方法論記事

バイオバンキング、個別化医療、研究アプリケーションのための乳房生検および乳房切除術のサンプル収集手順の最適化

DOI:

10.3791/67193

2025年9月2日

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この記事について

サマリー

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この記事では、バイオバンキング、個別化医療、その他の研究用途での有用性を最適化するように設計された、乳がんサンプルを収集するための詳細なプロトコルを紹介します。乳房生検や乳房切除術などのサンプル採取のワークフローについて、組織損傷の最小化とサンプル品質の最大化に重点を置き、詳細に説明します。

要約

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乳がんは、特にアジアで女性が罹患する最も一般的ながんであり、フィリピンで最も罹患率が高い。継続的な努力にもかかわらず、乳がん生物学の理解は依然として不十分であり、効果的なスクリーニングプログラムやタイムリーな治療の欠如によりさらに悪化しています。これらの問題に対処するために、バイオバンクやその他の生体標本のリポジトリが世界的に勢いを増しています。フィリピン大学フィリピン総合病院 (UP-PGH) は、フィリピンにおけるがん研究のための政府支援の取り組みの実行可能性を実証し、がんバイオバンクを設立しました。この研究には、UP-PGH、フィリピンゲノムセンター(PGC)、フィリピン大学ディリマン生物学研究所(UPD-IB)の専門知識を活用して、さまざまな疾患段階のフィリピン人乳がん患者100人の前向き観察が含まれます。生体試料の収集、処理、保存を包括的な患者データとともに統合します。手順には、RNA抽出、ライブラリー調製、シーケンシングが含まれます。さらに、一部の患者は、化学療法の事前スクリーニングのために in vitro 3 次元 (3D) 細胞培養実験に参加します。集計されたデータは、標準的な臨床アプローチが不十分な場合に個別化された治療につながる可能性のある治療戦略を明らかにすることを目的としています。主な技術には、超音波ガイド下コア針生検、細心の注意を払った正常乳房組織の収集、高品質の RNA 抽出、配列決定、3D 細胞培養を保証する正確な腫瘍率測定が含まれます。この研究では、これまでのバイオバンキングの取り組みで遭遇した課題にも対処しています。最終的に、この研究は乳がん研究に大きく貢献し、フィリピンなどの発展途上国における共同研究、バイオバンクの設立、精密医療の進歩のモデルとしての地位を確立することを目指しています。

概要

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乳がんはフィリピン人女性の間で最も一般的ながんです。アジアでは、フィリピンは乳がん死亡率が最も高く、死亡率と発生率の比率が最も低い国の 1 つです1。乳がんのスクリーニングプログラムやタイムリーで効果的な治療がなかったことが、この率に大きな影響を受けている可能性があります。同国では、ほとんどのがん患者は進行したがん段階でのみ診察を受けるため、乳がんは通常後期に診断される。乳がんの発生率が高いフィリピンでは、乳がん症例の53%がステージIIIおよびIVで診断され、ステージIで診断されたのはわずか2〜3%でした1,2,3。乳がんに関するスクリーニングの普及と患者教育の促進とは別に、国内の乳がん発生率を減らすために、乳がん関連の研究開発をさらに検討する必要があります。

世界中にバイオバンクが設立されたことで、医学の進歩が加速しました。バイオバンクは、将来の研究開発のために科学的に価値のある生物学的標本の保管と保存に使用されます4。それ以来、バイオバンクはトランスレーショナルリサーチ5 と個別化医療アプローチの改善6に使用されてきました。アジアでは、バイオバンクは主に東アジア、特に中国、日本、韓国に集中しています4。フィリピンなどのアジアの低・中所得国では、バイオバンキングの概念がまだ台頭しています。フィリピンのバイオバンクは、ほとんどが民間の医療機関によって所有されており、フィリピンの広範な人口統計の健康状態と曝露状況が十分に表されていない可能性があります。

