このコンテンツを表示するには、JoVEへの購読が必要です。 または、無料トライアルをお申し込みください。

方法論記事

学習および記憶行動中の複数の脳領域にわたるアストロサイト-ニューロン活動を記録するための二色ファイバーフォトメトリー法

843 回視聴

⸱

DOI:

10.3791/70582

⸱

2026年4月28日

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Guangxi Key Laboratory of Special Biomedicine/Advanced Institute for Brain and Intelligence, School of Medicine, Guangxi University, 2Brain Research Center and State Key Laboratory of Trauma and Chemical Poisoning, Third Military Medical University, 3Department of Neurology, Gansu Provincial Central Hospital

この記事について

サマリー

このプロトコルは、複数の記憶関連脳領域にまたがるニューロンおよびアストロサイトからのカルシウム信号を同時に記録する方法を包括的に説明し、学習および記憶行動のパラダイムにおける応用を示しています。

要約

学習と記憶は、分散した脳領域をまたぐニューロンとアストロサイト間の協調に大きく依存しています。アストロサイトはシナプス伝達と神経の興奮性を調節し、記憶関連回路内の情報の符号化と統合に寄与します。アストロサイトとニューロンの地域内および地域間相関は、記憶障害や認知障害の理解に不可欠です。しかし、記憶行動中の複数の領域にわたるアストロサイトおよびニューロン活動を同時に監視することは技術的には依然として困難です。ここでは、アストロサイトやニューロンからのカルシウム信号を複数の記憶関連領域に同時に記録できる方法を提示します。この戦略は、細胞型特異的な二色遺伝子符号カルシウム指示器(GECI)、多チャネルファイバーフォトメトリーシステム、同期行動追跡を組み合わせ、内側前頭前野(mPFC)、海馬CA1領域、内側内嗅皮質(MEC)における神経細胞および星形細胞活動のリアルタイムモニタリングを実現します。代表的な結果は、物体認識課題中に領域や細胞タイプを超えた協調的なカルシウム動態を示しています。この手法は、学習および記憶プロセスの基盤となるアストロサイト–ニューロンの相互作用を検証するための再現可能かつ効率的な実験的枠組みを提供します。

概要

学習と記憶は、情報を獲得、保存、取り出す基本的な認知プロセスであり、適応行動の形成に不可欠です。これらのプロセスは、空間ナビゲーション、物体認識、文脈的連想、意思決定など、さまざまな複雑な機能を支えています。さらに、アルツハイマー病、加年性認知疾患、外傷性脳損傷などの認知機能障害は、記憶形成に異常を示します。したがって、学習と記憶の神経基盤を包括的に理解するには、異なる細胞タイプ間の動的な相互作用を明らかにする必要があります。この相互作用は、情報の符号化と検索の過程で、これらの領域内でおよび領域間で起こります。

従来、記憶形成は主に神経活動によって決定されると考えられていました。しかし、広範な研究により、アストロサイトは情報の符号化、統合、検索を著しく調節することが示されています。これらはシナプス伝達の調節、神経の興奮性の調節、グリオ伝達物質の放出、代謝支援の提供によってこれを実現します。アストロサイトはニューロンと動的に相互作用し、双方向の通信は総称して「アストロサイト-ニューロンネットワーク」と呼ばれます9,10,11。したがって、アストロサイトとニューロン間の協調した相互作用を理解することは、学習と記憶の細胞およびネットワークのメカニズムを理解する上で極めて重要です。

学習と記憶は、複数の脳領域にわたる情報の動的統合に依存しています。アストロサイトとニューロンの相互作用は局所的なマイクロ回路に限定されず、記憶に関与する分散した脳領域、すなわち内側前頭前野(mPFC)、海馬CA1領域、内側内嗅皮質(MEC)に及びます。mPFCは記憶の定着や長期記憶の調節に関与していることが示されています。CA1はエピソード記憶の符号化と再活性化に中心的役割を果たします。MECは空間的およびマルチモーダル情報統合のハブとして機能し、海馬・皮質回路12、13、14、15、16に不可欠な入力を提供します。蓄積される証拠は、これらの領域のアストロサイトがニューロンと協調した横断的な動態に参加し、学習と記憶中の情報の流れや状態遷移に重要な役割を果たしていることを示唆しています17,18。

