Name: ショウジョウバエの勉強攻撃（ミバエ類） (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2007-02-25T00:00:00.000+00:00
Duration: 11 min 6 s
Description: 学ぶショウジョウバエの攻撃行動の神経機構。個別飼育バイアルで社会的に未経験の個体を準備し、制御された闘争実験を行う方法です。遺伝的要因と行動神経科学の理解に貢献します。

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

1。チャンバ壁の組み立て<ol><li> 、二つのプレーンスライドガラスを取るつのエッジで真ん中をマークし、ガイドとして直線の定規を使用して、ダイヤモンドカッターでガラスを得点する。 </li><li>あなたがこする音が聞こえるまで、前後に数回をダイヤモンドカッターをスライドさせます。 </li><li>ガラスを洗浄し、割れたガラスのレセプタクル上の2つの紙タオルでそれを開催し、得点面で得点ラインに穏やかな圧力の近くを適用する 二つにスライドを分割することから離れて直面して。 </li><li>寛大にガラスの一枚の縁に沿ってガラスの接着剤を適用し、最初の部分に直角に接着剤に対するガラスの2番目の部分を押してください。平坦な表面（アルミ箔、ろう紙または普通紙）を下に置き、少なくとも1時間に設定することができます。 </li><li>時間後に、正方形のチャンバーを形成し、一晩硬化できるように、接着剤ステップのアプリケーションを繰り返す。 <img src="/files/ftp_upload/old/155_2008_9_3_3/155_figure-01.png" alt="図1" width="358" height="266" /> </li></ol> 2。ペトリ皿の中で壁を配置する<ol><li>ペトリ皿の上に乗り、2％アガロース（脱イオン水にマイクロ波アガロースが完全に溶けるまで）の加熱溶液と5mm以上の深さに埋める。 </li><li>数分待ってから、まだ溶解しながら、皿の中央に室の壁を配置。ペトリ皿の底を取る、それ底面側を上に置きます。火炎加熱ストレート解剖針を用いて、換気のための皿の中央に小さな穴（&gt; 1mm）ののセットを作ります。チャンバーにハエを導入するための側へわずかに大きい穴（〜4mmの直径）を作る。大きい穴の上に取り外し可能なラベルのテープを貼り。 <img src="/files/ftp_upload/old/155_2008_9_3_4/155_figure-02.png" alt="図2" width="447" height="207" /> <img src="/files/ftp_upload/old/155_2008_9_3_5/155_figure-03.png" alt="図3" width="328" height="211" /> </li></ol> 3。食品のカップを作る<ol><li>食べ物が溶融点にフライ食品のバイアルを加熱する。上部の平らな面を形成するために、それを充填シンチレーションバイアルの閉鎖に食べ物を転送するためにパスツールピペットを使用してください。空気の泡を避け、温度が下がるまで注意してください。 </li><li>ドライイーストと乳鉢と乳棒で数滴の水の少量を粉砕することにより、新鮮な酵母ペーストを作る。一貫性は爪楊枝でピックアップし、食品の表面の中心に適用される小規模な可視ドロップを可能にするために十分な厚さになるまで、より多くの酵母や水を加えます。 </li><li>双方は、チャンバーの上に、上ではなく、ビューを不明瞭になるように反転し、チャンバーの中心に食品のバイアルを配置し、ペトリ皿の底に置く。上部に大きな穴を通ってチャンバ内に吸引して、2つ3〜5日齢のハエをご紹介。テープでその穴をカバーし、トップ皿にそれに2 cmの穴をカットして黒いフィルター紙を置きます。 </li><li>それはチャンバーを加熱し、それが食品の表面を照らすように配置されないことが離れて、​​チャンバー上のデスクランプを配置。アセンブリ全体を理想的に22から25までの高湿度と温度℃で環境に配置する必要があります <img src="/files/ftp_upload/old/155_2008_9_3_6/155_figure-04.png" alt="図4" width="284" height="212" /> </li></ol> 4。両方のハエがfoodsurface上にあるときにチャンバーの前壁を介してビデオテープに録画を開始。

ショウジョウバエの勉強攻撃（ミバエ類）

Studying Aggression in Drosophila (fruit flies)

攻撃性は、リソースを防御または取得の枠組みの中で進化生得的な動作です。この複雑な社会的行動は、遺伝、ホルモンや環境要因によって影響される。多くの生物では、攻撃性は生存に不可欠であるが、異なるコンテキストで制御し、抑制する攻撃性もますます重要になっている。近年では、無脊椎動物では複雑な社会的行動の遺伝学とシステム生物学的根拠を調査するためのモデル系としてますます便利になっている。これは部分的にこれらの生物が示す行動の多様なレパートリーによるものです。付属のビデオでは、我々は設計の重要なエコ動物行動学の制約を包含するショウジョウバエの攻撃性を分析するための方法を概説しています。戦い室にハエを追加する;ハエを単離し、ペインティング、戦闘室を作り、ビデオのテーピングの戦い：詳細のための手順が含まれています。このアプローチは、現在のところ攻撃の侵略と他の社会的行動の出力の基礎となる神経回路の起草において重要な候補遺伝子を同定するために使用されています。

