このコンテンツを表示するには、JoVEへの購読が必要です。 または、無料トライアルをお申し込みください。

方法論記事

全身眼移植の動的保存と移植を研究するための豚モデルの確立

627 回視聴

⸱

DOI:

10.3791/69179

⸱

2025年11月25日

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Center for Engineering in Medicine and Surgery, Massachusetts General Hospital, Harvard Medical School, 2Shriners Children's Boston, 3Plastic Surgery Research Laboratory, Department of Plastic and Reconstructive Surgery, Massachusetts General Hospital, Harvard Medical School, 4Department of Plastic, Reconstructive and Aesthetic Surgery, Hospices Civils de Lyon, 5Department of Plastic, Reconstructive and Aesthetic Surgery, CHU de Rennes, University of Rennes, 6Faculty of Medicine and Health Sciences, University of Antwerp, 7Bioengineering Research Group, Cardiff Metropolitan University, 8Collaboration for the Advancement of Sustainable Medical Innovation, University College London, 9Division of Plastic Surgery Research, Vascularized Composite Allotransplantation Program Development, Cedars-Sinai Hospital

この記事について

サマリー

外科的調達から機械灌流開始までの詳細かつ再現可能な豚全身眼移植モデル(WET)を記述し、移植におけるWET動的保存の研究を可能にします。

要約

初のヒト全眼移植(WET)は、重度の眼科損傷で視力を失った患者に新たな希望をもたらしましたが、WET(視覚)による視力回復が可能になるまでには依然として大きな課題が残っています。その中でも最も重要な課題の一つが、 体外 保存です。眼球、特に網膜や視神経などの神経成分は、適切な保存が確保されない限り数分以内に急速かつ不可逆的な変性を遂げます。静的冷蔵(SCS)は血管化複合型アロ移植(VCA)におけるゴールドスタンダードであり続けていますが、代謝を十分に抑制または支援できず、移植片の生存率や機能の低下につながるため、WET の体外 保存には適していません。亜膜性機械灌流(SNMP)はSCSの有望な代替手段として浮上しており、移植片を保存するだけでなく再調整も可能としています。私たちのグループは、SNMPを固形臓器移植から複数のVCAモデルへ成功裏に移植し、その実現可能性と利点を示しました。ここでは、豚におけるWET保存のためのSNMPの応用を報告し、解剖モデルと保存プロトコルを詳述します。このアプローチは、WET(湿水)保存および移植技術の最適化において大きな前進を示しています。

概要

血管化複合異種移植(VCA)は再建手術における大きな進歩を示し、複雑な病変を持つ患者に対して比類なき美的および機能的アウトカムを提供します1,2。しかし、眼球に関連した視力低下は顔面損傷の主要な障害の原因であり続けています。最近の初の全眼移植(WET)は、患者さん3,4に新たな希望をもたらしました。視力は回復しませんでしたが、機能的画像診断では光刺激に対する皮質活性化が示され、網膜電図(ERG)では光に対する光受容体の反応が鈍化しましたが認識可能であることが示されました。卓越した技術的偉業にもかかわらず、機能的WETを臨床的現実にするためには依然として多くの課題が残っています。眼球は虚血に非常に敏感であり、適切な酸素供給とpHレベルが維持されない限り、網膜と視神経は温虚血時間(WIT)の数分以内に不可逆的な変性を起こします6。したがって、WETはVCA分野で特有の課題を抱え、後部・前部両節、さらに眼外成分を含む複数の要因を考慮する必要があります。特に、筋肉は温空血損傷に非常に脆弱であり、虚血再灌流によってさらに悪化するため、機能的成果の成功に不可欠です。酸素不足は細胞損傷を引き起こし、損傷関連分子パターン(DAMP)の放出を引き起こします。再灌流後、これらのDAMPは受容者の免疫システムを活性化し、炎症と免疫細胞の浸潤を引き起こします。この炎症環境は抗原提示とT細胞活性化を促進することで拒絶反応を加速させます。視神経再結合などの課題を克服するとともに、WETはWITや静的冷蔵(SCS)による損傷を防ぐために最適化された体外灌流技術を必要とし、最終的には視力回復5,7,9,10,11を目指します。