記憶処理におけるアストロサイトとニューロンの相乗効果の認識は高まっていますが、自由に動く動物の行動中に複数の記憶関連脳領域にわたるアストロサイトとニューロンのカルシウム活動を同時に監視することには、依然として大きな技術的課題が残っています。二光子イメージングは高い空間分解能を持つが、深度と頭部固定の制限がある19,20;マルチチャネル電気生理学は高時間分解能の記録を可能にしますが、細胞型特異性に欠け、アストロサイト性カルシウム信号を識別できません。そのため、自由に動くマウスの複数の記憶関連脳領域にわたってアストロサイトおよびニューロンカルシウム信号を同時に記録できる手法が開発されました。遺伝的にコードされたカルシウム指示薬(GECI)は、Ca2+依存的なCaM/M13の立体構造変化を通じて、遺伝的にコードされた蛍光体の蛍光を調節する細胞内Ca2+の動態を報告します。二色GECIアプローチは、緑色および赤色のカルシウムセンサーなどのスペクトル分離可能な指標と細胞型特異的プロモーターを活用し、同じ脳領域内でアストロサイトおよびニューロンCa2+活性を同時に記録することを可能にします。細胞型特異的な二色GECI(GCaMP6fおよびjRGECO1a)とマルチチャネルファイバーフォトメトリーシステムを組み合わせることで、mPFC、CA1、MECのニューロンおよびアストロサイトにおけるカルシウム活性のリアルタイムモニタリングが実現しました。さらに、新しい物体認識(NOR)課題を例に挙げると、学習課題において脳領域や細胞タイプ間で協調したカルシウム動態が示されています。この手法は、学習および記憶中の脳領域をまたぐアストロサイト-ニューロンアンサンブル活動を調査するための再現性が高く信頼性が高く、スケーラブル性の高いプロトコルです。

アクセスが制限されています。このコンテンツを表示するにはログインするか、トライアルを開始してください。

プロトコル

すべての動物実験は第三軍医大学動物ケア・利用委員会(動物倫理承認番号:AMUWEC20230126)によって承認され、第三軍医科大学の実験動物のケア・利用ガイドに従って倫理的に動物の扱いを確実にするために実施されました。試薬および使用機器は 材料表に記載されています。

実験者の安全を確保するため、生きた動物やウイルスベクターを含むすべての実験手順は、保護服、滅菌手袋、マスクを着用した状態で実施されました。すべての器具は使用前に徹底的に滅菌され、実験の表面は実験前後に70%エタノールで清掃されました。残った資材は機関の廃棄物処理規則に従って処分されました。すべての試薬や機器は、皮膚や目に直接触れないように扱われました。

1. 動物の調製とウイルス取り扱い

  1. 4ヶ月のC57BLと6匹のマウス(両性)を12時間の明暗サイクルで飼育し、 自由に 餌や水を得ます。
  2. AAV5-GfaABC1D-GCaMP6fまたはAAV9-hSyn-jRGECO1aを氷上で溶かし、使用直前に0–4°Cで使用します。
  3. 引き上げたガラスマイクロピペット(チップ径15〜25μm)を注射器に接続し、マイクロインジェクションポンプに取り付けます。
  4. マウスを無菌の手術用プラットフォームに置き、すべての器具を70%エタノールで消毒します。

2. 立体型ウイルス注射

注:本研究では二段階のウイルス注射戦略が用いられました。現在の実験条件下では、この戦略は信頼性と安定的に実施可能であり、その結果の発現パターンは期待される細胞型特異的プロモータープロファイルと整合しています。

