0 閲覧数 • 3:28 分 • April 30th, 2023
- コーンミール培地が入ったバイアルに雄と雌のショウジョウバエのセット数を共収容することから始めます。これにより、子孫の密度を一定に保つことができます。
メスのハエが卵を産むのを許します。次に、成虫のハエを取り除きます。卵は幼虫、蛹、そして最終的に10日で成虫になります。コホートよりも早く出現する新しいハエは、9日目までに駆除する必要があります。同期したフライを、制御条件と実験条件のグループに分けます。オスとメスのハエを同じハウジングにすることで、交配が可能になり、寿命に影響を与える変数が取り除かれます。
数日後、ハエを性別ごとにグループに分けます。対応する実験条件に同数のハエを配置します。3日ごとに、生きているハエを新しいバイアルに移し、死んだハエの数を記録します。すべてのハエが死ぬまで、このプロセスを繰り返します。
少なくとも 3 回の反復実験の後、生存しているハエの平均割合を日ごとにプロットして、各条件の平均生存曲線を生成します。この例では、内分泌かく乱化学物質で治療されたコホートの生存曲線を生成する方法を見ていきます。
- 寿命プロトコルでは、最初に8人の女性と4人の男性が入った20本のバイアルを設置し、それぞれに10ミリリットルのコーンミール食品を充填し、摂氏25度でそれらを収容します。4日後、ハエを捨て、バイアルをインキュベーターに戻します。9日目の午後遅くに、新たに出現したすべてのハエをバイアルから取り出し、バイアルをインキュベーターに戻します。
16〜24時間後、軽い二酸化炭素麻酔下で雌雄の1日齢の成虫ハエを4つのグループに分け、成虫の培地食品を含む250ミリリットルのボトルに移し、3つは異なるEDC濃度を補給し、1つはEE2溶媒のみを添加します。ハエを摂氏25度に2〜3日間維持して、交尾できるようにします。次に、ハエの各コホートを性別で2つのグループに分類します。男女ともに各治療条件内で、各グループをバイアルあたり20人の密度で5つの平行バイアルにランダムに細分化します。.前回の転送で生存したハエの数から死んだハエの数を差し引いた寿命スプレッドシートを準備して、各転送での生存者の数が自動的に取得されるようにします。
3日後、麻酔なしでハエを対応する食物を含む新しいバイアルに同時に移し、死亡を確認します。ハエの年齢と死んだハエの数を記録します。すべてのハエが死ぬまで、3日ごとに転送を繰り返します。