複合管理 II

多くの実験では、化合物を経口または局所経路で動物に投与することが必要であり、これにより、その方法が実験物質の自然な摂取をよりよく模倣します。

経口投与の場合、化合物を飲料水に溶解するか、動物が消費する食物に組み込むことができます。経口投与の別の、より正確な方法は、大きな針を使用して化合物を直接胃に入れる経口強制経口投与です。一方、局所剤は皮膚表面に直接置くことができ、一般的には、それが塗布される領域のみに影響を与えることを意図しています。これらの戦略にはそれぞれ利点と制限があり、このビデオで説明します。その後、これらの化合物投与技術を実験動物で実施する方法と、その応用例の一部を示します。

プロトコルを掘り下げる前に、これらの手法の考慮事項、利点、欠点を確認しましょう。錠剤、カプセル、または液体による経口投与は、ヒトにおける薬物投与の最も一般的に使用される方法です。ただし、錠剤やカプセルはげっ歯類には実用的ではないため、一般的な経口投与は、化合物を飲料水または食品に溶解することによって達成されます。

飲料水を介して投与する場合、嗜好性を高めるためにスクロースを水に加えることがよくあります。ただし、通常の水分摂取を促進し、甘い味のために過度の飲酒をしないように、細かくバランスをとる必要があります。良いルールは、10%のショ糖溶液から始めて、摂取量に応じて調整することです。動物に経口投与する別の方法は、特殊な食品を使用することです。フェンベンダゾールなどの一般的に投与される化合物が組み込まれた市販の飼料があります。げっ歯類の飼料会社は、実験要件を満たすために特殊なテストダイエットを作成することもできます。

この形態の経口投与の利点は、非侵襲的であり、化合物を連続的に投与し、ヒトの経口薬物投与を模倣することです。ただし、化合物の摂取量は、食物や水の受け入れ、化合物の安定性、およびケージ内に存在する動物の数に依存するため、精度に欠けます。正確な投与が実験にとって重要でない場合、この非侵襲的な方法は動物の健康にとって最善です。

より正確な経口投与のために、特定の時間に指定された量で化合物を直接胃に沈着させる経口強制経口を使用することができます。ただし、適切に拘束されていないと動物に深刻な損傷を与える可能性があるため、この技術を実行するには適切なトレーニングが必要です。

局所剤に関しては、クリーム、ローション、軟膏、スプレー、ジェルなどがあります。通常、局所薬剤は、適用される領域のみに影響を与えることを目的としています。ただし、血流に吸収されることもあり、これは意図的な場合と意図的でない場合があります。この吸収は、皮膚の状態、利用される表面積、物質の濃度、接触時間、および薬剤の脂質溶解度に依存します。

さて、経口投与と外用投与の方法の背景についてお話ししてきましたので、まずは飼料や水による経口投与からプロトコールを学んでいきましょう。

投与量の計算には、まず投与する予定の用量を知る必要があります。次に、体重を決定する必要があります。個々の動物の体重を量るのではなく、特に指定がない限り、マウスまたはラット系統の平均体重を計算に使用できます。第三に、ケージあたりの動物の数に注意する必要があり、第四に、ケージあたりの1日の平均水または食物消費量を知る必要があります。

配合食品や溶解化合物を含む飲料水は、化合物が不安定であるため、標準的な食品や水よりも頻繁に交換する必要がある場合があることを覚えておいてください。一部の化合物は光感受性である場合もあれば、時間の経過とともに沈殿する場合もあります。

それでは、マウスやラットに経口強制経口投与を行うことで、正確な用量を経口投与する方法を学びましょう。

最初のステップは、手順に適した針を選択することです。これらは、ステンレス鋼で構成された再利用可能なものか、柔軟なプラスチックシャフトとシリコンチップで使い捨て可能です。マウスの場合、長さが1.5インチの20〜25ゲージの直線または湾曲した投与針が適切です。ラットの場合は、長さが2〜3インチの18〜20ゲージの直線または湾曲した投与針を選択します。正しいニードルゲージとシリンジの選択は、容量と粘度によっても異なります。これらの要因の影響を理解するために、Compound Administration Iのビデオをご覧ください。濃厚な液体の投与には、ルアーロックシリンジが好ましい。

選択後、針を回さずにバレルの目盛りが読み取れるように、注射器を針に取り付けます。針が食道に配置されると、回転すると食道壁が破裂し、動物が死亡する可能性があるため、これは重要です。次に、投与する溶液の正しい量をシリンジに充填します。