  1. 最初の手術:アストロサイトに対するAAV5-GfaABC1D-GCaMP6f(抗体価:7 ×10 12 vg/mL)注射
    1. チャンバー内で3%イソフルランで麻酔を誘導し、その後、ノーズコーン を通じて 0.8%–1.2%イソフルランで麻酔を維持します(機関承認プロトコルに従い)。
    2. 体温を37〜38°Cに保ち、温熱パッドを使用し、角膜乾燥を防ぐために眼軟膏を塗布します。
    3. 頭皮の毛を取り除き、皮膚を徹底的に消毒してください。頭蓋骨の表面を露出させるために中央線の切開をしてください。
    4. 頭部を立体誘導器に入れ、ブレグマ縫合糸とラムダ縫合糸を同じ水平面に調整し、さらにフレームを調整してブレグマから2mm外側のポイントが水平になるようにします。
    5. マウスブレインアトラスを用いて立体的座標を特定し、ブレグマを基準点とします。
      mPFC:AP +1.8 mm、ML +0.3 mm、DV −3.0 mm
      CA1:AP −2.1 mm、ML +1.6 mm、DV −1.2 mm
      MEC:AP −4.5 mm、ML −2.9 mm、DV −2.0 mm
    6. 各部位の上に直径0.6mmの円形開頭術をドリルし、頭蓋骨を開けた後も硬膜を湿らせ無傷のまま保ちます。
    7. GCaMP6fウイルスを5 nL/sで注射器に注入し、注射器を立体誘導アームに挿入します。
    8. ピペットをゆっくり下げ、150 nLを0.6 nL/sで注入し、8分間保持してから0.1 mm/sで引き抜きます。この手順をすべての地域で繰り返します。
    9. 切開部を組織接着剤で封印し、ウイルス発現まで2週間待ちます。
  2. 二次手術:AAV9-hSyn-jRGECO1a(抗体価:1 ×10 13 vg/mL)神経細胞注射。
    注:手術は最初のウイルス注射から14日後に行われました。
    1. 上記の通り麻酔を誘導し維持します(ステップ2.1.1)。
    2. 体温を保ち、目を守りましょう。
    3. 頭皮の正中線を再び開き、頭蓋骨を水平にします。
      注:頭蓋骨はブレグマとラムダを同じ水平面に整列させることで水平化されました。
    4. 最初の手術の開頭切開窓と同じ場所に組織の破片が透明で、硬膜が無傷で露出しています。
    5. ブレグマを基準点として座標を調整し、前述の座標と深度を厳密に使う。
    6. jRGECO1aウイルスを5 nL/sで充填し、注射器を装着します。
    7. 150 nLを0.6 nL/sで注入し、8分間保持してゆっくりと引き抜きます。この手順をすべての部位で繰り返し、ウイルス発現まで3週間待ちます。

3. 多部位ファイバーフォトメトリープローブの埋め込み

注意:jRGECO1a注射直後に実施してください。

  1. 光ファイバーフェルールを立体誘導ホルダーに取り付けます。
  2. 繊維(1.25mmフェルール、200μmコア、NA 0.39)をウイルス注入深度より100〜150μm上に位置させます:
    mPFC:AP +1.8 mm、ML +0.3 mm、DV −2.9 mm
    CA1:AP −2.1 mm、ML +1.6 mm、DV −1.1 mm
    MEC:AP −4.5 mm、ML −2.9 mm、DV −1.9 mm
  3. 開頭切開部を組織接着剤で密封し、フェルールはデンタルセメントで固定します。