機械灌流(MP)は、虚血再灌流損傷を防ぐための固形臓器移植の方法として確立されており(12,13,14)、亜膜性機械灌流(SNMP)は様々なモデルでSCSよりも優れた結果を示しました(15,16,17)。私たちは、齧歯類18,19から豚20,21,22、そして最近では非ヒト霊長類23に至るまでの動物モデルにSNMPを成功裏に翻訳しました。SNMPは移植片の長期保存に有効であることが証明されただけでなく、移植片の再調整や温空虚血損傷の軽減にも応用可能であり、採集後24時間まで安全な再植が可能です。細胞代謝を部分的に維持できる能力により、SNMPは保存段階を診断、治療、前処理プラットフォームへと変換し、VCAの再植植および移植プロトコルに統合できる新たな道を開きます。私たちはVCAに特化した最適化されたSNMPプロトコルを開発し、この難しい全眼移植のシナリオに適用しました。

本研究では、SNMPを室温(約20°C)での酸素飽和・動的臓器保存に用いています。この技術は、蠕動ポンプと酸素供給装置を用いて、灌流液を循環させて酸素供給します。豚モデルが用いられており、生理学的人体的類似性、類似の血管大きさ、そして側眼窩壁の特有の不在から、WET移植と保存の研究に非常に関連性が高い。この特徴により、外頸動脈と眼動脈が直接接続されているため、WETは外頸動脈および頸静脈のみから取得でき、体外実験や生体内での頭蓋解離を必要とせずに体内移植研究に特に適していますオルソトピックまたはヘテロトピア再植植。採集は循環死後に行われ、心臓死後の提供プロトコルと整合し、他の固形臓器摘出まで採集を遅らせることを可能にします。したがって、このモデルは温空缺血後の高感度移植片の再調整におけるSNMPの可能性をさらに探求し、既存の移植研究室で他の臓器に焦点を当て、「3-R」の精緻化、還元、置換の原則に従ってWET保存技術の開発を支援します29,30.さらに、同様の手順を踏む心臓の調達にも依然として関連性があります。目標は、外頸動脈および頸静脈の脚に基づく信頼性の高い保存モデルを確立し、動的保存の実現可能性を評価することです。グラフト調達、保存、SNMP実施の重要な側面を含む詳細な手続き手順が提供されています。

アクセスが制限されています。このコンテンツを表示するにはログインするか、トライアルを開始してください。

プロトコル

本研究の機関承認は、地元の施設動物ケア・利用委員会(プロトコル #2024N000205)から取得されました。すべての動物実験は「動物研究: 生体内 実験報告ガイドライン31 」に従い、米陸軍動物ケア・利用審査局(ACURO)32の勧告に従って行われました。すべてのWETは「3-R」原則に従い、末期臓器調達手続きを受ける豚から調達されました。体重30kgから50kgの動物は、100IU/kgのヘパリン投与後に失血で安楽死させ、実験には残存性WET移植片が使用されました。適切なWETが制御装置として機能しました。臓器採取は死後、温かい虚血が180分未満で行われました。プロトコルで使用されるすべての試薬および装置の詳細については 、材料表 を参照してください。

注:データはスプレッドシート(例:Excel)に記録され、統計解析は適切な統計ソフトウェア(例:GraphPad Prism)を用いて行われました。アルファリスクは5%に設定され、両側のものでした。監視対象の各変数に対して、その平均誤差と標準誤差が決定されました。スピアマン検定は灌流パラメータ間の相関関係を研究するために用いられました。

1. 機械灌流準備(実験1日前)

