Ch. 5 233-244 (1993).
  26. Kumar, V., et al. Riboflavin and UV-light based pathogen reduction: extent and consequence of DNA damage at the molecular level. Photochemistry and Photobiology. 80 (1), 15-21 (2004).
  27. Ito, K., Inoue, S., Yamamoto, K., Kawanishi, S. 8-Hydroxydeoxyguanosine formation at the 5'site of 5'-GG-3'sequences in double-stranded DNA by UV radiation with riboflavin. Journal of Biological Chemistry. 268 (18), 13221-13227 (1993).
  28. Liang, J. Y., Yuann, J. M. P., Hsie, Z. J., Huang, S. T., Chen, C. C. Blue light induced free radicals from riboflavin in degradation of crystal violet by microbial viability evaluation. Journal of Photochemistry and Photobiology B, Biology. 174, 355-363 (2017).
  29. Yang, M. Y., Chang, C. J., Chen, L. Y. Blue light induced reactive oxygen species from flavin mononucleotide and flavin adenine dinucleotide on lethality of HeLa cells. Journal of Photochemistry and Photobiology B, Biology. 173, 325-332 (2017).
  30. Cui, Z., Huang, Y., Mo, Q., Wang, X., Qian, K. Inactivation of lymphocytes in blood products using riboflavin photochemical treatment with visible light. Photochemistry and Photobiology. 84 (5), 1195-1200 (2008).
  31. Wong, T. W., Cheng, C. W., Hsieh, Z. J., Liang, J. Y. Effects of blue or violet light on the inactivation of Staphylococcus aureus by riboflavin-5′-phosphate photolysis. Journal of Photochemistry and Photobiology B: Biology. 173, 672-680 (2017).
  32. Russell, L. F., Vanderslice, J. T. Comprehensive review of vitamin B2 analytical methodology. Journal of Micronutrient Analysis. 8, 257-310 (1990).
  33. Cheng, C. W., Chen, L. Y., Chou, C. W., Liang, J. Y. Investigations of riboflavin photolysis via coloured light in the nitro blue tetrazolium assay for superoxide dismutase activity. Journal of Photochemistry and Photobiology B: Biology. 148, 262-267 (2015).
  34. Huang, S. T., et al. Effects of 462 nm light-emitting diode on the inactivation of Escherichia coli and a multidrug-resistant by tetracycline photoreaction. Journal of Clinical Medicine. 7 (9), 278(2018).
  35. Barua, M. G., Escalada, J. P., Bregliani, M., Pajares, A., Criado, S. Antioxidant capacity of (+)-catechin visible-light photoirradiated in the presence of vitamin B2. Redox Report: Communications in Free Radical Research. 22 (6), 282-289 (2017).
  36. Castillo, C., Criado, S., Díaz, M., García, N. A. Riboflavin as a sensitiser in the photodegradation of tetracyclines. Kinetics, mechanism and microbiological implications. Dyes and Pigments. 72 (2), 178-184 (2007).
  37. Huvaere, K., Sinnaeve, B., Van Bocxlaer, J., Skibsted, L. H. Flavonoid deactivation of excited state flavins: reaction monitoring by mass spectrometry. Journal of Agricultural and Food Chemistry. 60 (36), 9261-9272 (2012).
  38. Massad, W. A., Bertolotti, S., Garcia, N. A. Kinetics and mechanism of the vitamin B2-sensitized photooxidation of isoproterenol. Photochemistry and Photobiology. 79 (5), 428-433 (2004).
  39. Maclean, M., MacGregor, S. J., Anderson, J. G., Woolsey, G. High-intensity narrow-spectrum light inactivation and wavelength sensitivity of Staphylococcus aureus. FEMS Microbiology Letters. 285 (2), 227-232 (2008).
  40. Huang, S. T., et al. The influence of the degradation of tetracycline by free radicals from riboflavin-5'-phosphate photolysis on microbial viability. Microorganisms. 7 (11), 500(2019).
  41. Maisch, T., et al. Fast and effective photodynamic inactivation of multiresistant bacteria by cationic riboflavin derivatives. PLoS One. 9 (12), 111792(2014).
  42. Grijzenhout, M., et al. Ultraviolet-B irradiation of platelets induces a dose-dependent increase in the expression of platelet activation markers with storage. British Journal of Haematology. 83 (4), 627-632 (1993).

アクセスが制限されています。このコンテンツを表示するにはログインするか、トライアルを開始してください。

再版と許可

タグ

リボフラビンの光分解可視光不活性化フラビンモノヌクレオチド黄色ブドウ球菌活性酸素種スーパーオキシドラジカル検出NBT還元紫色光照射細菌不活性化光感受性物質療法
リボフラビン-5′-リン酸の可視光光分解 による 病原体の不活化
お問い合わせ
図書館に推薦する

プライバシー

利用規約

ポリシー

著作権 © 2026 MyJoVE Corporation. 無断転載を禁じます。