4. マルチチャンネルファイバーフォトメトリー記録

注:2つのカルシウム指標の安定かつ完全な発現を確保するため、2回目のウイルス注入から3週間後に多チャネル光ファイバー光度測定が行われ、記録が行われました。

  1. マウスをファイバーシステムとアリーナに慣れさせ、3日間続けます。
    1. ウイルス発現を3週間行った後、短時間3%イソフルランで麻酔します。
    2. 束縛された光ファイバーの一端をファイバー光度測定システムに接続します。
    3. 励起光を2つの波長、470 nmと560 nmに設定します。
    4. 取得周波数を30Hzに設定してください。
    5. 束縛されたファイバーのもう一方の端にある3つの枝を3つの脳領域に接続します:チャンネル1からmPFC、チャネル2からCA1、チャンネル3からMECへ。
    6. ネズミを辺長50cmの開けた場所に置き、自由に探索させてください。
    7. 10分後に光ファイバーを外し、ネズミを元のケージに戻します。
  2. 新規物体認識課題におけるファイバー光度測定記録
    注意:各試験前にプラットフォームと物体を75%エタノールで清掃してください。
    1. 同じ物体を2つの対角線の四分円に置きます。
    2. 光ファイバー束を軽麻酔状態で接続してください。
    3. ネズミに10分間物を探索させ、その後繊維を外さずにケージに戻します。
    4. マウスを用いた新規物体認識テスト中にファイバーフォトメトリー記録を行う。
      注意:安定した記録データのために動きのアーティファクトが過剰の場合は試験を除外してください。
      1. 刺激レーザーの調整:
        GCaMP6f(アストロサイト)は470nm
        jRGECO1a(ニューロン)は560nmです。
      2. カルシウム信号を30Hzで記録し、30Hzのビデオトラッキングと同期させます。取得開始時に、ビデオフレーム内にレーザーダイオードを位置付け(マウスの視野外側)、時間的なマーカーとして使います。
      3. 学習フェーズの10分後に、1つのオブジェクトを新しいオブジェクトに置き換え、マウスを戻して10分間探索しながら記録します。
      4. セラミックフェルールで繊維を外し、ネズミをケージに戻してください。

5. データ処理と解析

注意:ファイバー光度測定記録におけるCa2⁺の過渡現象は、その振幅がノイズバンド21,22,23の標準偏差の3倍を超える場合にのみ、真の信号と分類してください。新規物体認識テスト(NORT)プロトコル24:D精細な物体の相互作用は、ネズミが物体に物理的に接触し、鼻でつついたり嗅いだりする現象を指します。信号定量化のために、基準線を-2〜-1秒のウィンドウ(相互作用開始時刻t=0時の相対的)の平均信号と定義します。ペリイベント解析ウィンドウは、各オブジェクトインタラクション開始の2秒前から4秒まで、確立されたプロトコルに従って設定します。

  1. 蛍光トレースを解析ソフトウェアにインポートします。
    注:蛍光信号処理は標準的なファイバー光度計ワークフローに従い、独自の解析ソフトウェアを使用して実施されました。ソフトウェア自体はオープンソースではなく、共有できません。ファイバー光度測定信号処理に関する一般的な方法論的検討については、最近の方法論報告書25を参照してください。
  2. 同期ビデオを用いて基準補正を行い、NOR課題の開始時にカルシウム信号を整列させます。
  3. ΔF/FをZスコアに変換して、領域間および二色比較を行います9:
    figure-protocol-1
    figure-protocol-2
    注:
    (ΔF/F)平均:ΔF/Fの平均。
    (ΔF/F)標準偏差:ΔF/Fの標準偏差。
    Fraw:生の蛍光強度。
    Fベースライン:ベースライン蛍光強度(あらかじめ定められたベースライン期間の平均)。
  4. 新たな物体と馴染みのある物体の探索におけるアストロサイトおよび神経カルシウム応答の曲線下面積(AUC)などの指標を定量化します。

6. 記録後の組織学的検証

  1. 反射が完全に失われるまで、ペントバルビタールの過剰投与で麻酔を行います。
  2. 経心内生理食塩水による灌流を行い、その後4%パラホルマルデヒド(PFA)を投与します。
  3. 脳を慎重に解剖し、4%PFAで4°Cで12〜24時間固定します。
  4. 脳をPBSで30%ショ糖に移し、組織が沈むまで4°Cで凍結保護を行います。
  5. 脳を最適な切断温度の化合物に埋め込み、冷凍し、クライオスタットで40μm厚の冠膜断片を切断します。
  6. ウイルス発現と繊維の位置を確認するために免疫蛍光染色を行います。