  1. 機械灌流システム34( 図1参照)をセットアップします。
    1. 灌流システムの部品を組み立てます:ポンプ、酸素装置、バブルトラップ、連続圧力センサー、重量センサー。
      注意:セットアップのすべての構成要素を組み立てるために必要な最小限のチューブ長に抑えるべきです。組み立て後は、圧力校正はシステム、特にチューブの長さに特化することを念頭に置いてください。
    2. システムを半閉鎖循環回路として接続し、貯蔵庫から酸素供給装置へと注入液を送り込み、さらに移植片の流入(頸動脈)へと導きます。静脈流出は貯留池に排水されます(補足図1 および 補足映像1)。
    3. 圧力センサーをインフローチューブに接続してください。
    4. グラフトを電子スケールに設置した3Dプリントのプラットフォームに置きます。
    5. 体重計と圧力センサーの両方をマイクロコントローラーに接続します。
    6. マイコンをオペレーターのコンピュータに接続し、リアルタイムの監視と継続的なデータ記録を実現します。
    7. 温度監視用にサーマルカメラを準備してください。
      注意:浮腫形成の代替として体重モニタリングは重要であり、灌流中の移植片損傷の早期指標となります。
  2. 灌流を開始する前に回路部品を徹底的に清掃し、特に複数回使用された酸素化装置に特に注意を払ってください。
    1. まずすべてのチューブを70%エタノールで別々に洗浄し、その後無菌の脱イオン水で洗浄します。
    2. システムを組み立て、2Lの滅菌脱イオン水を循環させて、すでに使用済みの場合は50〜100 mL/分の流量で酸素化装置をフラッシュします。
      注:生きた動物の再植栽研究では、新しい滅菌酸素装置を使用し、その他の灌流成分はエチレン酸化物(ETO)で滅菌してください
  3. 調剤溶液を準備してください。亜母症の機械灌流には、VCA最適化されたSteen+溶液24,34,36を使用します。合計で、1グラフトあたり1.5Lを使用し、前述の詳細成分に従って34mgを使用してください。
  4. 水酸化ナトリウム溶液を注入し、pHを7.5〜7.6にします。この初期値を意図的に高く設定してください。なぜなら、カルボゲン混合物(95%酸素、5%二酸化炭素)が溶けると循環中にpHが低下するためです。
  5. 正確な測定のために重量と圧力センサーを校正してください。
    1. プラットフォームの重さを考慮してスケールを薄くします。
    2. 血管圧を正確に測定するために、カテーテルゲージと使用される流量に応じてシステムを校正します。使用する各カテーテルサイズのシステム圧力を、0.5 mLごとに0から20 mL/minまで一定の流量間隔で測定します。
    3. 実験中、動脈圧を計算するために、測定される総圧力から校正圧力を差し引きます。これらの実験で使用された校正表を例として示します(補足図2参照)。
      注意:キャリブレーションは各セットアップごとに異なります。チューブ、酸素装置、または液体を交換した後は再校正を行い、これらの変更はシステム圧力に影響を与える可能性があります。

2. 検死後のWET調達

注意:心臓死後の提供や死後の採集を模擬するには、動物は地域のIACUCガイドラインに従って安楽死されるべきです。薬剤毒性の妨げとなる研究を避けるため、静脈内ペントバルビタール注射よりも出血性出血を推奨します。