フィリピン大学マニラ校 (UPM) フィリピン総合病院 (PGH) におけるがんバイオバンクの設立は、フィリピンにおけるがん関連研究を推進できる政府支援のがんバイオバンクの設立の実現可能性を証明しました7.この基盤の上に、医療の専門知識、研究革新、医療政策を橋渡しする協力的な取り組みを通じて、私たちはフィリピンの乳がん治療と研究の状況に前向きな変化をもたらすよう努めています。そのため、がんフェノームバイオバンキングのワークフローと、広範で層別化された患者固有のデータの収集を全国規模で合理化する拡張されたアプローチが不可欠です。この研究では、バイオバンキングの枠組みへの統合に焦点を当てて、乳房生検および乳房切除術のサンプル収集手順のプロトコルについて説明します。フィリピン人人口の文脈における乳がんの病因の理解を深めるだけでなく、罹患者の固有の遺伝的、環境的、臨床的属性に沿った精密治療の開発を促進することも期待しています。

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プロトコル

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これは、さまざまな段階のフィリピン人乳がん患者 100 人からの匿名化された生体試料 (腫瘍および正常な乳房組織) と臨床病理学的、治療、および転帰データのコレクションを使用した前向き観察研究です。これは、フィリピン総合病院(PGH)、フィリピンゲノムセンター(PGC)、フィリピン大学ディリマン大学生物学研究所(IB)の共同研究であり、それぞれに指定されたタスクがあります。このプロトコルは、研究助成金管理局 (RGAO-2020-0933) に登録され、倫理クリアランス番号 UPMREB 2020-822-01 の下で実施するためにフィリピン大学マニラ研究倫理委員会 (UPMREB) によって審査および承認されました。使用されるすべての研究所は、各機関のバイオセーフティガイドラインを遵守しています。PGH から患者を募集することで、臨床病理学的要因、民族性、および環境曝露の観点から分散と表現が確保されました。以前のプロジェクトで開発および検証された標準作業手順 (SOP) が、サンプルの取得、収集、輸送、およびその他の物流手配のフレームワークとして利用されました。

注:プロトコルのワークフローの概要と研究に関与する各機関の役割については、 図1 - プロトコルの図 面ワークフローを参照してください。

1. 乳房前サンプル採取手順

  1. クリニックの相談または術前会議中に、研究に含める適格な患者を特定してスクリーニングします。
    1. がん患者の選択基準
      1. ステージ1、2、3の乳がんと診断された19〜75歳のフィリピン人女性、およびステージ3Bおよび4の乳がんと診断された19〜70歳のフィリピン人女性が含まれます。
      2. 臨床的に疑われる、または病理学的に診断されたあらゆる段階の浸潤性乳がんの症例を含めます。
      3. 外科的治療(修正根治的乳房切除術または根治的乳房切除術)を前もって(臨床ステージIまたはII)または術前化学療法後(ステージIIIB、IIIC)受ける患者を含めます。ステージ IIIA の患者は、医師の推奨に従って、事前手術または術前補助療法のいずれかを受けることができます。ステージ IV の患者の場合、乳房腫瘍および隣接する正常組織のコア針生検を受ける意思のある患者。ステージ IV の乳がん患者は外科的治療を受けません。
      4. 募集前に術前補助療法を受けており、完全な医学的および臨床的治療反応記録があるステージ III の乳がん患者を含めます。
      5. インフォームドコンセントを理解し、署名できる患者を含めます。
    2. がん患者の除外基準
      1. 乳がんの以前の診断を含む、以前または同時の悪性腫瘍を患っている患者を除外します。
      2. 両側性乳がんの患者を除外します。
      3. 以前にネオアジュバント放射線療法またはホルモン療法を受けた患者を除外します。
      4. 術前化学療法を受ける患者に対して生検手順を繰り返すことに同意がない、以前にコア生検または切開生検を受けた患者を除外します(化学療法前の新鮮な腫瘍標本が得られないため)
      5. 以前に切除生検を受け、腫瘍が残存していない患者を除外します。
      6. 外科的管理または術前化学療法を妨げる併存疾患のある患者を除外します。
    3. 出金基準
      1. 参加者に、医療に影響を与えることなく、安全やその他の懸念事項からいつでも撤退できることを通知します。この非介入研究は、参加者の治療法の選択には影響しません。
  2. 患者から同意を得て、データ収集フォームに記入します。
    注: 割り当てられた担当フェロー (FIC) またはコンサルタントは、大学の研究員 (URA) とともに同意を確保します。
  3. 研究への参加を確認した後、コア針生検手順の患者のスケジュールを取得して検証します。
  4. 機関の倫理委員会およびバイオセーフティ委員会によって設定および承認されたガイドラインに従って手順を実行します。

