本プロトコルは、ブタ気管の引張応力緩和および破壊特性を決定する。このような方法の結果は、気管の粘弾性および障害閾値の理解を改善し、肺系の計算モデルの能力を進歩させるのに役立つ。
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本プロトコルは、ブタ気管の引張応力緩和および破壊特性を決定する。このような方法の結果は、気管の粘弾性および障害閾値の理解を改善し、肺系の計算モデルの能力を進歩させるのに役立つ。
気管の生体力学的特性は、気流に直接影響し、呼吸器系の生物学的機能に寄与する。これらの特性を理解することは、この組織における傷害メカニズムを理解するために重要である。このプロトコルは、ブタ気管の応力緩和挙動を研究するための実験的アプローチを記述しており、300秒間0%または10%のひずみに予め引き伸ばされ、その後、破損するまで機械的引張荷重がかかる。この研究は、実験計画、データ取得、分析、およびブタ気管生体力学的試験からの予備的結果の詳細を提供する。このプロトコルとデータ分析MATLABコードで提供される詳細な手順を使用して、将来の研究は、生理学的、病理学的、および外傷的状態におけるその生体力学的応答を理解するために重要である気管組織の時間依存粘弾性挙動を調査することができる。さらに、気管の生体力学的挙動に関する詳細な研究は、手術中に広く使用されている気管内インプラントなどの関連医療機器の設計を改善するのに決定的に役立ちます。
肺疾患におけるその重要な役割にもかかわらず、最大の気道構造である気管は、その粘弾性特性を詳述する研究が限られている1。気道特異的な材料特性を理解することは、米国における死因の第3位である肺疾患の傷害予防、診断、および臨床介入の科学を進歩させるのに役立つため、気管の時間依存性粘弾性挙動の深い理解は肺力学研究にとって重要である2,3,4。
利用可能な組織特性評価研究は、気管の剛性特性を報告している5、6、7、8。時間依存の機械的応答は、組織リモデリングにおけるそれらの重要性にもかかわらず、最小限に調査されており、これも病理学9,10によって変化している。さらに、時間依存応答データの欠如は、現在一般的な構成法則の使用に頼っている肺力学計算モデルの予測能力も制限する。気管の生物物理学的研究に情報を提供するために必要な材料特性を提供できるストレス緩和研究を行うことによって、このギャップに対処する必要があります。現在の研究では、ブタ気管のストレス緩和行動を調査するための試験方法、データ取得、およびデータ分析の詳細を提供しています。
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記載されているすべての方法は、ドレクセル大学の施設動物ケアおよび使用委員会(IACUC)によって承認されました。すべての死体動物は、米国ペンシルベニア州にある米国農務省(USDA)が承認した農場から取得されました。オスのヨークシャーブタ(生後3週齢)の死体を本研究に使用した。
1. ティッシュハーベスト
2. 生体力学的試験
3. データ取得
4. データ解析
は応力(メガパスカル[MPa])、Fは円周方向または軸方向の荷重(ニュートン[N])、A0は初期断面積(ミリメートルの2乗[mm2])を表します。
ここで、 Rel%は緩和率を表し、σ(0+)は初期ピーク応力(または初期ピーク荷重)を表し、σ(300)は300秒にわたる緩和後に記録された応力(または荷重)レベルを表します。
G(0) = 1。粘弾性応力緩和応答を比較するために、G(t)は非線形最小二乗回帰を使用してカーブフィットされ
、tは応力緩和保持中の時間、gは緩和係数、τ1およびτ2は、組織の短期(初期)および長期(平衡)挙動をそれぞれ記述する緩和時間(秒単位)を示す。
ここで、σは公称応力(MPa)、F は円周方向または軸方向の荷重(N)、A 0 は初期断面積(mm2)
を表し、ここで
、結果ひずみ、Δ L は変位を表し、L0 はサンプルの初期長さを表します。応力緩和保持後の破壊引張試験を行ったサンプルについて、L0は組織の延伸前の長さを表す。例えば、サンプル3(初期長さ8mm)を10%に予め延伸し、したがって、L0は、得られたひずみ値19を計算するために8.8mmと考えられた。
ここで、E は弾性率、x と y は荷重-変位曲線上の選択した座標を表し、 A0は断面積を表し、L0は機械的破損の開始時のサンプルの長さを表し、ΔσおよびΔ
は、それぞれ、破損応答の線形領域にわたる応力およびひずみの変化を表す。アクセスが制限されています。このコンテンツを表示するにはログインするか、トライアルを開始してください。
図1は、クランプ部位付近の破断組織とクランプ内の組織の存在を示しており、引張試験中に滑りがないことを確認しています。図2は、試験サンプル間の引張試験中に観察された、上部または下部のクランプ部位または組織の長さに沿った様々な損傷部位を示す。データ解析結果を図3-4及び表1-2にまとめた。10%ひずみへの軸方向または円周方向のプレストレッチに続く気管サンプルに対する応力緩和応答を図3に示す。初期ピーク荷重および応力、300sホールドにわたる応力の減少率、ならびに時定数t1およびt2を、2項プロニー級数緩和関数において、これらの緩和曲線から計算した。これらの粘弾性パラメータは表1に含まれる。プレストレッチな...
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気管のストレス緩和特性を報告した研究はほとんどない21,23.気管組織の時間依存的応答の理解をさらに強化するためには、研究が必要である。この研究は、そのような調査を実行するための詳細な手順を提供します。ただし、信頼性の高い試験のためには、プロトコル内の次の重要なステップを確保する必要があります:(1)適切な組織水和、(2)円周方向および縦方向のサンプルにおける同様の組織タイプ(軟骨リングおよび筋肉の数)分布、(3)プレストレッチなしのサンプルのクランプ、(4)サンプルの厚さと幅を使用して、生体力学的引張試験中の組織応力を計算するために使用される断面積を推定する。 (5)組織サンプルの適切なクランプ、6)クランプされたサンプルのゲージ長を使用して引張試験に1%/sのひずみ速度を入力し、(7)試験後のクランプに組織が存在することで滑りがないことを確認する。さらに、トラブルシューティングでは、テストデバイスコントローラとの通信を再確立するために、データ集録ソフトウェアの再起動が必要になる場合があります。
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著者らには開示するものは何もありません。
この出版物で報告された研究は、賞番号R15HD093024と国立科学財団キャリア賞番号1752513の下で国立衛生研究所のユーニスケネディシュライバー国立小児保健人間発達研究所によって支援されました。
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| 名前 | 会社 | カタログ番号 | コメント |
|---|---|---|---|
| 使い捨て安全メス | Fine Science Tools Inc | 10000-10 | |
| eXpert 7600 | ADMET Inc. | N / A | マサチューセッツ州ノーウッド |
| 鉗子 | ファインサイエンスツール株式会社 | 11006-12および11027-12または11506-12 | |
| ゲージセーフ | ADMET株式会社 | N/A | 無料ダウンロード |
| 画像 J | NIH | N/A | オープンソース |
| プロラミング ソフトウェア - MATLAB | Mathworks | N/A | バージョン2018A |
| ハサミ | Fine Science Tools Inc | 14094-11または14060-09 | |
| リン酸塩緩衝液 | ミリポア、トーマス科学 | MFCD00131855 |
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