  1. 安楽死させられた動物はうつ伏せの状態に保ちましょう。頭と首の部分を剃り、こすり、無菌のカーテンを貼りましょう。
    注:解剖モデルは 図2に示されており、ステップバイステップの解剖ガイドは 補足ファイル1に掲載されています。
  2. フラップの皮膚の模様を描いてください。
    1. 模様は眼窩の縁から2cm離れた眼窩の周囲に線を引き、外眼角から1cm下の首に向かって切開部を設けてください。
    2. 切開は23番メスで皮膚と皮下組織を通り、眼窩の上下部、骨膜を含む骨まで下りていきます。皮弁の前後側では、切開部が筋膜面に到達するようにしてください。
  3. スティーブンスハサミとアドソン鉗子を使って眼窩の前方側から解剖を開始します。
    1. 骨膜下層面の眼窩内容物を骨膜下エレベーターで眼窩壁に向かって持ち上げます。
    2. n°15刃メスを用いて眼窩壁に近い構造を特定し、分割します。これには斜筋の挿入部や、眼窩から出て前頭静脈に接続する眼窩静脈神経叢が含まれます。
      注:前頭静脈は顔面静脈に流れ込みますが、眼静脈との吻合枝が保存されれば、時間を節約するために顔面静脈を犠牲にすることも可能です。
  4. 軌道の後方側面の解剖を続けてください。メスで咬筋の接骨部を切除し、その後リストン骨切断で下顎の上行枝を切除します。下顎片を外側から回転させて手動で顆頭を分離します。
  5. 頬骨突起から前頭骨にかけて伸びる眼窩靭帯を分割し、側頭筋の眼窩部分にアクセスします。側頭筋を切除します。
  6. 骨膜骨髄エレベーターを用いて、頬骨弓の下に前眼窩縁に向かう骨膜下骨嚢トンネルを作ります。往復のノコギリを使って骨を切ります。側頭筋の下、眼窩円錐体の下側側にある眼動脈を特定します。
  7. 頬骨弓と前下眼窩壁をロンジュールで切除します。
    注意:これらのステップは眼窩錐体の下外側側面およびその血管脚へのアクセスを提供します。
  8. 眼内分泌物に入る両枝を細かいスティーブンスハサミと顕微外科用鉗子で識別し、解剖します。
    注:ほとんどの血管(外頸動脈および浅い頸静脈)は下顎の下に位置していますが、顔面静脈は下顎の浅い位置にあります。
  9. 外頸動脈と頸静脈の望ましい長さを分離した後、メスを使って視神経、動眼神経、血管柄を切断して解離を完成させます。

3. 灌流準備

  1. サイドテーブルの上で、顕微外科用拡張器を使って頸動脈を拡張し、血管カテーテルを挿入します。カニュレーションは3-0シルクタイで固定してください。
    注:このプロトコルでは、すべての動脈に18-Gの血管カテーテルが使用されました。動脈ペディクルが短い場合は、2つの眼科枝のうち一方の選択的カニュレーションを避けるため、カテーテルを挿入しすぎないように注意する必要があります。頸静脈は閉ループ灌流システムを用いない限りカニューレーションは不要であり、このプロトコルでは使用されていません。
  2. 頸動脈を洗浄するには、灌流装置で使用したものと同じ圧力センサーを搭載した10mLシリンジを使用します。10 mL(100 IU/mL)のヘパリンを使って血管を洗浄し、流出口がきれいになります。35 ± 5 mmHg 以下に抑えてください。高圧は微小血管損傷や灌流不良の原因となる可能性があります。

4. サブノーママウスマシン灌流

  1. 移植片のカニューレ動脈を機械灌流システムの流入チューブに接続し、移植片をスケールに挿入します。
  2. 2〜4 mL/分に設定したポンプを起動します。
    注:灌流流量と圧力は使用されるプロトコルによって異なります。VCAでは、毛細血管損傷や浮腫の形成を防ぐために安定的かつ低流量の治療法が用いられます。
  3. 1mLシリンジを用いて、流入・流出の各時点で生存パラメータを評価し、血液ガスシステム装置でサンプル(例:血液ガス指標[pH、pCO2、pO2、乳酸塩、塩基余剰、炭酸水素]、グルコース、ナトリウム、カリウム、カルシウム、塩化物)を分析します。これにより、 表1に示された方程式に従って移植片の代謝状態を計算できます。
    注:このプロトコルでは、灌流は18時間続き、最初の6時間は1時間ごとに、その後12時間は3時間ごとにサンプルを採取します。