2. 乳房生検サンプル採取手順

注:ステージIIIおよびIVの患者に対するコア針乳房生検手順の詳細なワークフローについては、 図2 を参照し、各手順のサンプルの分布を示しています。

  1. 検体採取前にチューブを GB として事前にラベル付けし、これはゲノミクス - 乳房 (検体が対象となる研究)、参加者番号であり、001 から 100 以上の範囲である xxx、および文字 A、C、および D としてラベル付けします。以下は、チューブのラベル付けに使用される文字コードです。
    A - PGC に送信するためのコア針生検、腫瘍組織を意味します
    C - バイオバンキング用のコア針生検、腫瘍組織を意味します
    D - コア針生検、正常組織を意味します
    1. シーケンスのために提出されたサンプルには、ラボのラベル「BC」と 2 つの 2 桁のサンプル番号 (BC01、BC21 など) を割り当てます。各サンプルには、検体採取中に割り当てられたコードと相関する対応する「GB」コードがあります。
  2. 外来診療所、手術室、またはその他の無菌環境で、超音波ガイド下で 14 G コア針生検ガンを使用して最大 9 つの組織コアを取得します。
    1. 各コアについて、腫瘍の中心で長さ約 2 cm、隣接する正常組織については腫瘍から 1 cm 離れた乳房サンプルを採取します。各参加者から腫瘍組織と正常組織の 2 種類の標本を収集します。
    2. 各サンプルをURAに渡して、リン酸緩衝生理食塩水(PBS)溶液を含むシャーレに入れます。
      注:この研究では、コア針生検はステージIIIおよびIVの乳がん患者に対してのみ実施されました。ステージ III の患者の場合、コア針生検により化学療法を受けていない腫瘍サンプルが得られました。ステージ IV の患者の場合、乳房切除術は行われなかったため、コア針生検が原発腫瘍サンプルとして機能しました。ステージ I および II の乳がん患者では、コア針生検は行われませんでした。代わりに、腫瘍と隣接する正常組織は乳房切除標本から得られました。
  3. 生検標本を半分に切断して、研究と組織病理学的分析の間に均等に分散させます。
    1. 腫瘍組織の場合、14-G 針を使用して、研究患者ごとに最大 9 コアを取得します。
    2. ペトリ皿で得られた腫瘍コアを、RNA分析用サンプル(6コア)とバイオバンキング用サンプル(3コア)の2つのグループに分離します。
    3. 各芯を縦に2つに切るが、これが難しい場合は芯を横に2つに切る。滅菌ブレードを使用してコアを切断します。組織コアの半分をRNA分析用に送るか、バイオバンキング用に保管します。組織コアの残りの半分を病理学に送り、定期的な組織病理学的分析を行います。
    4. 正常組織の場合、14 G 針を使用して、研究患者ごとに最大 3 コアを取得します。汚染を避けるために、腫瘍組織の採取に使用した針とは異なる針を使用してください。これが不可能な場合は、腫瘍組織を取得する前に、まず正常な乳房組織を取得してください。
    5. 得られた各正常組織を腫瘍組織で行われたのと同様のペトリ皿に入れ、コアを半分に切ります。研究用のサンプルと、組織病理学的分析のために病理学部門に配布します。
  4. サンプル採取後、優先順位の方法と順序に従って、サンプルをチューブに分配します。
    1. コアの半分を、1.25 mLのRNA安定化溶液をあらかじめ充填した指定された2 mLクライオバイアルに入れます(RNA分析用のすべてのコアを1つのバイアルにまとめて、バイオバンキング用のすべてのコアを別のバイアルに入れ、サンプルを常に低温に維持します)これらのコアの対応する半分を通常の検体バイアル/チューブに入れ、10%中性緩衝ホルマリン(10%NBF)で固定します。 組織病理学的分析用。対応する2つのハーフグループ、指定されたセンターに行くグループ(RNA分析のために送られたサンプルなど)と対応する病理検体が同じ検体コードを持っていることを確認してください。
  5. 外科病理フォームに記入します。フォームと一緒に、ホルマリンで固定された病理学標本を日常的な組織病理学のために病理学に提出します。
  6. RNA安定化溶液(理想的には溶液と組織の比率が5:1であるため、0.25 cmの組織の場合は1.25 mLのRNA安定化溶液)に浸したコア針生検サンプルをパラフィルムで密封します。
  7. サンプルを4°Cで24時間保存し、最終的に-80°Cの超低温冷凍庫に移します。
    注:保管に関するガイドは、セクション4(検体の保管、梱包、輸送)で説明します。

