線虫スライド調製:寒天パッド上に動物をマウントする方法

- まず、顕微鏡のスライドを他の2つのスライドの間にテープで挟みます。これらは、アガロースパッド調製のためのサポートとスペーサーを提供します。次に、溶かしたアガロースをスライドに一滴垂らします。すぐに別のスライドで押し下げます。

アガロースが固まったら、アガロースが1枚のスライドに残るようにスライドを慎重に分離します。乾燥したパッドは動物を脱水状態にする可能性があるため、常に作りたてのパッドを使用してください。パッドの完全性を乱す可能性のある亀裂や気泡がないことを確認してください。

次に、パッドの中心に麻酔薬を一滴加え、10〜15匹の動物をそれに移し、バクテリアをできるだけ少なくします。過剰な細菌はイメージングを妨げる可能性があります。麻酔薬が乾いたら、動物に2滴目を加えます。

パッドの上にカバースリップをそっと置きます。動物に損傷を与えないように、気泡を形成したり、過度の圧力をかけたりしないでください。最後に、イメージングの準備が整ったスライドにラベルを付けます。

- イメージング用のスライドを準備することから始めます。溶かしたアガロースを顕微鏡スライドに一滴垂らし、すぐに別の顕微鏡スライドで液滴を押し下げてアガロースを静かに平らにしますアガロースを1分間乾燥させる必要があります。

次に、2つのスライドを慎重に分離し、固化したパッドをスライドの1つに残します。スライドを顕微鏡ステージに置き、アグラスパッドの中央に5〜10マイクロリットルの麻酔薬を追加します。

熱滅菌されたピックを使用して、溶液が乾く前に、ストックプレートから麻酔薬の液滴に10〜15匹の動物をすばやく移します。次に、カバースリップをアガロースパッドのすぐ上に配置し、そっと下に落とします。