アクセスが制限されています。このコンテンツを表示するにはログインするか、トライアルを開始してください。

結果

6時間のSNMPの予備的実現可能性試験を実施し、その後2時間の全血を用いた正常な機械灌流(NMP)を実施し、全グラフトの適切な再灌流と再植のシミュレーションを行いました。SNMPフェーズでは安定した流出が観察され、その後の全血再灌流シミュレーションでグラフト全体の着色が成功したことが示されました。灌流パラメータはこの技術の実現可能性をさらに裏付けました(補足図3)。

その後の7回の重複では、安定した低流量のレメン(2 mL/minから3 mL/minの範囲)で実験を行い、灌流開始時の平均動脈圧は57.6 ± 4.0 mmHgから始まり、実験終了までに徐々に低下し、灌流終了時には平均値36.7 ± 4.2 mmHgに達しました。灌流終了時の平均体重増加は9.3±3.3%でした。血管圧と重量プロファイルの代表例は 図3に示されています。

2つの異なる灌流相が特定されました...

アクセスが制限されています。このコンテンツを表示するにはログインするか、トライアルを開始してください。

ディスカッション

最初の臨床症例から20年以上経った今も、VCAは依然として大きな免疫学的および 体外 保存の課題に直面しており、その広範な利用を制限しています。これらの課題は、視力回復に期待を寄せるものの、視神経再接続の成功、前後節の機能維持、眼窩周囲構造の健全性維持など、独自の障害を伴います。眼のVCAの場合、適切な酸素供給とpHレベルが維持されなければ網膜が数分以内に不可逆的な機能喪失を遂げる可能性があるため、移植前に虚血性損傷を防ぐことが特に重要です。6;したがって、保存の質と持続時間の向上は、視力回復の実現率を最大化するために、WETを臨床現場に成功裏に移行させるために極めて重要です。機械灌流は最近、VCAにおける潜在的な解決策として浮上しており、固形臓器保存の改善に成功した実績を基に、ここではその応用範囲をWETに示します。

本報告書は、WETの 体外 保存のためのプロトコルを紹介します。豚...

アクセスが制限されています。このコンテンツを表示するにはログインするか、トライアルを開始してください。

開示事項

一部の著者は利益相反を宣言します。ウイグン博士、レロウチ博士、セトルロ博士は本研究に関連する特許出願を持っています。コルクット・ウイグン博士とバサク・ウイグン博士は、高氷点下臓器保存技術の開発に注力するシルバティカ・バイオテック社の科学諮問委員会に財務的利害関係を持ち、科学諮問委員会のメンバーを務めています。MGHの調査員に対する利益相反は、MGBが利益相反ポリシーに従って管理しています。残りの著者全員が利益相反を認めていない。

謝辞

この研究は、国立衛生研究所(NIH)の補助金No R01AR082825(BEU)、R01EB028782(KU)、DoD RTRP RT240044(KU、AGL、CLC)、Shriners Children's 84308(YB)、ARPA-HサブアワードFY25.1065.001(CLC)、および国立科学財団(NSF)からの助成金番号のもとの一部資金提供を受けました。EEC 1941543(KU)。HOとYBはFondation des Gueules Casséesから資金提供を受けました。フランス外科矯形・再建・エステティック外科協会(SOFCPRE、フランス)からのHOおよびYBへの支援に大変感謝しています。