アクセスが制限されています。このコンテンツを表示するにはログインするか、トライアルを開始してください。

結果

上記のプロトコルに基づき、4か月齢のC57マウスのmPFC、CA1、MECを標的としたデュアルカラーマルチサイトファイバー記録が実施されました。本研究では、2段階のウイルス注入戦略を導入し、2つの指標を順次導入しました。実験条件下では、この戦略は信頼性かつ安定的に実施可能であり、得られる発現パターンは期待される細胞型特異的プロモータープロファイルと整合しています。

0日目にAAV5-GfaABC1D-GCaMP6fを3領域に注入し、14日目にAAV9-hSyn-NES-jRGECO1aを同じ座標に注入し、直後に線維埋め込みを行った(図1)。ウイルス発現を3週間行った後、自由に動くマウスのオープンフィールド探査および新規物体認識課題の両方で、アストロサイトおよびニューロンカルシウム信号が同時に記録されました。

ウイルス発現の細胞型特異性を検証するために、3つの領域すべてに対して免疫組織化学が実施されまし...

アクセスが制限されています。このコンテンツを表示するにはログインするか、トライアルを開始してください。

ディスカッション

本研究では、マウスの複数の記憶関連脳領域におけるアストロサイトおよびニューロンカルシウム活動を同時に記録する方法を開発しました。単一領域イメージング28や電気生理学的手法とは異なり、多領域同期記録は分散記憶ネットワーク間の協調した動態を捉え、学習と記憶の研究に強力なツールであることが証明されています。細胞型特異的なデュアルカラーGECIとマルチチャネルファイバーフォトメトリーシステムおよび行動連動型取得を組み合わせることで、この手法は脳領域や細胞タイプをまたいで集団活動の長期的安定記録を可能にします。このプラットフォームは、学習および記憶行動に関与するアストロサイト–ニューロン回路内の異なる空間的機能的結合性のマッピングを可能にします。

共注射は蛍光指標

アクセスが制限されています。このコンテンツを表示するにはログインするか、トライアルを開始してください。

開示事項

著者による金銭的またはその他の利益相反は一切宣言されていません。

謝辞

ジャ・ロウさんは技術支援で、Sai Te Xin Si(AIツール)は言語編集支援で表彰されています。この研究は、中国国家自然科学基金(助成金番号82371485、82588301、32400932)および重慶自然科学基金(助成金番号)から支援を受けました。CSTB2024NSCQ-JQX0024、2024年NSCQ-MSX1104)。

アクセスが制限されています。このコンテンツを表示するにはログインするか、トライアルを開始してください。

材料

この記事で使用された材料の一覧
名前会社カタログ番号コメント
75 RN 5uL SYR W/O NEEDLEHamilton7634-01ウイルス注入用マイクロピペットに接続
AAV5-GfaABC1D-GCaMP6fAddgene52925アストロサイト特異的なGCaMP6f発現
AAV9-hSyn-NES-jRGECO1aAddgene100854ニューロン特異的な赤シフトカルシウムインジケーター
Bepanthen Eye and Nasal OintmentBepanthenMA0008角膜の乾燥を防ぐ
セラミックスリーブ付きバンドル光ファイバーInperBFO-1x3-W1.25埋め込まれたファイバーを測光システムに接続
カメラMind VisionMV-SUA502C-Tカルシウム信号と同期した行動ビデオ
歯科用セメントNISSINSuper-Bond C&Bフェルールを頭蓋骨に固定
フェルールホルダーInperSCH-1.25埋め込み中にセラミックフェルールをしっかりと保持
イソフルラン気化器&麻酔システムRWD Life ScienceR510-29麻酔誘導と維持用
マルチチャンネルファイバー測光システムRWD Life ScienceR821デュアルカラー記録用
OFRSソフトウェアRWD Life Science記録されたカルシウム信号を分析
光ファイバーRWD Life ScienceR-FOC-BL200C-39N標的脳領域に埋め込まれる
ステレオタキシック機器RWD Life Science68801精密なウイルス注入とファイバー埋め込み用
シリンジポンプKD Scientific788130制御された速度でウイルスを送達
組織接着剤3M Animal Care Products1469SB Vetbond切開部の閉鎖用