3.乳房切除術のサンプル採取手順

  1. セクション 1 の乳房前サンプル採取手順に従ってください。
    注: 研究に登録されたステージ I、II、および III の患者は、手術室 (OR) で乳房切除術を受けます。ステージ I および II の患者の場合、乳房切除術は事前に行われますが、ステージ III の患者の場合、乳房切除術は 8 サイクルのネオアジュバント療法の完了後にのみ行われます。ステージ 4 では、乳房切除サンプルは収集されません。手順ごとのサンプルの分布を示す詳細な乳房切除術サンプル収集プロトコルについては、 図3 を参照してください。
  2. 協力者および病理部門とスケジュールを調整します。これは、手順の目標日の少なくとも 2 日前に行ってください。設定されたスケジュールに変更があった場合は、スケジュールの競合を避けるために、すぐに関係者に通知してください。
  3. 検体採取前にチューブに GB、つまりゲノミクス乳房 (検体が対象となる研究)、参加者番号である xxx (001 から 100 以上の範囲)、および文字 E と F として事前にラベルを付けます。以下は、チューブのラベル付けに使用される文字コードです。
    E - 乳房切除術、腫瘍組織、PGC、IB、バイオバンキングへの送付を意味します。
    F - 乳房切除術、正常組織を意味します
    1. シーケンスのために提出されたサンプルには、ラボのラベル「BC」と 2 桁のサンプル番号 (BC01、BC21 など) を割り当てます。各サンプルには、検体採取中に割り当てられたコードと相関する対応する「GB」コードがあります。
  4. 手術中に、標本を待っている間、外科病理フォームに記入してください。担当病理医に最新情報を送信して、検体採取に必要な準備をします。
  5. 乳房検体を取り出して文書化した直後に、検体を清潔なプラスチック/検体袋に入れます。乳房切除標本をすぐに病理科に持ち込んで、冷虚血時間を最小限に抑えるためにグロスを行ってください。提出時に検体をホルマリンに入れないでください。
    注:乳房切除術中のサンプルアクション写真を 図4 に示します(乳房切除術中のサンプル収集の代表的な画像)。
  6. グロス検査時に各検体から腫瘍組織と正常組織の2種類のサンプルを採取します。
    1. 腫瘍組織
      1. 標本あたり1 cm×1 cm×1 cmの腫瘍組織を測定する最小1つのブロック(できればそれ以上)を取得します。
      2. 得られた組織ブロックをさらに2つの部分に切り、各半分のブロックを1 cm×0.5 cm×0.5 cmにします。組織ブロックの半分をバイオバンキングと分析のためにURAに引き渡し、残りの半分をホルマリンで固定して日常的な組織病理学を行います。
      3. 新鮮な組織の半分のブロックを均等に三等分します。これは、RNA シーケンシング、バイオバンキング、およびオルガノイド培養を目的としています。
      4. RNAシーケンシングの場合:2.5 mLのRNA安定化溶液をあらかじめ充填した、事前に冷却され、事前に標識された5 mLクライオバイアルにすぐに入れます(30分を超えず、常に冷たく保つ必要があります)。
      5. バイオバンキングの場合:2.5 mLのRNA安定化溶液を入れた、事前に冷却され、事前に標識され、事前に充填された5 mLのクライオバイアルにすぐに入れます(30分を超えず、常に冷たく保つ必要があります)。
      6. オルガノイド培養の場合:5 mLの組織保存液と0.01 mLのプリモシンを入れた、事前に冷却され、事前に標識され、事前に充填された15 mLコニカルバイアルにすぐに入れます(30分を超えず、常に冷蔵しておく必要があります)。標本の異なるセクションから得られたすべての腫瘍ブロックの3分の1を1つの円錐形のチューブにプールします。
    2. 正常組織
      1. 標本あたり1cm×1cm×1cmの正常乳房組織を測定する最低1つのブロック(できればそれ以上)を取得します。
      2. 得られた組織ブロックをさらに2つの部分に切断し、各半分のブロックを1 cm×1 cm×0.5 cmにします。組織ブロックの半分をバイオバンキングと分析のためにURAに引き渡し、残りの半分をホルマリンで固定して日常的な組織病理学を行います。
      3. 研究のために組織ブロックを均等に2つにカットします。これらは、RNA シーケンシングとバイオバンキングを目的としています。
      4. RNAシーケンシングの場合:RNA安定化溶液を含む2.5 mLのクライオバイアルを事前に充填した、事前に冷却され、事前に標識された5 mLクライオバイアルにすぐに配置します(30分を超えず、常に低温に維持します)。
      5. バイオバンキングの場合は、RNA安定化溶液を入れた、事前に冷却され、事前に標識され、事前に充填された2.5 mLクライオバイアルにすぐに配置します(30分を超えず、常に低温に維持します)。
        注:「E」とラベル付けされた腫瘍サンプルは、通常、検体の3つ以上の異なるセクションから得られます。混乱を避けるために、RNA分析とバイオバンキングを目的とした腫瘍サンプルは、E1、E2、E3などとラベル付けされた別々のチューブに入れ、細胞培養を目的としたプールされた腫瘍サンプルは、単にEとしてラベル付けされたチューブに入れる必要があります。E1、E2、および E3 とラベル付けされたサンプルの場合、腫瘍に対する各組織サンプルの相対的な位置/位置 (たとえば、中心、10 時の位置) を記録する必要があります。
  7. 乳房切除術から得られたサンプルを含むクライオバイアルをパラフィルムで密封します。
  8. クライオバイアルを4°Cで24時間保存し、最終的に-80°Cの超低温冷凍庫に移して長期保存します。
  9. プールされた腫瘍ブロックを含む円錐形のチューブを梱包し、輸送の準備をします。これらの腫瘍ブロックは、オルガノイドへの細胞培養に使用されます。