この方法は、気管への偶発的な配置を防ぐために、嚥下反射が無傷の意識のある動物に常に実行する必要があります。この手順には、適切な拘束技術を使用することが重要です。マウスの場合は、頭の付け根で皮膚をつかみ、首筋をしっかりと保持します。これにより、ヘッドが左右に動く機会が最小限に抑えられます。また、体が頭から尾まで一直線に吊り下げられていることを確認してください。ねじれると、強制針を食道に配置するのが妨げられます。.体の回転を防ぐために、後肢も安定させる必要があります。

ネズミを拘束するには、首の両側にある人差し指と中指を使って肩越しにネズミをつかみます。これにより、ネズミが頭を左右に回すのを防ぐことができます。親指、3本目、4本目の指が胸を包み込み、動物が前後に動くのを防ぎます。

動物を適切に拘束したら、カーブを下向きにし、首の自然なカーブに合わせて針を配置します。次に、右側または左側から、歯茎を通って、切歯と大臼歯の間を咽頭の後ろに向かって斜めに針を口に挿入します。針が口腔内に配置されたので、それを使用して、鼻が上を向くまで頭を後ろに傾けます。この時点で、針は食道に簡単に滑り込むはずです。針が胃に配置されたら、化合物を静かに沈着させます。次に、針を回転させないように、動物から針を取り外します。針を無理に押し下げないことが重要です。抵抗を感じる場合は、取り外して再度お試しください。処置中に、動物がチアノーゼや呼吸困難の兆候を示した場合、または口から溶液が流れている場合は、投与針をすぐに取り外し、動物をケージに解放する必要があります。.

最後に、実験動物への局所投与の手順を確認しましょう。動物に麻酔をかけることから始めます。これは通常、速効性吸入剤を使用して行われ、動物の迅速な回復を可能にします。麻酔投与の詳細については、このコレクションの別のビデオをご覧ください。

次に、バリカンを使用して、塗布領域からすべての毛皮を取り除きます。切り傷を避けるために、バリカンの平らな面を皮膚に当て、毛の成長方向とは反対の方向に剃ります。その後、水で肌をきれいにし、ガーゼパッドで乾かします。次に、綿の先端のアプリケーターを使用して、物質を直接皮膚に塗布します。最良の結果を得るには、厚い層を1回だけ塗布するのではなく、軟膏またはクリームの薄い層を数層塗布します。グルーミングによる局所塗布化合物の誤飲を防ぐため、小さな首輪やシールドを装着して、動物が患部に届かないようにしてください。さらに、ケージメイトからの同種ルーミングを防ぐために、動物は個別に収容する必要があります。

これらの代替投与経路を理解したところで、今日の生物医学研究でそれらがどのように使用されているかを見てみましょう。

経口強制経口の重要な用途の1つは、胃腸管への直接的な影響を研究するための物質の正確な投与です。ここでは、研究者たちはこの方法を使用して、形質転換したプロバイオティクス酵母を動物の胃に直接送達しました。そして、彼らは、小腸からの組織化されたリンパ結節であるパイエル板を解剖して、送達された微生物の付着を研究しました。

非侵襲的な経口経路は、食品媒介感染の自然な手口を模倣するために使用できます。この実験では、科学者は、汚染された食品の摂取によるマウスのリステリア菌の経口感染のモデルを開発しました。感染後、研究者たちは小腸、結腸、脾臓、肝臓、胆嚢などのさまざまな臓器を採取し、これらの組織への感染の広がりを分析しました。

最後に、一部の研究者は、紫外線が日焼けにつながるメカニズムを研究することに興味を持っています。ここでは、科学者たちは局所経路を使用して、表皮メラニン(UV保護剤)の産生を誘導する薬理学的物質を適用しました。その後、彼らは人間の研究と同様のプロトコルを使用して、UV放射によって誘発される紅斑に対する局所適用剤の保護効果を調べました。

JoVEの経口投与および局所投与を扱う化合物投与法の第2弾をご覧になりました。これで、飼料または水を使用して動物に経口投与する方法と、より正確な経口強制経口投与を行う方法を理解する必要があります。最後に、局所投与の考慮事項と方法、およびこれらのさまざまな技術の応用について知っておく必要があります。いつものように、ご覧いただきありがとうございます!