攻撃性は、資源を防御または獲得するための枠組みの中で進化した先天的な行動である。この複雑な社会行動は、...によって影響を受ける。

私はサラ・エルテルです。ハーバード大学医学部神経生物学部門のEd Kravitz研究室でポストドクターを務めています。私はシブです。ドイツからの医学部生で、Kravitz研究室で研究ローテーションを行っています。ここでは、ショウジョウバエの闘争をセットアップし、その攻撃性を研究する方法を紹介します。まず、単離用バイアルを準備します。具体的には、フライフードを電子レンジで加熱し、フードが凝固した後に1.5 mLを培養チューブに加えます。その後、綿で蓋をします。最初のステップは、社会的な経験のない、他のハエを見たことがない個体を用意することです。そのためには、対象とする種の後期蛹を、ピンセットを用いてバイアルから慎重に取り出します。準備した分離バイアルを取り出し、綿を取り除いてから、プーパ（puy）をそっと中に入れます。キャップを締め、バイアルにラベルを貼ってください。これらのプーパを、明暗サイクル制御されたインキュベーターに戻します。翌日、羽化（閉鎖）したかどうかを確認し、ハエが羽化した日付を記録します。その後、3日から5日間熟成させます。その間に、個体を識別できるよう、ハエの腹部背面を塗装します。次に、実際の闘争に使用するチャンバーを作成します。そのために、2枚の一般的な顕微鏡スライドガラスを使用し、中央を測定してダイヤモンドカッターピンで印を付け、表面に傷をつけます。すると端が見つかり、顕微鏡スライドガラスは簡単に半分に割れます。これで完了です。次に、スライドの端を接着剤で接着します。その後、2つの半分を接着してボックスを作成します。70% ethanolで洗浄し、続いて水で洗浄して指の汚れを除去します。チャンバーの底部に1%アガロースを満たし、チャンバーを中に固定します。これにより、ショウジョウバエに湿度が提供されます。次に、ハエが争うための対象を与えます。したがって、チャンバーの実際のサイズ自体がテリトリーと見なされる可能性がありますが、そこに餌を与えます。餌はシンチレーションバイアルに入れて提供します。これにより、個々のハエが防御しようとする可能性のある、もう一つのレベルのテリトリーが形成されます。それでは、電子レンジで加熱したばかりの餌をフードカップに充填します。このフードカップにはシンチレーションキャップを使用しており、後ほどショウジョウバエが闘争を行うアリーナとなります。表面全体がしっかり見えるように、わずかに凸状に盛り上げることが重要です。また、気泡が入らないように注意してください。気泡があると、餌に誘引されてフードカップ上を歩くハエにとって障害物となるためです。また、餌カップの中央に酵母ペーストを1滴加えます。まず、酵母ペーストを準備する必要があります。生酵母ペーストを餌カップに入れ、少量の水を加えてペースト状になるまで混ぜ合わせます。餌カップが冷めたら、酵母ペーストを、あるいはその少量を餌カップの中央に置きます。現在、私たちは2つある行動解析室のうちの1つにいます。この部屋は、すべての照明を消せば完全に暗くなり、湿度と温度が制御されています。温度を25°Cに維持し、湿度を40%以上に保つことで、ショウジョウバエの飼育条件を可能な限り一定に制御します。それでは、個体のセットアップを行います。あらかじめ準備しておいた餌入りのカップを、各チャンバーに挿入します。それらをチャンバーの中央に配置するようにしてください。蓋を戻します。それでは、このアスピレーターを使用して、ちょうど1対のハエを吸引します。まず、2匹のハエを吸引してここに取り出し、チャンバー内に導入します。次に、バイアルをこのように保持します。ハエは重力に逆らい光に向かう習性があるため、上方に移動する傾向があるからです。これにより、綿を取り除く際に flies を捕まえやすくなります。ご覧の通り、現在 ator の中に 2 匹の flies がいます。また、これらは塗装された flies であるため、塗装されたものと塗装されていないものをそれぞれ 1 匹ずつ取り出すようにしてください。あるいは、2色を使用する場合、一方をある色で、もう一方を別の色で塗装しますが、遺伝子型は同一のものとします。ここで、それらをチャンバーに挿入します。その後、ワックスボールを取り除きます。ショウジョウバエを投入するための小さな穴があり、タッピングした際にハエが逃げ出さないよう、蓋の位置を調整します。ハエは少し下に落ちますが、そこで軽く息を吹きかけます。強く吹きかけるとハエが乱れてしまうため、穏やかに行います。彼らが落ち着き、チャンバー内の環境を確認するまで、3分から40分ほどかかります。その後、個体がフードカップを占有し始め、闘争が開始されます。ここでチャンバー全体をカメラの前に配置し、フードカップ全体が見えるよう、わずかな角度から撮影できるように高さを調整します。そして、フードカップ全体にピントを合わせます。また、これらの攻撃性アッセイを行う部屋の環境も重要です。人通りや騒音のない、隔離された部屋を使用します。温度は25°Cに維持し、湿度は45%から55%の間に保つことで、その環境下でフライを良好かつ健康な状態に維持するようにしています。また、餌入れの光がハエにとって誘因となるよう、天井の照明を落とします。DFAをモデルシステムとして用い、このようなセットアップを構築することで、攻撃性の強度だけでなく、観察される攻撃性の具体的なパターンも分析することが可能になります。私たちは、発達過程において脳がどのように配線され、それがこれらの行動を学習していない成体としてどのように現れるかという具体的な行動に関心を持っています。そのため、彼らは他のハエとの相互作用が始まるとすぐに飛び出してきます。彼らは飛びかかり方や、攻撃的な振る舞い方を心得ています。そこで私たちは、これらの行動がハエの神経系にどのように組み込まれており、そしてどのように制御されているのかを明らかにしたいと考えています。