4. 検体の保管、梱包、輸送

  1. 腫瘍と正常組織を含むすべてのクライオバイアルを直ちにパラフィルムで密封し、これらを4°Cで24時間保存します。24時間後、チューブを-20°Cに約2〜4時間移し、最終的に-80°Cに無期限に移し、輸送までの長期保管を行います。
  2. RNA分析のためにサンプルを輸送する前に、定期的な組織病理学の結果や腫瘍の割合を含めて、検体トラッカーとデータベースを更新して、サンプルの同一性を確保します。
  3. 輸送前に、各サンプルの輸送マニフェストを作成します。梱包プロセスが迅速であり、サンプルの入ったチューブが室温 (RT) に長時間放置されていないことを確認してください。
    1. 漏れを防ぐために、すべてのクライオビアキャップをパラフィルムで密封します。
    2. すべてのチューブを試験管ラックに入れます。
    3. 温度ロガーをセットし、輸送用のチューブの横のラックの上に置きます。
    4. チューブを吸収性素材で包み、次に気泡緩衝材で包み、再密封可能な袋の中に入れます。バッグ内のアイテムを密封する前に、温度ロガーが温度を記録していること、チューブが無傷で直立していることを確認してください。
    5. ゲルパックをポリスチレン輸送箱の底に置き、チューブが入った再密封可能な袋をゲルパックの上に置きます。バッグの上にジェルパックをもう一層置きます。輸送中に検体を冷たく保つために、チューブがゲルパックの間に挟まれていることを確認してください。
    6. ポリスチレンの箱を閉じて、段ボールの輸送箱に入れます。大きな段ボール箱がない場合は、大きめのポリスチレン箱を使用してください。完成した輸送マニフェストをジップロックバッグに入れ、箱の中に入れます。ボックス内のアイテムの配置を 図 5 に示します。
    7. 段ボール箱を密封し、適切な配送ラベルを箱の外に貼ります。
  4. 検体採取スケジュールとサンプルの送付予定日を受取人に通知します。
    1. オルガノイド培養では、乳房切除術に由来する腫瘍組織のみが送られ、利用されます。これらが新鮮で、湿った氷の上で、検体採取から24時間以内に配送されることを確認してください。サンプルが梱包され、箱が密封されたら、すぐに宅配業者を予約して輸送します。温度が急激に低下したり上昇したりすると、サンプルの生存率が損なわれる可能性があるため、箱を高温の場所に長期間放置しないように注意してください。
    2. 宅配業者に引き渡す前に、出荷されたバイアル/チューブの数と、宅配業者がバイオバンクを離れた時刻をメモしてください。荷物が到着したら、受取人が次の点に注意してください: 指定されたセンターへの到着時刻と受領時刻、到着時の温度、受け取ったバイアル/チューブの数、および破損した検体
    3. RNA解析の場合は、RNA解析用サンプルを送る前に、送達するサンプルに対応する病理組織学の結果と外科病理学部門からの腫瘍の割合があるかどうかを確認してください。RNA抽出のために提出する各患者の腫瘍含有量が最も高い組織ブロックを特定して選択します。腫瘍の割合が10%のサンプルのみを輸送します。
    4. バッチ処理を容易にするために、サンプルを40個以下のグループで送信します。コア針生検または乳房切除術の腫瘍組織と乳房切除術の正常組織の組み合わせを選択します。コア針生検からの正常組織を輸送する場合は、次の条件を確認してください。
      -ステージ3として登録されているが、病理組織学の結果はステージ4を示しています
      -ステージ 3 として登録されましたが、組織病理学の結果、疾患の局所領域の進行が示されています。
    5. すべてのサンプルが湿った氷の上で輸送されることを確認してください。3D細胞培養用のサンプルを送るときのプロトコルと同様に、検体が梱包され、箱が密封されたら、すぐに宅配便を予約して輸送します。大きな温度変動によりサンプルの生存率が損なわれる可能性があるため、箱を高温の場所に長時間放置することは避けてください。
    6. 宅配業者に引き渡す前に、出荷されたバイアル/チューブの数と、宅配業者がバイオバンクを離れた時刻をメモしてください。荷物の到着時に、指定センターへの到着時刻と受領時刻、到着時の温度、受け取ったバイアル/チューブの数、および破損した検体 (ある場合) に注意してください。
  5. 送信されたサンプルのデータベースを更新し、サンプルをさらに処理する前に必要な情報をすべて入力します。週に 1 回、データベースを監視および評価します。