参考文献

  1. Eichenbaum, H. Memory: Organization and Control. Annu Rev Psychol. 68, 19-45 (2017).
  2. Kamatham, P. T., Shukla, R., Khatri, D. K., Vora, L. K. Pathogenesis, diagnostics, and therapeutics for Alzheimer’s disease: Breaking the memory barrier. Ageing Res Rev. 101, 102481(2024).
  3. Graff-Radford, J., et al. New insights into atypical Alzheimer’s disease in the era of biomarkers. Lancet Neurol. 20 (3), 222-234 (2021).
  4. Araque, A., et al. Gliotransmitters travel in time and space. Neuron. 81 (4), 728-739 (2014).
  5. Khakh, B. S., Sofroniew, M. V. Diversity of astrocyte functions and phenotypes in neural circuits. Nat Neurosci. 18 (7), 942-952 (2015).
  6. Di Castro, M. A., et al. Local Ca2+ detection and modulation of synaptic release by astrocytes. Nat Neurosci. 14 (10), 1276-1284 (2011).
  7. Savtchouk, I., Volterra, A. Gliotransmission: Beyond Black-and-White. J Neurosci. 38 (1), 14-25 (2018).
  8. Perea, G., Navarrete, M., Araque, A. Tripartite synapses: Astrocytes process and control synaptic information. Trends Neurosci. 32 (8), 421-431 (2009).
  9. Wang, H., et al. Mapping multi-regional functional connectivity of astrocyte-neuronal networks during behaviors. Neurophotonics. 11 (4), 045010(2024).
  10. Lines, J., Martin, E. D., Kofuji, P., Aguilar, J., Araque, A. Astrocytes modulate sensory-evoked neuronal network activity. Nat Commun. 11 (1), 3689(2020).
  11. Lines, J., et al. Astrocyte-neuronal network interplay is disrupted in Alzheimer’s disease mice. Glia. 70 (2), 368-378 (2022).
  12. Brincat, S. L., Miller, E. K. Frequency-specific hippocampal-prefrontal interactions during associative learning. Nat Neurosci. 18 (4), 576-581 (2015).
  13. DeNardo, L. A., et al. Temporal evolution of cortical ensembles promoting remote memory retrieval. Nat Neurosci. 22 (3), 460-469 (2019).
  14. Kitamura, T., et al. Engrams and circuits crucial for systems consolidation of a memory. Science. 356 (6333), 73-78 (2017).
  15. Gonzalo Cogno, S., et al. Minute-scale oscillatory sequences in medial entorhinal cortex. Nature. 625 (7994), 338-344 (2024).
  16. Roudi, Y., Moser, E. I. Grid cells in an inhibitory network. Nat Neurosci. 17 (5), 639-641 (2014).
  17. Williamson, M. R., et al. Learning-associated astrocyte ensembles regulate memory recall. Nature. 637 (8045), 478-486 (2025).
  18. Curreli, S., Bonato, J., Romanzi, S., Panzeri, S., Fellin, T. Complementary encoding of spatial information in hippocampal astrocytes. PLoS Biol. 20 (3), e3001530(2022).
  19. Oheim, M., Michael, D. J., Geisbauer, M., Madsen, D., Chow, R. H. Principles of two-photon excitation fluorescence microscopy and other nonlinear imaging approaches. Adv Drug Deliv Rev. 58 (7), 788-808 (2006).
  20. Helmchen, F., Denk, W. Deep tissue two-photon microscopy. Nat Methods. 2 (12), 932-940 (2005).
  21. Zhang, K., Chen, X. Sensory response in host and engrafted astrocytes of adult brain in vivo. Glia. 65 (12), 1867-1884 (2017).