アクセスが制限されています。このコンテンツを表示するにはログインするか、トライアルを開始してください。

材料

この記事で使用された材料の一覧
名前会社カタログ番号コメント
アドソン鉗子ファインサイエンスツール11019-12手術用工具
アフィニティ・ピクシー酸素供給システムメドトロニックBBP241オキシゲネーター
アンジオカテーテル(24 G)ベクトン・ディキンソン381112キャニュレーションカテーテル
ボビン血清アルブミンシグマ・オルドリッチA9647パーフューゼート成分
二水和カルシウム塩化物シグマ・オルドリッチ223506パーフューゼート成分
二酸化炭素 酸素エアガスUN3156二酸化炭素・酸素混合物およびnbsp;ガス 
カテーテル 24 Gドゥッチャー921048動脈の流管
D-(+)-グルコース一水和物シグマ・オルドリッチ49159パーフューゼート成分
デキサメタゾンシグマ・オルドリッチD2915パーフューゼート成分
デクストレン熱力学406271000パーフューゼート成分
拡張鉗子AROSurgical11.946.1102手術用工具
Excel マイクロソフトスプレッドシート
ヘパリンナトリウム注射ユージア・ファーマ63739-953-25パーフューゼート成分
ヒュムリン レギュラーインスリン ヒトリリー0002-8215-01パーフューゼート成分
ヒドロコルチゾンナトリウム・スクシネートファイザー0009-0011-03パーフューゼート成分
リガクリップエティコンMCS20外科用血管クリップ
リストン・ボーンカッターファインサイエンスツール16104-19手術用工具
塩化マグネシウムヘキサハイドレートシグマ・オルドリッチM9272パーフューゼート成分
マスターフレックスL/S(マスターフレックス)コール・パーマー77200-32ローラーポンプ
顕微外科用鉗子ファインサイエンスツール11253-20手術用工具
骨膜エレベーターAROSurgical46.415.18手術用工具
ポリエチレングリコール35000シグマ・オルドリッチ25322-68-3パーフューゼート成分
塩化カリウムシグマ・オルドリッチ7447-40-7パーフューゼート成分
圧力モニター、携帯型、PM-P-1リビングシステム計測PM-P-1圧力センサー
プリズム グラフパッドv. 10.1.1統計解析ソフトウェア
Radnoti バブルトラップコンプライアンスチャンバーラドノティ130149バブルトラップ
RAPIDPoint 500シーメンス500血液ガスシステム
リプロケーティングソーストライカー5100-37手術用工具
ロンジュールファインサイエンスツール16002-18手術用工具
メス刃(n15)ファインサイエンスツール10015-00手術用工具
メス用刃(n23)ファインサイエンスツール10023-00手術用工具
シルク縫合 3-0エティコンP683H縫合
重炭酸ナトリウムシグマ・オルドリッチS5761パーフューゼート成分
塩化ナトリウムシグマ・オルドリッチS9888パーフューゼート成分
水酸化ナトリウムシグマ・オルドリッチ72068パーフューゼート成分
リン酸ナトリウムモノバシク二水和物;シグマ・オルドリッチ71505パーフューゼート成分
スティーブンス・ハサミAROSurgical07.367.13手術用工具
シリンジ 1 mLBD309659サンプル調達
注射器 10 mLドゥッチャー300912グラフトフラッシュ
サーマルカメラフリップ・ワンhttps://www.flir.fr/products/flir-one-gen-3/?vertical=condition+monitoring&segment=solutions灌流温度モニタリング
チュービング(n°16)マスターフレックス13-310-282機械灌流装置
バンコマイシン塩酸塩スレート・ラン・ファーマシューティカルズ70436-021-82パーフューゼート成分