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結果

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コア針生検中のサンプルの収集では、超音波ガイド下で手順を実行することは、患者の利便性とワークフローの効率、およびサンプルのRNA完全性に大きな影響を与えました。これを行わないと、期待した結果が得られない可能性があり、患者はクリニックに戻って手順を繰り返さなければならないため、サンプルの収集と処理が長引く可能性があります。

それに加えて、担当病理医が行ったサンプルあたりの腫瘍割合の同定も、抽出用のサンプルの品質を確保し、データ分析の遅延を最小限に抑えるための重要なステップです。腫瘍率は、乳房組織サンプルの腫瘍組成の推定値です。これにより、腫瘍の割合が高い腫瘍ブロックと腫瘍組織のない正常組織ブロックのみが抽出のために送られるため、RNA 抽出と配列決定のための組織ブロックの選択が容易になります。腫瘍組織のない代表的な正常組織ブロックがない場合は、代わりに腫瘍の割合が最小のブロックが送られます。

病理医が病理医によって推定された腫瘍の割合に基づいてサンプルを選択した...

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ディスカッション

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このプロトコルの実装が成功するかどうかは、技術的な精度だけでなく、一貫したサンプル品質とデータの整合性を確保するための臨床チームと研究チームの調整にも依存します。このプロトコルには、診断精度を最大化し、下流の分子分析に適した高品質の生体試料を生成するために設計されたいくつかの重要な手順が組み込まれています。主なステップには、正常乳房組織と腫瘍乳房組織の両方を取得するための超音波ガイド下コア針生検、治療反応に関するデータ収集、および腫瘍パーセンテージの定量化が含まれます。

コア針生検 (CNB) は、がんが疑われる触知可能な乳房腫瘤の診断に推奨されます。フィリピン外科医協会 (PCS) が発行した早期乳がんの臨床診療ガイドライン9に基づいて、コア針生検は、次のような利点があるため、乳房腫瘤の診断に一般的に使用されています。非浸潤がんと浸潤がんを区別できます。また、免疫組織化学染色による組織学的診断とホルモン受容体の状態やその他の予後マーカーに関するデータを提供できます。...