  22. Qin, H., et al. A visual-cue-dependent memory circuit for place navigation. Neuron. 99 (1), 47-55.e44 (2018).
  23. Yao, J., et al. A corticopontine circuit for initiation of urination. Nat Neurosci. 21 (11), 1541-1550 (2018).
  24. Mirzayi, P., Shobeiri, P., Kalantari, A., Perry, G., Rezaei, N. Optogenetics: Implications for Alzheimer’s disease research and therapy. Mol Brain. 15 (1), 20(2022).
  25. Simpson, E. H., et al. Lights, fiber, action! A primer on in vivo fiber photometry. Neuron. 112 (5), 718-739 (2024).
  26. Chen, T. W., et al. Ultrasensitive fluorescent proteins for imaging neuronal activity. Nature. 499 (7458), 295-300 (2013).
  27. Dana, H., et al. Sensitive red protein calcium indicators for imaging neural activity. Elife. 5, 12727(2016).
  28. Serikov, A., Martsishevska, I., Shin, W., Kim, J. Protocol for in vivo dual-color fiber photometry in the mouse thalamus. STAR Protoc. 5 (2), 102931(2024).
  29. Gilbert, C. D. Horizontal integration and cortical dynamics. Neuron. 9 (1), 1-13 (1992).
  30. de Pasquale, F., Corbetta, M., Betti, V., Della Penna, S. Cortical cores in network dynamics. Neuroimage. 180 (Pt B), 370-382 (2018).
  31. Suthard, R. L., et al. Engram reactivation mimics cellular signatures of fear. Cell Rep. 44 (10), 116409(2025).
  32. Sandoval, K. C., Rychlik, J., Choe, K. Y. Calcium dynamics in hypothalamic paraventricular oxytocin neurons and astrocytes associated with social and stress stimuli. eNeuro. 12 (5), (2025).
  33. Srinivasan, R., et al. Ca(2+) signaling in astrocytes from Ip3r2(-/-) mice in brain slices and during startle responses in vivo. Nat Neurosci. 18 (5), 708-717 (2015).
  34. Spellman, T., et al. Hippocampal-prefrontal input supports spatial encoding in working memory. Nature. 522 (7556), 309-314 (2015).
  35. Hu, W., et al. Optogenetics sheds new light on tissue engineering and regenerative medicine. Biomaterials. 227, 119546(2020).
  36. Liddelow, S. A., et al. Neurotoxic reactive astrocytes are induced by activated microglia. Nature. 541 (7638), 481-487 (2017).
  37. Shah, D., et al. Astrocyte calcium dysfunction causes early network hyperactivity in Alzheimer’s disease. Cell Rep. 40 (8), 111280(2022).
  38. Jiménez-Balado, J., Eich, T. S. GABAergic dysfunction, neural network hyperactivity and memory impairments in human aging and Alzheimer’s disease. Semin Cell Dev Biol. 116, 146-159 (2021).
  39. Lin, R., Guo, Y., Jiang, W., Wang, Y. Advanced technologies for the study of neuronal cross-organ regulation: a narrative review. Adv Technol Neurosci. 1 (2), 166-176 (2024).
  40. Reitman, M. E., et al. Norepinephrine links astrocytic activity to regulation of cortical state. Nat Neurosci. 26 (4), 579-593 (2023).

アクセスが制限されています。このコンテンツを表示するにはログインするか、トライアルを開始してください。

再版と許可

さらに記事を探す

2色フォトメトリーカルシウムイメージング遺伝子コード型インジケーター内側前頭前皮質海馬CA1領域内側嗅皮質行動トラッキング
学習および記憶行動中の複数の脳領域にわたるアストロサイト-ニューロン活動を記録するための二色ファイバーフォトメトリー法
お問い合わせ
図書館に推薦する

プライバシー

利用規約

ポリシー

著作権 © 2026 MyJoVE Corporation. 無断転載を禁じます。