参考文献

  1. Lellouch, A. G., Lantieri, L. A second chance at life. Camb Q Healthc Ethics. 28 (3), 463-467 (2019).
  2. Tchiloemba, B., et al. Long-term outcomes after facial allotransplantation: Systematic review of the literature. Transplantation. 105 (8), 1869-1880 (2021).
  3. Nowogrodzki, J. World's first whole-eye transplant: The innovations that made it possible. Nature. 633 (8030), 500-501 (2024).
  4. Lico, M., et al. Swallowing function after pioneering partial face and whole eye transplant: Clinical insights. Am J Speech Lang Pathol. 34 (4), 1921-1930 (2025).
  5. Ceradini, D. J., et al. Combined whole eye and face transplant: Microsurgical strategy and 1-year clinical course. JAMA. 332 (18), 1551-1558 (2024).
  6. Abbas, F., et al. Revival of light signalling in the postmortem mouse and human retina. Nature. 606 (7913), 351-357 (2022).
  7. Paradis, S., et al. Chronology of mitochondrial and cellular events during skeletal muscle ischemia-reperfusion. Am J Physiol Cell Physiol. 310 (11), C968-C982 (2016).
  8. Kruit, A. S., et al. Ex-vivo perfusion as a successful strategy for reduction of ischemia-reperfusion injury in prolonged muscle flap preservation: A gene expression. Gene. 701, 89-97 (2019).
  9. He, J., Khan, U. Z., Qing, L., Wu, P., Tang, J. Improving the ischemia-reperfusion injury in vascularized composite allotransplantation: Clinical experience and experimental implications. Front Immunol. 13, 998952(2022).
  10. Dickey, R. M., et al. Composite tissue preservation. Ann Plast Surg. 84 (6), 711-716 (2020).
  11. Messner, F., Grahammer, J., Hautz, T., Brandacher, G., Schneeberger, S. Ischemia/reperfusion injury in vascularized tissue allotransplantation. Curr Opin Organ Transplant. 21 (5), 503-509 (2016).
  12. Markmann, J. F., et al. Impact of portable normothermic blood-based machine perfusion on outcomes of liver transplant. JAMA Surg. 157 (3), 189(2022).
  13. Van Rijn, R., et al. Hypothermic machine perfusion in liver transplantation: A randomized trial. N Engl J Med. 384 (15), 1391-1401 (2021).
  14. Pitchaimuthu, M., Crochet, C., Battula, N. R., Faria, I., Martins, P. N. Machine perfusion organ preservation: Highlights from the American Transplant Congress 2024. Artif Organs. 49 (2), 326-331 (2025).
  15. Berendsen, T. A., et al. A simplified subnormothermic machine perfusion system restores ischemically damaged liver grafts in a rat model of orthotopic liver transplantation. Transplant Res. 1 (1), 6(2012).
  16. Karangwa, S. A., et al. Machine perfusion of donor livers for transplantation: A proposal for standardized nomenclature and reporting guidelines. Am J Transplant. 16 (10), 2932-2942 (2016).
  17. Agius, T., et al. Subnormothermic ex vivo porcine kidney perfusion improves energy metabolism: Analysis using 31P magnetic resonance spectroscopic imaging. Transplant Direct. 8 (10), e1354(2022).
  18. Goutard, M., et al. Exceeding the limits of static cold storage in limb transplantation using subnormothermic machine perfusion. J Reconstr Microsurg. 39 (5), 350-360 (2023).
  19. Burlage, L. C., et al. Optimization of ex vivo machine perfusion and transplantation of vascularized composite allografts. J Surg Res. 270, 151-161 (2022).
  20. Berkane, Y., et al. Towards optimizing sub-normothermic machine perfusion in fasciocutaneous flaps: A large animal study. Bioeng (Basel). 10 (12), 1415(2023).
  21. Berkane, Y., et al. Continuous oxygen monitoring to enhance ex-vivo organ machine perfusion and reconstructive surgery. Biosens Bioelectron. 262, 116549(2024).
  22. Tawa, P., et al. Continuous versus pulsatile flow in 24-hour vascularized composite allograft machine perfusion in swine: A pilot study. J Surg Res. 283, 1145-1153 (2023).
