キイロショウジョウバエ卵巣解離:ex vivo組織調製の技術

- 生きたショウジョウバエから卵巣を分離するには、麻酔をかけた雌を、事前に温めた昆虫解剖培地で満たされた3つの解剖井戸の1つに移動することから始めます。この培地は、組織の完全性と生存率を維持するのに役立ちます。

解剖顕微鏡で、腹部を胸部から分離します。次に、腹部を新しい井戸に移動します。卵巣を分離するには、腹部を後端で保持し、生殖器官を慎重にこすり落とします。最後に、卵巣を新鮮な井戸に移します。このステップの後、卵巣全体を使用するか、さらに卵巣をその構成要素に分解することができます。

各ショウジョウバエの卵巣は、成熟度が上がる卵室のチェーンからなるいくつかの卵巣で構成されています。卵巣を解放するには、不透明な後端で卵巣を固定し、卵巣が適切に分離されるまで卵巣の周りから保護シースを慎重にからかいます。

プロトコル例では、生組織顕微鏡および固定組織顕微鏡で使用するためのショウジョウバエ卵巣の解剖を示します。

- テキストプロトコルに従って麻酔をかけた5匹の雌のハエを選別した後、解剖顕微鏡下で、2対の鉗子を使用して腹部から胸部を切断します。次に、腹部を皿の2番目のウェルに慎重に移します。一方の鉗子を使用して腹部を後端に保持し、もう一方の鉗子のペアを使用して卵巣をゆっくりと押し出します。

次に、鉗子を使用して個々の卵巣を不透明な後端で保持し、からかいまたは固定するために皿の3番目のウェルに慎重に移動します。一対の鉗子を使用して後端を保持し、後端から前端にからかい針を軽く掃くことにより、卵巣の周りから保護シースを慎重にからかいます。