JoVE 実験百科事典
生物学
0 回視聴 • 2:14 分 • April 30th, 2023
- まず、ゼブラフィッシュの幼生を、幼生が泳げるガラス底の井戸などの記録室に入れます。獲物であるゾウリムシをマイクロピペットで集め、記録室に入れます。次に、カバースリップの中央に小さな水滴を置き、気泡を避けるためにチャンバーの上に置きます。
次に、白色LEDリングライトを備えた照明システムにチャンバーを配置して、影を排除し、生物をはっきりと見えるようにします。行動記録システムを使用して獲物の捕獲行動を観察します。獲物が見えてくるとすぐに、幼虫は目を収束させ、Jターンして体を獲物に向け、捕獲します。獲物の捕獲行動は、一定期間にチャンバーに残っているゾウリムシの数を記録することで定量化できます。次のプロトコルでは、特定のニューロンのレーザーアブレーション後のゼブラフィッシュの幼生の獲物捕獲行動を評価します。
- 行動記録システムを設定し、テキストプロトコルに従って幼虫を記録チャンバーに入れた後、マイクロピペットを使用して50匹のゾウリムシを採取し、記録チャンバーに入れます。記録室の上部にカバースリップを置くには、記録室の水面に置く前に、カバースリップに小さな水滴を置き、チャンバー内に空気が入らないようにします。
記録チャンバーを照明システムに配置します。次に、毎秒10フレームでタイムラプス録画を11分間開始します。最後に、テキストプロトコルに従って分析を実行します。