  23. Oubari, H., et al. Development of a 24-h preservation protocol of forearm vascularized composite allotransplants in nonhuman primates using subnormothermic machine perfusion. Transplant Direct. 11 (9), e1849(2025).
  24. Goutard, M., et al. Machine perfusion enables 24-h preservation of vascularized composite allografts in a swine model of allotransplantation. Transpl Int. 37, e100(2024).
  25. Charlès, L., et al. Effect of subnormothermic machine perfusion on the preservation of vascularized composite allografts after prolonged warm ischemia. Transplantation. 108 (11), 2222-2232 (2024).
  26. Kyllar, M., et al. A porcine model: Surgical anatomy of the orbit for maxillofacial surgery. Lab Anim. 50 (2), 125-136 (2016).
  27. Rousou, C., et al. A technical protocol for an experimental ex vivo model using arterially perfused porcine eyes. Exp Eye Res. 181, 171-177 (2019).
  28. Bravo, M. G., Granoff, M. D., Johnson, A. R., Lee, B. T. Development of a new large-animal model for composite face and whole-eye transplantation: A novel application for anatomical mapping using indocyanine green and liquid latex. Plast Reconstr Surg. 145 (1), 67e-75e (2020).
  29. Dickens, B. M. Legal and ethical issues of uterus transplantation. Int J Gynaecol Obstet. 133 (1), 125-128 (2016).
  30. Díaz, L., et al. Ethical considerations in animal research: The principle of 3Rs. Rev Invest Clin. 73 (4), 199-209 (2021).
  31. ARRIVE guidelines. , https://arriveguidelines.org (2024).
  32. MRDC research protections. , https://mrdc.health.mil/index.cfm/collaborate/research_protections/acuro (2024).
  33. NCBI PMC. , https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC6826930 (2024).
  34. Cabanel, L., et al. Establishing a swine model to study uterus dynamic preservation and transplantation. J Vis Exp. (214), e67357(2024).
  35. Meyers, A., et al. Weight gain is an early indicator of injury in ex vivo normothermic limb perfusion (EVNLP). Artif Organs. 47 (2), 290-301 (2023).
  36. Berkane, Y., et al. Towards optimizing sub-normothermic machine perfusion in fasciocutaneous flaps: A large animal study. Bioeng (Basel). 10 (12), 1415(2023).
  37. Berkane, Y., et al. Avancées et perspectives en préservation d'allotransplantations de tissus composites. Bull Acad Natl Med. 208 (9), 1299-1308 (2024).
  38. Brouwers, K., et al. 24-hour perfusion of porcine myocutaneous flaps mitigates reperfusion injury: A 7-day follow-up study. Plast Reconstr Surg Glob Open. 10 (2), e4123(2022).
  39. Cypel, M., et al. Normothermic ex vivo lung perfusion in clinical lung transplantation. N Engl J Med. 364 (15), 1431-1440 (2011).
  40. Agarwal, A., et al. Clinicopathological analysis of uterine allografts including proposed scoring of ischemia reperfusion injury and T-cell-mediated rejection: Dallas uterus transplant study. Transplantation. 106 (1), 167-177 (2022).
  41. Ponticelli, C. Ischaemia-reperfusion injury: A major protagonist in kidney transplantation. Nephrol Dial Transplant. 29 (6), 1134-1140 (2014).
  42. Berkane, Y., et al. VCA supercooling in a swine partial hindlimb model. Sci Rep. 14 (1), 12618(2024).
  43. Filz von Reiterdank, I., et al. Subzero non-freezing of vascularized composite allografts in a rodent partial hindlimb model. Cryobiology. 116, 104950(2024).
  44. Berkane, Y., et al. Supercooling: A promising technique for prolonged preservation in solid organ transplantation, and early perspectives in vascularized composite allografts. Front Transplant. 2, 1269706(2023).
  45. De Vries, R. J., et al. Subzero non-frozen preservation of human livers in the supercooled state. Nat Protoc. 15 (6), 2024-2040 (2020).
  46. De Vries, R. J., et al. Supercooling extends preservation time of human livers. Nat Biotechnol. 37 (10), 1131-1136 (2019).

アクセスが制限されています。このコンテンツを表示するにはログインするか、トライアルを開始してください。

再版と許可

タグ

お問い合わせ
図書館に推薦する

プライバシー

利用規約

ポリシー

著作権 © 2026 MyJoVE Corporation. 無断転載を禁じます。