studying-aggression-in-drosophila-fruit-flies

Research

JoVE Journal

Biology

生物学

攻撃性は生まれつきの行動であり、以前の戦闘経験はハエでの戦闘戦略とその後の競技結果に影響を与えます。このビデオでは、ショウジョウバエの攻撃的な行動を研究するために使用されるアッセイについて説明しています。この例のプロトコルは、ハエの取り扱いを排除し、したがって、被験者のパフォーマンスに影響を与えるであろう動物のストレスを軽減するセットアップで実行されるアッセイを特徴としています。...

ショウジョウバエアグレッションアッセイ:ハエの行動可塑性をテストする方法

このビデオの記事では、我々は大人のフルーツキイロショウジョウバエを飛んでの嗅覚に依存する食品の検索行動に空腹や満腹の効果を測定するための自動化されたアッセイを説明します。...

での採餌行動のためのシングル·フライアッセイショウジョウバエ

ここでは、ストレスを受けた個人の回避を定量化するためのプロトコルを提示します。このパラダイムは強力でありながらユーザーフレンドリーであり、Drosophila...

社会回避での定量化のための簡単​​なアッセイキイロショウジョウバエ

ミバエの戦いの間に、行動パターンが見られ、ダイナミクスを戦うし、学習や記憶が実験条件によって影響される関連します。ここで紹介するプロトコルは、完全に実験中にハエの取り扱いがなくなり新たな手順を説明します。これは戦いのダイナミクスを向上させ、強力な「敗者」の効果を形成することができます。...

攻撃を研究するための取り扱いがなくなり新たなアプローチと「敗者」の影響で<em&gt;キイロショウジョウバエ</em

私たちは、報酬の状態の変化の指標として自主的なエタノール消費を使用して、ミバエ（ キイロショウジョウバエ ）にやりがいとnonrewarding経験を誘導するためのプロトコルについて説明します。...

使用して報酬を求める行動の変化を測定するための簡単な方法<em&gt;キイロショウジョウバエ</em

この記事では、モチベーションを研究するために、ショウジョウバエの melanogaste rの雄交尾ドライブを使用する行動アッセイを記載します。この方法を使用して、研究者は、この動機の根底にある、分子遺伝学、および細胞メカニズムを解明するために、高度なフライ神経遺伝技術を利用することができます。...

測定とマレの変更交尾ドライブ<em&gt;キイロショウジョウバエ</em

このプロトコルは、 求愛条件付けと呼ばれるショウジョウバエ学習および記憶アッセイを記載する。この古典的なアッセイは、非受容性の前処理された女性による性的拒絶反応後の男性の求愛行動の減少に基づく。この自然な形の行動可塑性は、学習、短期記憶、および長期記憶を試験するために使用することができる。...

ショウジョウバエの訓練と記憶の尺度としてのコンディショニング

Flypubアッセイは、フルーツフライショウジョウバエメラノガスターがエタノールの影響下で表示する挙動を測定します。アッセイは、あらゆるレベルの実験者によって容易に習得され、様々な気化した刺激に適用され、薬物乱用および中毒研究を促進することができる。...

フライパブ、エタノール誘導行動抑制と感作を研究

このプロトコルは、単純な成人 ショウジョウバエ...

ショウジョウバエ成人行動研究のための調整可能な高精細画像化システム

この研究は、成体果実ハエにおける回避的な連想学習の分析を可能にする単純な行動パラダイムを記述する。この方法は、特定の環境コンテキストと感電との間に形成された関連付けによる自然負のジオタキシス行動を抑制することに基づいています。...

ショウジョウバエ 連想回避学習を研究する新たなパラダイムとしての受動的回避行動

自閉症スペクトラム障害(ASD)は、社会的およびコミュニケーション的行動の障害と反復行動の出現に関連しています。 ショウジョウバエ モデルにおけるASD遺伝子と行動障害との相互関係を研究するために、この論文では、社会的間隔、攻撃性、求愛、グルーミング、および慣れ行動を分析するための5つの行動パラダイムについて説明します。...

自閉症スペクトラム障害の ショウジョ ウバエモデルにおける行動評価のパラダイム

学ぶショウジョウバエの攻撃行動の神経機構。個別飼育バイアルで社会的に未経験の個体を準備し、制御された闘争実験を行う方法です。遺伝的要因と行動神経科学の理解に貢献します。

ショウジョウバエの勉強攻撃（ミバエ類）

さらに動画を探す