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開示事項

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著者には、財務的、個人的、または制度的を問わず、開示すべき利益相反はありません。

謝辞

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この研究は、フィリピン保健研究開発評議会 (DOST-PCHRD) 科学技術省から資金提供を受け、フィリピン ゲノム センター (PGC) およびフィリピン大学ディリマン生物学研究所 (UPD-IB) と共同で実施されています。著者らはまた、このプロトコルの最適化に協力してくれたレフ・ハヴェル・ティゾン氏、コンラッド・チョン氏、スーザン・ヴァリビア氏、およびこのプロトコルの撮影に貢献した病理学研修医、クラリス・ヴェロニカ・ミルハン博士とパトリシア・フランコ博士にも感謝したいと思います。

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材料

この記事で使用された材料の一覧
名前会社カタログ番号コメント
37%ホルマリン溶液フィルサ・コーポレーション該当なし組織病理学的解析のための組織保存剤として使用
70%イソプロピルアルコールグリーンクロス株式会社該当なし消毒剤として使用
バーコードプリンターシマウマGC420tサンプルを含むラベルチューブで使用されるバーコードラベルの印刷
ブリーチグリーンクロス株式会社該当なし消毒剤として使用;手術器具の除染のために
青い氷嚢ラバーメイド1002輸送中の低温でサンプルを保管するために
コア針生検 14-G針バードMN1410解剖学的構造から小さな組織サンプルを自動抽出しつつ(生検)、周囲の組織損傷を最小限に抑えつつ、組織病理学的検査のために生検銃のハンドピースに接続する侵襲的な管状手術器具です。
コアニードル乳房生検銃バードMG1522コアニードル生検中に組織サンプルを採取するために使用される再利用可能なコア生検機器
使い捨てペトリ皿 90 mm x 15 mmフェニックス・バイオメディカル・プロダクツロット:20220206PBSに組織を浸す際のコア針生検標本採取に使用されます
ダルベッコリン酸緩衝生理食塩水(PBS)サーモフィッシャー・サイエンティフィック21600010細胞分離前の洗浄、細胞や組織の輸送、細胞の希釈による計数、試薬の調製など、さまざまな細胞培養用途で使用されるバランスの取れた塩溶液です。 
鉗子地元サプライヤー該当なし
Kimtech Science KimWipes 繊細な作業用ワイパーキンバリー・クラーク・プロフェッショナルKC341204.3 x 8.4インチ。(11.0 cm x 21.3 cm);1プライ280カウント;表面、部品、器具、医療機関の清掃に使えるこれらのワイプは、液体、ほこり、微粒子を簡単に掃除できます。
MACS組織貯蔵溶液ミルテニ・バイオテック130-100-008新鮮な臓器や組織サンプルの最適化保存を可能にする保存ソリューション
マイクロピペット上海地衣計器技術有限公司STEM-GC-3197-Y小容量での液体ピペッティング/転送用
マイクロピペットのチップターソンズ521100小容量での液体ピペッティング/転送用
パラフィルムパラフィルムM5259-04LC PM996漏れを防ぐための管の気密かつ防湿シールのため
プリモシン 250 mg(5 x 1 mL)インビボジェンANT-PM-05微生物汚染から組織を保護するために使用されます
冷蔵庫(4 & deg;C)LGモデル:GR-Y331SLZB組織サンプルや試薬の保管用
RNAlater解サーモフィッシャー・サイエンティフィックAM7021組織の貯蔵およびバイオバンクに使用されるRNA安定化ソリューション
滅菌15 mL円錐形チューブ サーモ・サイエンティフィック339650組織保存に使用される試薬や培地のアリコートを作るために使用されます
滅菌5mLクライオバイアルサーモ・サイエンティフィック5000-1020組織保存に使用される試薬や培地のアリコートを作るために使用されます
滅菌メスブレード(#11)サージテック該当なし腫瘍や正常な乳房組織の切除のために
外科用はさみ(18.5 cm 7 & frac14;「ストルット」オルテン・インストゥルメンツBO-0125腫瘍や正常な乳房組織の切除のために
温度計エクステック・インスツルメンツ42280試料輸送中の温度と湿度の記録のために
ティッシュインクエプレディア3120123切除手術標本の縁を染色し、組織病理学的解析のために
超低温冷凍庫ハイアルバイオメディカルDW-86L579腫瘍および正常乳房組織の無期限保存のために
尿検体容器 60mLシュアガード0016UCS06PC組織病理学的解析のための組織保存のために
ジップロックバッグレイノルズ・コンシューマー・プロダクツLLC輸送用の試料梱包に使用されます

参考文献

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